中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流動力學(xué)及小鼠微循環(huán)的影響

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(長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117)

中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流動力學(xué)及小鼠微循環(huán)的影響

常志達(dá)，律廣富，張婧卓，王建瑋，林賀，曲曉波，林*

(長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117)

目的 觀察中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流動力學(xué)和小鼠腸系膜微循環(huán)的影響，進而探討其抗腦缺血的作用機制。方法 采用結(jié)扎大鼠頸外動脈的方法，以大鼠腦血流量、腦血管阻力、血壓、心電等為觀測指標(biāo)，采用注射高分子右旋糖酐造成小鼠微循環(huán)障礙，以小鼠腸系膜微動脈的流速、血管入口直徑和出口直徑的變化為觀測指標(biāo)。結(jié)果 中風(fēng)回語顆粒(6，3，1.5 g/kg)可增加大鼠腦血流量(P<0.05)，降低腦血管阻力及血壓，但對大鼠心率無明顯影響；中風(fēng)回語顆粒(6，3 g/kg)可以升高小鼠血液流速、擴張血管管徑(P<0.05，P<0.01)。結(jié)論 中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流動力學(xué)及小鼠腸系膜微循環(huán)具有較好的改善作用，其抗腦缺血的作用機制可能與其增加腦血流量及改善微循環(huán)有關(guān)。

中風(fēng)回語顆粒；血流動力學(xué)；微循環(huán)；大鼠

中風(fēng)回語顆粒是臨床多年的經(jīng)驗方，該方由石菖蒲、膽南星、冰片、黃連、遠(yuǎn)志、川芎、郁金、土鱉蟲、大黃(酒炙)組成，是國醫(yī)大師任繼學(xué)教授多年臨床經(jīng)驗總結(jié)而成，其散劑作為長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院的院內(nèi)制劑已在臨床應(yīng)用十余年，療效好。現(xiàn)代臨床研究表明本方用于治療缺血性中風(fēng)引起的痰瘀阻絡(luò)癥，癥見舌蹇言澀或不語。本實驗通過觀察中風(fēng)回語顆粒對實驗性大鼠腦血流量、腦血管阻力、血壓、心電和小鼠腸系膜微循環(huán)等的影響，旨在進一步探討中風(fēng)回語顆粒抗腦缺血的作用機制[1-2]。

1 材料

1.1 動物 Wistar雄性大鼠50只，體質(zhì)量230～270 g；昆明種小鼠50只，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半，均由吉林大學(xué)動物中心提供，動物合格證編號：SCXK-(吉)2003-0005。

1.2 藥品與試劑 中風(fēng)回語顆粒(長春中醫(yī)藥大學(xué)研發(fā)中心提供);銀杏葉分散片(湖南方盛制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z20050272，產(chǎn)品批號：120505)；水合氯醛(沈陽市試劑三廠)；肝素(北京鼎國生物技術(shù)有限公司)；PBS緩沖液；鹽酸腎上腺素注射液(上海禾豐制藥有限公司)。

1.3 儀器 Power Lab 8通道生理記錄儀(埃德儀器國際貿(mào)易有限公司產(chǎn)品)；微循環(huán)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品)。

2 方法

2.1 大鼠腦血流動力學(xué)指標(biāo)測定 取Wistar大鼠50只，隨機分為5組,即中風(fēng)回語顆粒高(6 g/kg)、中(3 g/kg)、低(1.5 g/kg)劑量組、陽性藥組(銀杏葉分散片0.2 g/kg)和空白組，每組10只。各組均灌胃給藥6 d。第7天腹腔注射10% 水合氯醛(0.35 mL/100 g)麻醉，進行手術(shù)。仰臥固定在手術(shù)臺上，切開右上腹，暴露十二指腸，以備十二指腸給藥。頸部碘伏消毒后，正中切口，鈍性分離甲狀腺等組織。分離左側(cè)頸總動脈及頸外動脈，并結(jié)扎頸外動脈，阻斷頸外動脈供血。選用1 mm電磁流量探頭按放在頸總動脈上(其口徑與頸總動脈直徑一致),利用頸總動脈的血流量反映供應(yīng)腦內(nèi)的頸內(nèi)動脈血流量[3-4]。分離右側(cè)頸總動脈，插管經(jīng)壓力感受器記錄血壓(mmHg)。插肢體電極檢測心電圖。

完成有關(guān)記錄裝置的準(zhǔn)備工作，待動物狀態(tài)穩(wěn)定后，同步記錄給藥前及給藥后即刻和5，10，30，60，90，120 min各時間點的頸總動脈血流量、心電圖、血壓等。腦血管阻力用血管兩端壓力差與血流量的比值表示。

2.2 小鼠腸系膜微循環(huán)觀察 將昆明種小鼠隨機分成5組,每組10只，雌雄各半。即空白組、陽性組(銀杏葉分散片 0.3 g/kg)、中風(fēng)回語顆粒高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)劑量組。

各組采用等容積不等濃度藥液灌胃給藥，空白組灌胃等體積蒸餾水，1次/d，連續(xù)7 d。實驗前動物禁食不禁水12 h，第7天給藥后60 min，各組小鼠用3%水合氯醛(0.1 mL/10 g)腹腔注射麻醉，仰臥固定于手術(shù)臺上，四肢線繩固定，腹部去毛，于腹部正中恥骨聯(lián)合上切一長約1.5 cm的切口，輕輕拉出一段腸袢，將腸系膜放在恒溫37 ℃平臺上,腸管浸入PBS緩沖液中,脫脂棉吸凈周圍體液，采用透射光源，放大倍數(shù)為6×10倍。觀察滴加鹽酸腎上腺素(Ard溶液50 μg/mL,10 μL)前后及滴加鹽酸腎上腺素5 min后，各組小鼠腸系膜微動脈的流速、血管入口直徑和出口直徑的變化，以血管出口直徑和入口直徑的平均值，微動脈流速為指標(biāo)，進行判定。

3 結(jié)果

3.1 中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流量的影響 見表1。

表1 中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流量的影響 mL/min

注：與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01

3.2 中風(fēng)回語顆粒對腦血管阻力的影響 見表2。

3.3 中風(fēng)回語顆粒對小鼠微循環(huán)的影響 見表3。

表2 中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血管阻力的影響 mmHg(mL/min)

注：與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01

組 別血流速度/(μm/s)管徑/μm空白組 116．5±16．7 70．2±20．1 8．74±1．58 7．23±1．31 陽性組 156．2±35．0##103．1±13．9###12．31±2．99##8．79±1．80#高劑量組136．0±21．9# 108．6±27．9## 10．49±2．08# 8．50±1．37#中劑量組130．6±18．7 107．9±26．1## 10．40±1．91# 8．01±1．15 低劑量組126．9±25．3 79．3±16．9 8．93±1．87 7．47±1．53

注：與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001

4 討論

中風(fēng)回語顆粒方中君藥石菖蒲滌痰宣竅，寧神益志；膽南星清化熱痰；冰片開竅醒神，清熱；郁金化瘀開竅，清瀉心火；黃連苦寒，擅清瀉心火。4藥合用，既可助君藥滌痰宣竅，又可清心包熱邪，以治痰熱蒙蔽清竅，共為臣藥。佐使以川芎活血行氣，土鱉蟲活血化瘀通絡(luò)；大黃清熱瀉火，瀉下通便，導(dǎo)熱下行。諸藥合用，共奏滌痰宣竅，透腦清神之功效。

本實驗主要考察中風(fēng)回語顆粒對大鼠腦血流動力學(xué)及小鼠腸系膜微循環(huán)的影響，研究結(jié)果表明，中風(fēng)回語顆粒具有增加腦血流量，降低腦血管阻力及血壓，改善血液微循環(huán)，加快血液流動、擴張血管等作用。其抗腦缺血的作用機制可能與改善腦血流動力學(xué)及血液微循環(huán)有關(guān)[5-7]。

[1]梁賢棟,劉龍民,胡宗仁.活血化瘀在缺血性中風(fēng)治療中的應(yīng)用[J].吉林中醫(yī)藥,2009,29(1):21-23.

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[3]徐叔云.藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982:954.

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EffectsofZhongfengHuiyuParticlesonhemodynamicsofratsandmicrocirculationofmice

CHANG Zhida,Lyu Guangfu,ZHANG Jingzhuo,WANG Jianwei,LIN He,QU Xiaobo,LIN Zhe*

(Changchun University of TCM,Changchun 130117,China)

ObjectiveTo observe the effect ofZhongfengHuiyuParticleson hemodynamics of rats and mesenteric microcirculation of mice,and to explore its mechanism of action of cerebral ischemia.MethodsThe method of ligation of extenal carotid artery of rats was adopted.The blood flow,cerebral vascular resistance,blood pressure and ECQ of rats are observational indexes.The injection of polymer dextran was used to cause microcirculatory disturbance in mice.The mesenteric arterioles of velocity,outlet diameter,blood vessels,entrance diameter changes of mice are observational indexes.ResultsZhongfengHuiyuParticles(6 g/kg,3 g/kg,1.5 g/kg)can increase the blood flow of the rats (P<0.05),reduce cerebral vascular resistance and blood pressure,but it had no obvious effect on rats’ heart rates;ZhongfengHuiyuParticles(6 g/kg，3 g/kg)can increase blood flow in mice,expand blood vessel diameter.ConclusionZhongfengHuiyuParticleshave a good effect on hemodynamics of rats and mesenteric microcirculation of mice.The mechanism of action of cerebral ischemia might be related with the increase of blood flow and the improvement of microcirculation.

ZhongfengHuiyuParticles;hemodynamics;microcirculation;rats

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.009

科技部“重大新藥創(chuàng)新”專項課題(2009ZX09012-115)。

常志達(dá)(1989-)，女，碩士研究生。研究方向：中藥復(fù)方制劑分子藥理學(xué)及其應(yīng)用研究。

] 林 ，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，電子信箱：linzhe1228@163.com。

R285.5

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：2095-6258(2014)04-0587-03

2014-03-22)

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