血清腫瘤標志物NSE、CA-125在非霍奇金淋巴瘤診斷及預后判定中的臨床價值

房麗 王軼楠 馬守東 肖建波 李海麗 王玲玲 劉翠華

·論著·

血清腫瘤標志物NSE、CA-125在非霍奇金淋巴瘤診斷及預后判定中的臨床價值

房麗 王軼楠 馬守東 肖建波 李海麗 王玲玲 劉翠華

目的探討血清腫瘤標志物NSE和CA-125在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表達情況及臨床意義。方法采用電化學發光免疫測定法測定56例NHL患者血清腫瘤標志物NSE和CA-125的表達水平，判定NSE和CA-125的表達與NHL患者臨床特征及其預后的相關性。結果56例NHL患者化療前血清NSE值(34.63±8.54)μg/L，CA-125(47.59±9.53)μg/L，均明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；且NSE、CA-125表達水平的高低與NHL患者B癥狀、臨床分期、IPI預后指數及治療效果等臨床特征相關(P<0.05)。結論血清腫瘤標志物NSE、CA-125聯合定量檢測可提高NHL診斷敏感性，同時對NHL臨床分期、療效判定及預后等方面具有一定臨床意義。

神經元特異性烯醇化酶；糖鏈核心蛋白抗原；非霍奇金淋巴瘤；腫瘤標志物

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是來源于造血淋巴組織、異質性非常強的一類腫瘤，近年來發病率呈逐年升高趨勢；目前，NHL的診斷主要依據組織病理學結果，而病理檢查手段并不能反映臨床分期、腫瘤負荷、侵襲能力和浸潤程度以及治療的反應等。所以，臨床上除結合疾病特征和影像學檢查外，一些血清腫瘤標志物也越來越多顯示其在淋巴瘤的早期診斷、監測治療、療效評價、預后判定和預測復發中的臨床意義。本文通過探討NSE、CA-125與NHL的關系，擬尋找一種或多種和腫瘤生物學行為相關、特異性較強、易于檢測、適合隨訪的分子蛋白水平的檢測指標，以便為臨床實現個體化診治提高可靠實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2008年1月至2011年1月唐山市人民醫院收治初診NHL 56例(NHL組)，男42例，女14例；年齡19～76歲，平均52歲；病例均經組織病理活檢及免疫組織學檢查確診為NHL，B細胞亞型44例(彌漫大B細胞淋巴瘤32例，結外邊緣區B細胞粘膜相關淋巴組織淋巴瘤5例，濾泡性淋巴瘤和套細胞淋巴瘤各3例，小淋巴細胞淋巴瘤1例)；T細胞亞型12例(非特異性外周T細胞淋巴瘤6例，NT/T細胞淋巴瘤5例，T淋巴母細胞淋巴瘤1例)。原發結內和結外NHL分別為32例和24例。按Ann Arbor分期，Ⅰ、Ⅱ期患者32例，Ⅲ、Ⅳ期患者24例。按國際預后指數IPI評分，低危-低中危35例，高中危-高危21例。所有患者均有明確可評價的病灶。詳細記錄每位患者年齡、性別、病理分型、臨床分期、是否有B癥狀、LDH水平、β2-MG水平、血常規、IPI評分、治療方案、化療周期數、療效評價等觀察指標，建立數據庫。另選取同期有高熱癥狀、查體淋巴結腫大、最后病理診斷排除惡性疾病的淋巴結良性病變患者12例(良性淋巴結組)；男8例，女4例；年齡16～64歲，平均46歲；其中，急性反應性淋巴結炎6例，慢性淋巴結炎和淋巴結結核患者各3例。健康對照組20例為唐山市人民醫院體檢中心健康體檢者，男12例，女8例；年齡24～72歲，平均50歲。

1.2 排除標準 有嚴重合并癥、重要臟器器質性病變以及有神經系統疾病者。

1.3 實驗方法

1.3.1 標本采集：分別于化療前和4～6周期CHOP/R-CHOP或EPOCH方案化療后采集NHL組患者靜脈全血各2 ml，健康對照組和淋巴結良性組分別于入院初期采全血2 ml。3 500 r/min離心5 min后分離上清液，置于-80℃冰柜凍存備用。

1.3.2 采用電化學發光免疫測定法測定血清NSE、CA125值；試劑盒購自羅氏公司；實驗步驟：按說明書操作，以全自動Labsystems 352型酶標儀測定。用常規法測定外周全血常規、血清LDH和β2-MG水平。試劑盒測定的正常人血清NSE范圍：0～18.0 μg/L；CA125：0～35 μg/L。

1.4 療效評價 療效評價按國際淋巴瘤工作組制定的NHL治療反應標準，分為完全緩解(CR)、不確定的完全緩解(CRU)、部分緩解(PR)、穩定(SD)和進展(PD)；其中，CR+CRU+PR為治療有效組，SD+PD為治療無效組。

2 結果

2.1 NHL組、良性淋巴結組與健康對照組間血清NSE和CA-125標志物表達水平的比較 NHL組化療前血清NSE和CA-125水平明顯升高，與良性淋巴結組和健康對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)；良性淋巴結組與健康對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組兩種血清腫瘤標志物水平比較 ±s

注：與NHL組比較，*P<0.05

2.2 NHL患者臨床特征與血清NSE、CA-125表達相關性分析 56例NHL患者中，血清NSE、CA-125表達水平靈敏度分別為57.14%和41.07%，兩種腫瘤標志物聯合檢測靈敏度和特異度分別為75.6%和93.8%，NHL患者的性別、年齡、病理亞型、淋巴結類型等臨床特征與血清NSE、CA-125的陽性表達差異無統計學意義(P>0.05)；而臨床分期越晚、IPI評分越高、有B癥狀的NHL患者血清NSE、CA-125表達多陽性。見表2。

表2 NHL患者臨床特征與血清NSE、CA-125表達相關性分析 例(%)

2.3 NHL不同分期間血清NSE、CA-125水平的比較 Ⅲ、Ⅳ期NHL患者化療前血清NSE和CA125水平較Ⅰ、Ⅱ期患者明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 血清NSE、CA-125水平與NHL分期的關系

2.4 NHL不同療效組間血清NSE、CA-125水平的比較 56例NHL患者經4～6個周期CHOP/R-CHOP或ECHOP等方案化療后，48例獲得CR或PR(有效組)，8例為SD或PD(無反應組)；與化療前比較，化療后有效組血清NSE、CA125水平明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)；而無反應組化療前后則無明顯變化(P>0.05)。見表4。

3 討論

惡性淋巴瘤預后評估標準多數以臨床表現為主；NHL國際預后指數為年齡>60歲，血清LDH>1倍正常值，一般狀況評分2～4分，臨床分期Ⅲ-Ⅳ期，結外受累部位>1個。而推薦較多的LDH、β2微球蛋白干擾因素太多，特異性差；如肝炎、心肌損傷、感染、血液系統疾病等均可致LDH升高；β2微球蛋白測定主要用于監測近端腎小管的功能，糖尿病腎病、血液系統腫瘤等均可使其升高。隨著現代生物化學、免疫學、分子生物學研究的迅速發展，一些具有潛在前景的標志物正逐漸為人們所認識和評估；血清腫瘤標志物檢測具有損傷性小、敏感性高、操作過程簡便、費用成本低、出結果快等優點；因此，在惡性淋巴瘤輔助診斷中有其獨特優勢。有研究顯示，不同類型腫瘤標志物可出現于不同類型的腫瘤細胞，而同一種腫瘤細胞也可出現2種及以上的腫瘤標志物[1]。

表4 NHL患者不同療效組間血清NSE、CA-125表達情況

注：與治療前比較，*P<0.05

烯醇化酶是糖元酵解關鍵酶，由α、β、γ 3個亞型組成。神經元特異性烯醇化酶(NSE)是烯醇化酶的γ型同工酶，是一種能量代謝酶，可以反映細胞更新和凋亡率；主要特異性的存在于神經元和神經內分泌細胞胞質中[2]，如APUD細胞；它被發現在與神經內分泌組織起源有關的腫瘤中，特別是SCLC中有過量表達；目前NSE主要作為神經系統損失和小細胞肺癌的標志物。近年來隨著研究的深入，已有多項NSE與NHL的相關性研究。1987年即有文獻顯示NSE在惡性淋巴瘤中有表達(11/23)[3]；1999年Massarelli等[4]測定了51例惡性淋巴瘤患者淋巴標本中NSE的表達，16例HL患者中，NSE陽性12例；35例NHL患者中，13例NSE陽性，且NSE陽性病例均在CD30(+)的R-S細胞中有表達，提示惡性淋巴瘤中NSE表達與CD30表達密切相關。2011年Liang等[5]研究顯示：NSE和彌漫大B細胞的關系：NSE高水平組預后更差，美羅華作用有限。綜上研究顯示，NSE在霍奇金淋巴瘤以及非霍奇金淋巴瘤中均有不同程度的表達，且和預后差相關。國內樊慧杰等[6]曾報道NSE在非霍奇金淋巴瘤中的臨床意義：40例NHL中25例患者血清NSE濃度高于正常值上限(占所有病例的62.5%)。

糖鏈核心蛋白抗原(CA125)為一種來自體腔上皮的可微量存在于正常組織的蛋白，是卵巢癌和宮頸癌的首選腫瘤標志物。近幾年研究發現，CA125在NHL患者中顯著增高，且與臨床分期、疾病進展、腫瘤浸潤等相關[7]；NHL最重要的血清學標志物中，β2-MG反映腫瘤負荷，LDH反映腫瘤增生活性，而CA125則反映腫瘤侵襲潛能[8]。實際上CA125并非由NHL細胞直接表達，而可能是NHL細胞釋放的淋巴因子刺激間皮細胞，使后者表達和分泌CA125；所以，CA125不同于由淋巴瘤細胞直接釋放的β2-MG和LDH，而是反映間皮細胞對腫瘤的反應性[9]。錢思軒等[10]報道結果表明，約42% NHL患者血清CA125陽性，而且CA125升高與患者病變范圍、程度、治療有關；在化療后則下降，當達到完全緩解時，CAA125可降至正常。

本研究結果顯示，血清NSE、CA125在56例NHL患者中表達陽性率為57.14%和41.07%；而在健康患者及淋巴結良性患者中含量比較穩定，差別有統計學意義(P<0.05)。兩種腫瘤標志物聯合檢測靈敏度和特異度分別為75.6%和93.8%；陽性率高于單一檢測，靈敏度及特異度均明顯提高；而且NHL臨床分期越晚，IPI評分越高，上述兩項指標表達水平越高，患者預后也越差；而治療有效患者中，治療后的血清NSE、CA-125表達水平較治療前明顯下降(P<0.05)。因此，我們認為聯合檢測血清NSE、CA-125含量可作為NHL患者輔助診斷、療效觀察和預后判定的重要指標之一。因考慮到腫瘤細胞生物學行為的多樣化和治療過程中異質化的可能，我們建議腫瘤標志物應該多項聯合、多次檢測，以動態反映腫瘤細胞學的變化。

綜上所述，血清NSE、CA-125可能是與惡性淋巴瘤疾病侵襲性相關的、新的分子標志物；兩種腫瘤標志物聯合檢測可明顯提高NHL診斷的靈敏度，在NHL診斷、臨床分期、療效判定及預后評估中將具有重要臨床價值，而且可能是美羅華時代新的預后因子，值得臨床進一步關注。

1 宋紅偉,王雅杰.三種血清腫瘤標志物聯合檢測對惡性腫瘤的診斷價值.實用癌癥雜志，2009,24:483-485.

2 Tracy MR,Hedges SB.Evolutionary history of the enolase gene family.Gene,2000,259:129-138.

3 Judith N,Annic G,Jacqueline E,et al.Neuron-specific enolase and malignant lymphomas(23 cases).Virchows Archiv A，1987，412:89-93.

4 Massarelli G,Onida GA,Piras MA,et al.Neuron-specific enolase(gamma enolase,gamma-gamma dimer)expression in Hodgkin’s disease and large cell lymphomas.Anticancer Res，1999，19:3933-3938.

5 Liang W,Panpan L,Qirong G,et al.Prognostic significance of neuron-specific enolase in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with rituximab-based immunochemotherapy.Leukemia δLymphoma,September，2011,52:1697-1703.

6 樊慧杰，耿其榮，徐海鵬，等.血清神經元特異性烯醇化酶在非霍奇金淋巴瘤中的臨床意義.中國腫瘤,2006,15：50-53.

7 Zidan J,Hussein O,Basher W,et al.Serum CA125:a tumor mallker for monitoring response to treatment and follow-up in patients with non-Hodgkin’s lymphoma.Oncologist,2004,9:417-421.

8 Benboubker L,Valat C,Linassier C,et al.A new serologic index for low-grade non-Hodgkin’s lymphoma based on initial CA125 and LDH serum levels.Ann Oncol,2000,11:1485-1490.

9 Zeillemaker AM,Verbrugh HA,Hoynck AA,et al.CA125 secrection by peritonwal mesothelial cells.Clin Pathol,1994,47:263-265.

10 錢思軒，李建勇，吳漢新，等.非霍奇金淋巴瘤血清CA125測定的臨床意義.臨床血液學雜志，2004,17：37-38.

ClinicalsignificanceofserumtumormakersNSE,CA125inthediagnosisandprognosisassessmentofnon-Hodgkin’slymphoma

FANGLi,WANGYinan,MAShoudong,etal.

DepartmentofRadio-Chemotherapy,TangshanPeople’sHospital,Hebei,Tangshan063000,China

ObjectiveTo investigate the clinical significance of the two serum tumor markers-neuron specific enolase(NSE)and carbohydrate antigen 125(CA-125) in the diagnosis and prognosis evaluation of non-Hodgkin’s lymphoma (NHL).MethodsThe serum levels of NSE and CA-125 in 56 patients with NHL were measured by electrochemiluminescence immunoassay.The correlation between the expressions of NSE,CA125 and clinical characteristics as well as prognosis of patients with NHL were analyzed.ResultsBefore chemotherapy the serum levels of NSE [(34.63±8.54)μg/L] and CA-125 [(47.59±9.53)μg/L] in 56 patients with NHL were significantly higher than those in control group (P<0.05),furthermore,the expression levels of NSE and CA-125 were correlated with patient’s symptoms,clinical stage,IPI prognosis index and therapeutic effect.ConclusionThe quantitive detection of NSE combined with CA125 plays an important role in diagnosis,clinical staging and prognosis assessment for patients with NHL,which can increase diagnostic sensitivity.

neuron specigic enolase；carbohydrate antigen 125；non-Hodgkin’s lymphoma；tumor markers

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.20.003

063000 河北省唐山市人民醫院放化科(房麗、王軼楠、馬守東、肖建波、李海麗、王玲玲)；河北省唐山市豐潤區韓城醫院(劉翠華)

R 730.4

A

1002-7386(2014)20-3051-04

2014-06-01)