毛細支氣管炎患兒檢測外周血CXCR3及其配體的臨床意義

何冬平 嚴華杰 董蔚

毛細支氣管炎患兒檢測外周血CXCR3及其配體的臨床意義

何冬平 嚴華杰 董蔚

目的探討毛細支氣管炎患兒檢測外周血CXCR3及其配體Mig、IP-10、I-TAC的臨床意義。方法選擇2016年6月—2017年5月在我院兒科診斷治療的毛細支氣管炎患兒60例為研究對象，另選擇同期門診健康體檢的一般資料匹配的嬰幼兒30例為對照組。毛細支氣管炎患兒60例根據是否有過敏因素分為過敏亞組30例與無過敏亞組30例。外周血CXCR3檢測采用流式細胞術，血清Mig、IP-10、I-TAC水平檢測采用ELISA方法。結果毛細支氣管炎患兒無論是否有過敏，CD4+ CD183+/ CD4+、CD8+ CD183+/ CD4+均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0．05）；過敏亞組高于無過敏亞組，差異有統計學意義（P＜0．05）。毛細支氣管炎患兒無論是否有過敏，外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0．05）；過敏亞組I-TAC水平高于無過敏亞組，差異有統計學意義（P＜0．05）。結論毛細支氣管炎患兒檢測外周血CXCR3及其配體水平升高，尤其有過敏因素的患兒升高更明顯。

毛細支氣管炎；CXC亞組趨化因子受體3；配體；Mig；IP-10；I-TAC

毛細支氣管炎是一種主要由呼吸道合胞病毒感染引起的嬰幼兒較常見的下呼吸道感染，僅見于2歲以下的嬰幼兒，特別是1～6個月的小嬰兒，病變主要發生在細小支氣管，因此它屬于特殊類型的肺炎，以喘憋、三凹征與喘鳴為主要臨床特點[1-2]。臨床病理主要表現為毛細支氣管上皮細胞壞死與周圍淋巴細胞浸潤，粘膜下充血，水腫，腺體增生，粘液分泌增多[3-4]。毛細支氣管狹窄甚至堵塞，出現通氣與換氣功能障礙。起病急，癥狀嚴重者可發生充血性心理衰竭，呼吸衰竭，缺氧性腦病以及水電解質紊亂。CXC亞組趨化因子受體3（CXCR3）高度表達在活化的T淋巴細胞上，是Th1細胞趨化因子受體，其配體與T淋巴細胞活化、前移密切相關[5]。CXCR3及配體在自身免疫性疾病、病毒感染、腫瘤等疾病的發生及發展過程中發揮重要的作用[6]。研究分析毛細支氣管炎患兒檢測外周血學CXCR3及其配體的臨床意義，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年6月—2017年5月在我院兒科診斷治療的毛細支氣管炎患兒60例為研究對象，另選擇同期門診健康體檢的一般資料匹配的嬰幼兒30例為對照組。毛細支氣管炎患兒60例根據是否有過敏因素分為過敏亞組30例與無過敏亞組30例。對照組男18例，女12例，平均月齡（14.6±3.3）個月。過敏亞組男20例，女10例，平均月齡（15.1±3.5）個月；無過敏亞組男18例，女12例，平均月齡（14.8±3.6）個月。過敏亞組納入標準：符合毛細支氣管炎診斷，2個月～2歲，有過敏因素，如過敏體質，曾有濕疹、過敏性鼻咽、一級親屬有過敏史、曾有食物或者藥物過敏史。無過敏亞組納入標準：符合毛細支氣管炎診斷[7]，2個月～2歲，無過敏因素。對照組納入標準：健康體檢者，無過敏因素，無毛細支氣管炎病史。排除標準：近期有其他疾病，近1個月接受免疫藥物治療。三組性別、平均月齡比較差異無統計學意義（P＞0.05）。研究患兒家長知情同意，并簽署知情同意書；研究經過醫院醫學倫理委員會同意。

1.2 研究方法

采集空腹靜脈血4 ml，2 ml抗凝后檢測CXCR3表達，2 ml檢測受體。外周血淋巴細胞表面CXCR3表達采用流式細胞術檢測。需要試劑：鼠抗人CD4-FITC，鼠抗人CD8-FITC，鼠抗人CD183-PE，熒光標記陰性對照羊抗鼠IgG1-PE，IgG1-FITC，均有美國BD公司提供。上流式細胞儀檢測，用軟件分析數據。血清配體Mig、IP-10以及I-TAC檢測采用ELISA方法，試劑由江蘇普諾生生物科技有限公司提供。所有操作嚴格按照說明書進行。

1.3 分析方法

比較三組外周淋巴細胞CD4+淋巴細胞CD183+表達以及CD8+淋巴細胞CD183+表達率，比較三組血清中Mig、IP-10、I-TAC水平。

2 結果

2.1 三組外周血CD4+淋巴細胞CD183+表達以及CD8+淋巴細胞CD183+表達率

毛細支氣管炎患兒無論是否有過敏，CD4+ CD183+/ CD4+、CD8+ CD183+/ CD4+均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；過敏亞組高于無過敏亞組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 CD4+淋巴細胞CD183+表達以及CD8+淋巴細胞CD183+表達率（%）

2.2 三組患兒外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平比較

毛細支氣管炎患兒無論是否有過敏，外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；過敏亞組I-TAC水平高于無過敏亞組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組患兒外周血清Mig、IP-10、I-TAC水平比較

3 討論

支氣管炎系指支氣管發生炎癥，小兒最常見且較嚴重的是毛細支氣管炎，好發于冬季，可引起局部流行。毛細支氣管炎的病變主要發生在肺部的細小支氣管，也就是毛細支氣管，所以病名為“毛細支氣管炎”，通常是由普通感冒，流行性感冒等病毒性感染引起的并發癥，也可能由細菌感染所致，是小兒常見的一種急性下呼吸道感染。毛細支氣管炎的病原主要為呼吸道合胞病毒，可占80%或更多；其它依次為腺病毒、副流感病毒、鼻病毒、流感病毒等；少數病例可由肺炎支原體引起；感染病毒后，細小的毛細支氣管充血，水腫，粘液分泌增多，加上壞死的粘膜上皮細胞脫落而堵塞管腔，導致肺氣腫和肺不張[8-9]。炎癥?？衫奂胺闻荩闻荼诤头伍g質，故可以認為它是肺炎的一種特殊類型。典型的毛細支氣管炎常發生在上呼吸道感染2～3 d后，出現持續性干咳和發熱，體溫以中、低度發熱為常見，發作喘憋為其特點，病情以喘憋發生后的2～3 d較嚴重，喘憋發作時呼吸增快，可達每分鐘60～80次以上，并伴有呼氣延長和呼氣性喘鳴；重癥患兒表現出鼻煸和“三凹征”（即吸氣時出現鎖骨上窩，胸骨上窩及上腹部凹陷），臉色蒼白，口周發青，或出現紫紺，患兒常煩躁不安，呻吟不止；病情更重的患兒可合并心力衰竭或呼吸衰竭，大部分病例治療后均可緩解，極少發生死亡[10]。病理變化主要是毛細支氣管上皮細胞壞死和周圍淋巴細胞浸潤，黏膜下充血，水腫和腺體增生，粘液分泌增多。毛細血管管腔狹窄甚至堵塞，出現通氣和換氣功能障礙。

CXCR3是G蛋白偶聯的穿膜受體，基因定位在染色體Xq13，在體內多臟器病變是指細胞以及炎性細胞例如血管內皮細胞、活化淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞等均有表達[11-12]。靜止期T淋巴細胞、B淋巴細胞以及粒細胞上不表達或者基本不表達。Th1細胞可特征性表達CXCR3，其是活化Th1細胞的標志之一。CXCR3配體是ELR-CXC趨化因子，單核巨噬細胞、人成纖維細胞、淋巴細胞、肝實質細胞、內皮細胞、HL60細胞等可經IFN-γ誘導表達IFN-γ誘導性單核細胞因子（Mig），IFN-γ誘導性蛋白10（IP-10），IFN-γ誘導性T細胞α化學趨化因子（I-TAC）[13]。與T淋巴細胞活化、遷徙、浸潤關系密切相關，并與CXCR3具有高選擇性。CXCR3與其配體具有趨化功能，CD4+Th1細胞與效應CD8+T淋巴細胞表達CXCR3，活化Th1細胞受趨化因子Mig、IP-10、I-TAC的作用達到病變組織，分泌IFN-γ極化Th1細胞，并參與抗病毒、吞噬細胞活化過程，并誘導人成纖維細胞、單核巨噬細胞、內皮細胞、淋巴細胞、肝實質細胞等分泌相關趨化因子，招募更多的T淋巴細胞參與病變組織的免疫反應過程中[14-15]。CXCR3與其配體還參與不同免疫細胞的免疫功能，抑制血管的生成，參與損傷后的修復過程等。在病毒感染過程中，外周血干戈細胞以及組織內IP-10表達水平增高。CXCR3在活化的T淋巴細胞表面表達，提示CXCR3及配體可能參與了T淋巴細胞介導的抗感染免疫過程中。有研究顯示，在乙肝患者炎癥局部NK細胞、Th1細胞浸潤，與CXCR3趨化的相關的靶細胞一致。CXCR3及其配體還參與自身免疫性疾病，具有抗腫瘤作用，參與移植免疫等。在本次研究中，毛細支氣管炎患兒無論是否存在過敏因素，CXCR3與其配體表達水平均高于對照組，提示其參與了毛細支氣管炎的發生發展過程。而有過敏因素的患兒CXCR3表達以及其配體I-TAC表達水平更高，提示其可能受過敏因素的影響。

綜上所述，毛細支氣管炎患兒檢測外周血CXCR3及其配體水平升高，尤其有過敏因素的患兒升高更明顯。

[1] 《中華兒科雜志》編輯委員會，中華醫學會兒科學分會呼吸學組．毛細支氣管炎診斷、治療與預防專家共識（2014年版）[J]． 中華兒科雜志，2015，53（3）：168-171．

[2] 蔡呈宏． 布地奈德治療毛細支氣管炎35例臨床療效及炎性因子分析 [J]． 環球中醫藥，2013，6（S1）：88-89．

[3] 詹璐，邵征洋，連俊蘭，等． 嬰幼兒毛細支氣管炎運用負壓呼氣流量技術的研究 [J]． 中華全科醫學，2016，14（1）：81-83．

[4] 桑桂梅． 氨茶堿聯合細辛腦治療毛細支氣管炎[J]． 新鄉醫學院學報，2010，27（2）：168-170．

[5] 王昌敏，趙進，黃睿． 細胞因子受體CXCR3過表達對胃癌患者預后的研究 [J]． 檢驗醫學與臨床，2017，14（14）：2064-2066，2070．

[6] Murakami T，Kawada K，Iwamoto M，et al． The role of CXCR3 and CXCR4 in colorectal cancer metastasis[J]． Int J Cancer，2013，132（2）：276-287．

[7] 王慕狄 ． 兒科學 [M]． 5版 ． 北京：人民衛生出版社，2001：30．

[8] 全瑩禹，黃英，閆莉． 重慶市秋冬季支氣管哮喘患兒急性加重與呼吸道非細菌病原感染分析[J]． 實用兒科臨床雜志，2011，26（10）：742-744．

[9] 趙小飛，向志云，吳顯勁． 毛細支氣管炎患兒血清γ干擾素、白細胞介素-4水平變化及其臨床意義[J]． 實用兒科臨床雜志，2011，26（4）：272-273．

[10] 康佳蘭，李建明，毛發明． 氨茶堿在嬰幼兒喘息性疾病的臨床應用與安全性評價[J]． 齊齊哈爾醫學院學報，2015，36（27）：4139-4141．

[11] 劉亮華，段建敏． CXCR3的2種亞型在泌尿系腫瘤中的研究進展 [J]． 現代醫藥衛生，2016，32（9）：1346-1348．

[12] 孫立華，朱斌，周艷彩，等． Th17細胞表面CCR4、CCR6、CXCR3表達量檢測對慢性乙型肝炎患者病情評估的價值[J]． 中國現代醫學雜志，2017，27（3）：69-73．

[13] Utsumi T，Suyama ，mamura Y，et al． The association of CXCR3 and re- nal cell carcinoma metastasis[J]． J Urol，2014，192（2）：567-574．

[14] Billottet C，Quemener C，Bikfalvi A． CXCR3，a double-edged sword in tumor progression and angiogenesis[J]． Biochim Biophys Acta，2013，1836（2）：287-295．

[15] 張翔，李文倩，李建平，等． CXCR3及其相關配體的研究進展[J]．免疫學雜志，2013，29（4）：365-368．

Clinical Significance of Detecting CXCR3 and Its Ligand in Peripheral Blood of Children With Bronchiolitis

HE Dongping YAN Huajie DONG Wei Pediatrics Department, Nanxiang Hospital of Jiading District, Shanghai 201802, china

ObjectiveTo discuss the clinical significance of detecting CXCR3 and its ligand in peripheral blood of children with bronchiolitis.Methods60 cases with bronchiolitis from June 2016 to May 2017 were selected as objects, and 30 cases of matched infants were selected as control group. 60 cases with bronchiolitis were divided into 30 cases in allergic group and 30 cases in no allergic group according to whether with allergic factors. Peripheral blood CXCR3 was detected by flow cytometry, and serum Mig, IP-10 and I-TAC levels were detected by ELISA.ResultsChildren with bronchiolitis, whether or not they had allergies, CD4+ CD183+/ CD4+ 、CD8+ CD183+ / CD4+ were higher than those in the control group(P ＜ 0.05); The allergic group was significantly higher than the no allergic subgroup, which showed significant difference(P＜ 0.05). Children with bronchiolitis, whether or not they had allergies,peripheral serum Mig, IP-10, I-TAC were higher than those in the control group(P ＜ 0.05); I-TAC in the allergic group was significantly higher than the no allergic subgroup, which showed significant difference(P ＜ 0.05).ConclusionThe levels of CXCR3 and its ligands in peripheral blood of children with capillary bronchitis are significantly increased, especially in children with allergic factors.

bronchiolitis; CXCR3; ligand; Mig; IP-10; I-TAC

R563

A

1674-9316（2017）22-0038-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．22．018

上海市嘉定區南翔醫院兒科，上海 201802