音樂電針對SAMP8模型小鼠血清MDA含量、SOD活力及行為學的影響

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(1.北京中醫藥大學，北京 100029;2.北京中醫藥大學第三附屬醫院，北京 100029)

音樂電針對SAMP8模型小鼠血清MDA含量、SOD活力及行為學的影響

陳軒霆1,王詩惠1,周源1,姚海江1,姜靜1,時素華2*

(1.北京中醫藥大學，北京 100029;2.北京中醫藥大學第三附屬醫院，北京 100029)

目的 探討音樂電針對SAMP8 小鼠血清中SOD活力、MDA含量及其行為學的影響。方法 將8月齡雄性SAMP8 小鼠18只隨機分為3組，即:模型組(N)、音樂電針組(M)、藥物組(D)；同月齡雄性SAMR1小鼠6只作為空白組(C)。模型組和空白組不予以治療；音樂電針組配相關穴位進行針刺治療；藥物組予鹽酸多奈哌齊(0.92 mg/g)灌胃。治療15 d后用Morris水迷宮檢測各組小鼠學習記憶能力；測定血清中SOD活力和MDA含量。結果 治療結束后，模型組的逃避潛伏期時間大于空白組(P<0.01)；藥物組的逃避潛伏期變化不明顯；音樂電針組的逃避潛伏期時間明顯小于模型組(P<0.05)。模型組較空白組血清MDA含量升高,SOD活力降低(P<0.01);音樂電針組和藥物組較模型組SOD活力升高，MDA含量降低(P<0.01)。結論 音樂電針可能通過降低SAMP8小鼠血清中MDA含量，提升SOD活力，改善SAMP8小鼠的學習記憶功能，具有一定抗老年性癡呆的功能。

SAMP8小鼠；阿爾茨海默病；音樂電針；抗氧化

老年性癡呆, 亦稱阿爾茨海默病(AD)，是一種好發于老年群體，以進行性認知功能損害、記憶能力降低的中樞神經系統退變性疾病。AD的病因機制較為復雜，發病率高，以及缺乏較好的預防治療手段，給社會帶來嚴重的負擔。為此,本實驗以SAMP8快速老化小鼠作為模型，選取音樂電針作為治療手法，在觀察行為學指標的同時測定小鼠大腦血清MDA含量和SOD活力變化，為音樂電針治療老年性癡呆提供一定的科學實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康8月齡,雄性,體質量(30±2) g，清潔級SAMP8、SAMR1小鼠，均由天津中醫藥大學第一附屬醫院實驗動物中心提供，合格證編號：SCXK(津)2008-0001。實驗前適應性喂養1周，溫度為(23±1) ℃，12 h光照，濕度45%，自由進食，單籠飼養，排除飲食及環境等所有可能對實驗動物產生的影響。

1.2 儀器與藥品 韓氏穴位神經刺激儀，HANS-202型(南京濟生醫療科技有限公司);ZJ-12H音樂電針治療儀(中國針灸學會研制，哈爾濱致厚醫療器械有限公司生產);Morris水迷宮(中國醫學科學院藥物研究所)；SOD、MDA試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；鹽酸多奈哌齊片[衛材(中國)藥業有限公司制造，批號:H20050978]。

1.3 分組 隨機選取18只SAMP8小鼠分為模型組、音樂電針組、藥物組,以及同背景、同月齡6只SAMR1小鼠作為空白組。

1.4 治療方法 音樂電針組:以1寸毫針點刺小鼠水溝穴，向下平刺百會穴、向上平刺印堂穴(穴位選取參考實驗動物針灸穴位圖譜)。進針深度為3～5 mm，百會穴、印堂穴針柄接音樂電針治療儀，頻率為2 Hz，電流強度為1 mA，以此同時選取節奏明朗、速度與力度適中的音樂處方：《碧海揚帆》，調節強度以使動物不掙扎嘶叫保持安靜為度，留針20 min。藥物組：將由用雙蒸水和鹽酸多奈哌齊配制成1 mg/mL的濃度，0.92 mg/kg的劑量灌胃給藥。模型組、空白組：只做和音樂電針組治療過程的相同束縛。以上4組進行同步實驗，1次/d，連續15 d。

1.5 行為學檢測 各組動物在治療結束后，采用Morris水迷宮測試小鼠定位航行及空間搜索之學習記憶能力，同時記錄各組動物到達站臺的逃避潛伏期游泳時間，檢測行為學指標。

1.6 生物指標檢驗與方法 待行為學實驗結束后，摘除小鼠眼球取血，將所得血液迅速放入1 mL的離心管中。低溫離心15 min(4 ℃，2～4 h,3 000 r/min)，將離心所得上清液迅速移入離心管，移入低溫冰箱(-20 ℃)，等待檢測。用SOD、MDA試劑盒檢測其活力與含量，測定時嚴格按照試劑盒的說明進行操作。

2 結果

2.1 音樂電針組與其他組對小鼠血清MDA含量、SOD活力變化影響 見表1。

表1 各組小鼠血清MDA含量、SOD活力比較

注：與空白組比較，##P<0.01；與模型組比較，△△P<0.01；與藥物組比較，▲P<0.05

2.2 音樂電針組與其他組小鼠隱蔽平臺實驗逃避潛伏期比較 見表2。

表2 音樂電針組與其他組小鼠隱蔽平臺實驗逃避潛伏期比較±s,n=6)

注：與空白組比較，##P<0.01；與模型組比較，△P<0.05

3 討論

百會、水溝、印堂穴，均位于任督二脈上，為臨床針灸治療老年性癡呆的常用穴位。研究[1]表明，針灸治療百會等相關穴位，通過提高小鼠大腦內的乙酰膽堿含量，從而達到改善老年癡呆模型小鼠的學習記憶能力。本實驗結果顯示，音樂電針針刺百會、印堂、水溝，使SAMP8小鼠的逃避潛伏時間明顯減少,表明了音樂電針對老年癡呆有一定的治療作用[2-6]。楊俊生等[7]實驗結果表明,音樂電針配合藥物效果優于單純藥物效果,說明音樂電針與藥物的配合可以顯著提高臨床療效果。

本實驗結果顯示,模型組小鼠與空白組比較，Morris水迷宮測試學習記憶能力下降，藥物組與模型組相比較，潛伏期變化不明顯，可能是該批老鼠耐藥性強，從而藥物治療對其行為影響較小；音樂電針組與模型組相比較，學習記憶能力提高，提示長期音樂針刺，可以改善小鼠的學習記憶能力。音樂電針組血清中MDA含量減少、SOD活力升高，提示音樂電針可能通過降低SAMP8小鼠血清中MDA含量，提升SOD活力，從而改善SAMP8小鼠的學習記憶功能，具有一定抗老年性癡呆的功能，其具體機制尚需進一步的實驗研究。

[1]張衛,劉來虎,殷克敬.針灸對老年癡呆模型小鼠防治作用的實驗研究[J].陜西中醫,2001,22(10):633-634.

[2]Smith M A,Rottkamp C A,Nunomura A,et al.Oxidative stress in Alzheimer’s disease[J].Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease,2000,1502(1):139-144.

[3]孫上明,余曙光,曾道冰,等.電針涌泉穴對老年大鼠自由基代謝影響的研究[J].中國自然醫學雜志,2002,4(2):80-82.

[4]王少錦,李愛英.針刺對擬癡呆大鼠腦內自由基系統酶活性的影響[J].中國老年學雜志,2004,24(1):47-49.

[5]李東紅,段燦燦,郝石磊,等.針刺合谷、太沖對老年癡呆模型大鼠行為學及氧自由基的影響[J].北京中醫藥,2010,29(4):311-313.

[6]高希言,賈志良,艾炳蔚.針灸對亞急性衰老小鼠抗老化作用的研究[J].江蘇中醫藥,2003,24(2):53-54.

[7]楊俊生,衣蕾,蔣宏偉.音樂電針療法對腦出血大鼠血腫周圍腦組織SODI活力及形態學的影響[J].陜西中醫,2011,32(2):238-240.

Musicalelectro-acupuncturetherapyontheSODvigour,MDAcontentandtheirbehaviorsintheserumofSAMP8mice

CHEN Xuanting1,WANG Shihui1,ZHOU Yuan1,YAO Haijiang1,JIANG Jing1,SHI Suhua2*

(1.Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;2.The third affiliated hospital of Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China)

ObjectiveTo discuss the effect of musical electro-acupuncture therapy on the super oxide dismutase activity,malondialdehyde content,and their behaviors in the serum of SAMP8 mice.Methods18 8-month-old male mices were randomly divided into three groups,model group(N),musical electro-acupuncture group(M),drug group(D)and 6 SMR1 mices with the same age as blank group(C).The mice in model group and blank group will not be treated,the mice in musical electro-acupuncture group will be treated with acupuncture in related acupuncture acupoints;the mice in drug group with donepezil hydrochloride gavarage.(0.92 milligrams per kilogram).After the treatment for 15 days,Morris water maze was used to test the learning and memory ability of mice and to detect the super oxide dismutase activity and malondialdehyde content in the serum.ResultsAfter the treatment,the escape latency of the mice in model group is longer than that blank group(P<0.01);the change of escape latency of the mice in drug group is not quite obvious;while the escape latency in musical elctro-acupuncture group is clearly shorter than that model group (P<0.05).In model group,the malondialdehyde content is higher than that blank group,but the super oxide dismutase activity decreases(P<0.01);in musical electro-acupuncture group and drug group,super oxide dismutase activity increases,while the malondialdehyde content decreases(P<0.01).ConclusionMusical electro-acupuncture therapy may improve the learning and memory ability through decreasing the malondialdehyde content and increasing super oxide dismutase activity in the serum,hence could prevent and cure senile dementia.

SMAP8 mice;alzheimer disease;musical electro-acupuncture;anti-senile dementia

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.007

國家自然科學基金資助項目(81273825);教育部大學生創新性實驗計劃項目(201210026020)。

陳軒霆(1991-)，男，大學本科。研究方向：針灸推拿學。

] 時素華，女，博士，主治醫師，電話:1381137923，電子信箱：mollyflower@163.com。

R285.5

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：2095-6258(2014)04-0582-03

2014-04-12)

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