125I標記重組融合蛋白dTMP-GH在小鼠體內分布的實驗研究

， ， ，，軍平

(第三軍醫大學預防醫學院全軍復合傷研究所，創傷、燒傷與復合傷國家重點實驗室，重慶市納米醫藥工程技術研究中心，重慶 400038)

血小板減少癥常見于放療、化療和骨髓移植患者，嚴重的血小板降低直接威脅到人們的生命安全[1]。目前，臨床上治療血小板減少癥的主要方法為直接輸注血小板，但因治療費用昂貴導致使用受到限制。因此，尋找高效、廉價的升血小板藥物就顯得非常迫切和重要。我室通過基因重組技術成功將血小板生成素模擬肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)和人生長激素(human growth hormone，hGH)進行融合，研制出重組融合蛋白dTMP-GH[2-3]。在此基礎上，我室對該融合蛋白的發酵和純化制備工藝進行了細致的研究，現已能獲得純度大于98%的重組融合蛋白dTMP-GH。作為一種新型升血小板因子，dTMP-GH具有顯著的刺激巨核細胞增殖、分化的作用，以達到促進血小板生成的生物學活性[4]，有望成為治療造血功能障礙引起的血小板減少癥的一種新方式。為了研究dTMP-GH在體內的分布情況，本研究制備了125I-dTMP-GH，并對其在小鼠體內的分布進行研究，證實dTMP-GH融合蛋白具有骨髓偏向性分布的特點，為進一步探索dTMP-GH促血小板生成作用的分子機制奠定了基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

融合蛋白dTMP-GH由本室自行制備，Na125I購自中國原子能科學研究院同位素研究所，快速薄層層析-硅膠紙(ITL-SG)購自美國Gelman公司，Sepdex 75層析柱購自美國GE公司，Iodogen(1,3，4，6-四氯3,6-二苯-甘脲)購自美國Sigma公司，偶聯劑DOTA購自美國Macrocyclics公司，TRIS購自美國Angus公司,其他試劑均為國產分析純。γ免疫計數儀 購自美國Perkin Elmer，電子天平購自沈陽龍騰電子，蛋白純化儀AKTA prifier 10購自美國GE公司，紫外分光光度計購自BECKMAN公司。……