妊娠高血壓血管生成素樣蛋白6的表達(dá)和意義

黃金智　衛(wèi)月　郭潤(rùn)民

[摘要] 目的 探討血管生成素樣蛋白6（Angptl 6）在妊娠高血壓（PIH）患者的表達(dá)和意義。 方法 收集妊娠高血壓患者和對(duì)照組血糖、血脂等生化指標(biāo)和血壓，ELISA方法檢測(cè)血漿Angptl 6的表達(dá)。 結(jié)果 PIH孕婦妊娠第1～3個(gè)月收縮壓顯著高于對(duì)照組，舒張壓從妊娠第2～3個(gè)月明顯高于對(duì)照組；妊娠24周、32周，PIH患者血漿Angptl 6的水平明顯增加（P<0.05）；妊娠24周空腹血Angptl 6和收縮壓與PIH的發(fā)生有相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論 妊娠24周血Angptl 6和收縮壓升高是PIH發(fā)生的危險(xiǎn)因素，Angptl 6可能參與了PIH的發(fā)生發(fā)展。

[關(guān)鍵詞] 子宮內(nèi)膜癌；鞘氨醇激酶-1；1-磷酸鞘氨醇

[中圖分類(lèi)號(hào)] R711.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）13-205-03

[Abstract] Objective To explore the expression and significance of Angptl 6 （angiopoietin-like protein 6） in patients with pregnancy-induced hypertension （PIH）. Methods Blood pressure， blood glucose， blood lipid and other biochemical indicators were measured and plasma Angptl 6 expression was detected by ELISA method for the PIH group and the control group. Results Compared with the control group， the PIH group had significantly higher systolic blood pressure from the first to the third month of gestation and significantly higher diastolic blood pressure from the second to the third month of gestation； PIH group had significantly elevated plasma Angptl 6 level at week 24 and week 32 （P<0.05）； PIH was associated with SBP and fasting plasma Angptl 6 at week 24 of gestation. Conclusion Plasma Angptl 6 level at week 24 of gestation and systolic blood pressure increase are risk factors for PIH. Angptl 6 might be involved in the pathogenesis of pregnancy-induced hypertension.

[Key words] Endometrial carcinoma；Sphingosine kinase 1；Phingosine-1-phosphate

妊娠高血壓綜合征（pregnancy-induced hypertension，PIH）是妊娠期常見(jiàn)疾病，是孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的重要原因[1-2]。PIH的發(fā)病可能與滋養(yǎng)層細(xì)胞侵蝕、胎盤(pán)缺血缺氧、代謝紊亂和血管生成失調(diào)等有關(guān)[3-4]。血管生成素（Angiopoietin，Ang）和血管生成素樣蛋白6（angiopoietin-like protein 6，Angptl 6）是調(diào)控血管生成的重要細(xì)胞因子，Angptl 6的表達(dá)升高可能與脂質(zhì)代謝紊亂和缺氧等有關(guān)[5-6]，我們推測(cè)Angptl 6可能參與PIH的發(fā)病，早期檢測(cè)血Angptl 6是否有助于診斷PIH？因此本研究觀察妊娠早期血清Angptl 6表達(dá)變化，擬探討Angptl 6與PIH發(fā)生的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年8月～2013年12月間在廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院行超聲檢查的單胎妊娠孕婦50例，分為PIH組和對(duì)照組各25例，所有患者簽署知情同意書(shū)，該研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)。無(wú)重大疾病和蛋白尿，BMI≥24kg/m2、血壓<140/90mm Hg的20孕周以上的初產(chǎn)婦可以納入研究。PIH定義為20孕周后收縮壓>140mm Hg或舒張壓>90mm Hg，有或無(wú)蛋白尿，蛋白尿定義為≥0.3g/24h或≥1+（試紙條法），分度參照文獻(xiàn)；高血壓、腫瘤等慢性疾病史患者排除。對(duì)照組為血壓正常并沒(méi)有蛋白尿的孕婦。

1.2 血壓、血脂和Angptl 6的測(cè)定

所有研究對(duì)象與妊娠24周時(shí)檢查直立位血壓，計(jì)算平均動(dòng)脈壓；并留取靜脈血檢測(cè)血脂、血糖等生化指標(biāo)。抗凝的靜脈血，4℃ 7000r/min離心10min，取上清-80℃冰箱保存?zhèn)錅y(cè)。血Angptl 6檢測(cè)參照生產(chǎn)廠家提供的操作說(shuō)明書(shū)，人Angptl 6 ELISA測(cè)定試劑盒購(gòu)自武漢巴菲爾生物技術(shù)有限公司，取100μL血漿加入S1P抗體包被的酶標(biāo)板中，37℃孵育90min，吸出培養(yǎng)基后加入S1P抗體繼續(xù)孵育60min，TBS漂洗3次后，加入生物素標(biāo)記的二抗反應(yīng)30min，TMB法顯色，終止液使反應(yīng)終止后，用酶標(biāo)儀（r=450nm）測(cè)定各孔的吸光度（A）。取3孔標(biāo)準(zhǔn)化處理后的A值平均數(shù)，按標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算Angptl 6的表達(dá)。血脂、血糖等生化指標(biāo)的檢測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

計(jì)量資料以（）表示，兩組比較使用兩樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，兩組比較進(jìn)行x2檢驗(yàn)；血Angptl 6水平與PIH的關(guān)系采用Logistic回歸分析；P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。

2 結(jié)果

2.1 PIH組和對(duì)照組一般資料和妊娠早期血壓的比較

兩組孕婦年齡（均為22～38歲）、體重：PIH組（81.2±9.1）kg；對(duì)照組（78.2±10.3）kg或妊娠前BMI：PIH組（29.3±3.6）kg/m2；對(duì)照組（28.3±3.2）kg/m2、妊娠期間體重增加：PIH組：（12.6±8.3）kg；對(duì)照組（14.6±8.1）kg、分娩時(shí)BMI：PIH組（33.6±3.2）kg/m2對(duì)照組（33.5±4.1）kg/m2和吸煙史等沒(méi)有顯著性差異，此外，分娩時(shí)孕周：PIH組34.3～41.6周；對(duì)照組37.2～42.5周）、出生時(shí)體重：PIH組（3436±657）g；對(duì)照組37.2～42.5周、引產(chǎn)率和剖宮產(chǎn)率（PIH組37%；對(duì)照組38%）；兩組間比較沒(méi)有差異。PIH孕婦妊娠第1～3個(gè)月收縮壓顯著高于對(duì)照組，舒張壓從妊娠第2～3個(gè)月明顯高于對(duì)照組。詳見(jiàn)表1。

3 討論

PIH是妊娠期特有的常見(jiàn)疾病，多發(fā)生在妊娠20周以后與產(chǎn)后兩周，臨床表現(xiàn)為高血壓、蛋白尿、水腫，嚴(yán)重者有頭痛、頭暈、眼花等自覺(jué)癥狀，甚至出現(xiàn)抽搐、昏迷，目前仍然是孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的主要原因[7-9]。妊娠早期滋養(yǎng)層細(xì)胞侵蝕子宮螺旋動(dòng)脈是PIH的啟動(dòng)環(huán)節(jié)，淺表的胎盤(pán)引起其血液灌注減少，繼而導(dǎo)致母體血管內(nèi)皮功能障礙和炎癥因子的釋放，其中炎癥因子、血管生成抑制蛋白、可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1（soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1，sFlt-1）和內(nèi)皮糖蛋白Endoglin等在臨床發(fā)病前已升高；另方面，PIH也與代謝紊亂和缺氧有關(guān)[10-12]。

PIH的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，已有研究結(jié)果提示血管生成調(diào)節(jié)紊亂是其重要機(jī)制之一，而參與調(diào)節(jié)血管生成的因子很多，保持促血管生成因子和血管生成抑制因子二者的平衡十分重要，其中血管生成素和血管生成素樣蛋白是重要的調(diào)控因子，Ang是結(jié)合內(nèi)皮特異的酪氨酸激酶（Tie2）受體結(jié)合，Ang1和Ang2絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生并參與調(diào)節(jié)胎盤(pán)血管的生成，PIH患者循環(huán)Ang1升高而Ang2下降，Ang1可以激活Tie2受體而Ang1阻斷之。Angptls和Ang有相似的結(jié)構(gòu)域，它們不和Tie1受體和Tie2受體結(jié)合，Angptl1-4和Angptl 6作用于內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)血管生成，Angptl 3、Angptl 4和Angptl 6也可以調(diào)節(jié)糖代謝、脂代謝和能量代謝，缺氧等刺激因素可以上調(diào)Angptl 2、4和Angptl 6的表達(dá)[9-13]。Angptl 6即血管生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子，是肝臟生成具有調(diào)控血管生成和抑制肥胖和胰島素抵抗的蛋白因子。糖尿病、肥胖和代謝綜合征病人血Angptl 6水平升高，PIH常存在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，胎盤(pán)生長(zhǎng)因子等促血管生成因子表達(dá)常降低，而PIH患者Angptl 6表達(dá)情況尚未見(jiàn)報(bào)道。

本研究結(jié)果顯示PIH患者血Angptl 6水平升高，推測(cè)其機(jī)制可能有以下三種可能：血Angptl 6水平升高可能是對(duì)胰島素抵抗的反應(yīng)進(jìn)而抑制糖尿病的發(fā)生；升高的Angptl 6可能反映胎盤(pán)存在缺氧狀態(tài)和內(nèi)皮功能障礙；可能與胰島素抵抗和胎盤(pán)缺氧有關(guān)。然而，具體詳細(xì)的分子機(jī)制有待將來(lái)的深入研究。在動(dòng)物模型，Angptl 6可以調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝而不影響脂蛋白代謝，PIH患者常合并脂質(zhì)代謝紊亂和激素失調(diào)，這些臨床特點(diǎn)類(lèi)似于胰島素抵抗綜合征的首發(fā)表現(xiàn)，因此推測(cè)代謝紊亂可能是PIH和心血管疾病的共同機(jī)制[13-15]。樣本量較小、沒(méi)有區(qū)分蛋白尿和非蛋白尿PIH患者等是本研究的局限所在，今后應(yīng)進(jìn)行大樣本多中心隨機(jī)對(duì)照的臨床研究，以及細(xì)分PIH患者進(jìn)行更為精準(zhǔn)的設(shè)計(jì)，以便得到更加客觀和準(zhǔn)確的結(jié)論。

總之，本研究結(jié)果顯示，血Angptl 6水平和妊娠24周收縮壓升高的孕婦發(fā)生PIH的風(fēng)險(xiǎn)較高；進(jìn)一步提示了血管生成素和血管生成素樣蛋白等血管生成調(diào)節(jié)因子參與了PIH的發(fā)病過(guò)程，從血管生成的角度可能為防治PIH提供了新的視野，檢測(cè)血Angptl 6水平和監(jiān)測(cè)收縮壓或許有助于早期診斷、檢測(cè)病情和指導(dǎo)預(yù)后，當(dāng)然有待進(jìn)一步深入的研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王盼盼，孔祥.抗血管生成因子與子癇前期[J].醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（16）：2427-2430.

[2] 袁小松，張一鳴，蔣麗霞，等.血清血管生成因子預(yù)測(cè)子癇前期患病風(fēng)險(xiǎn)的價(jià)值[J].江蘇醫(yī)藥，2012，38（1）：40-42.

[3] 鐘林.子癇前期患者尿液與血清血管生成因子及其受體水平的變化預(yù)測(cè)價(jià)值研究探討[J].中外醫(yī)療，2012，31（1）：165-167.

[4] 宋成文，謝守珍，刁波，等.血管緊張素原基因多態(tài)及血管生成因子與早發(fā)型重度子癇前期的相關(guān)性研究[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28（20）：3338-3340.

[5] 邊旭明.先兆子癇的預(yù)測(cè)：血管生成調(diào)節(jié)因子[J].中國(guó)產(chǎn)前診斷雜志（電子版），2012，2（3）：15.

[6] 夏桂玉，董旻岳，方敏.血管生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子及其與子癇前期的關(guān)系[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2012，39（6）：557-559.

[7] 吳珍珍，穆榮肖.抗血管生成因子在子癇前期早期診斷及治療中的應(yīng)用[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2013，29（2）：102-105.

[8] 符愛(ài)珍，張穎，蔡永廣，等.子癇前期孕婦血清中Ang-2和MMP-2表達(dá)水平的變化及意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2013，15（3）：10-12.

[9] 熊維玲，周春.血管生成素與妊娠[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2009，36（1）：8-10.

[10] 聶改紅，邢軍，高霞.血管生成素-2與子癇前期的相關(guān)性研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2009，25（22）：3825-3827.

[11] 唐亮芳，陳倩.血管生成因子及sEng與子癇前期的預(yù)測(cè)[J].中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2010，11（3）：234-237.

[12] 蘇翠紅，李笑天.妊娠早中期血清標(biāo)記物預(yù)測(cè)子癇前期的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2010，19（5）：387-389.

[13] 劉蔚，傅曉冬.抗血管生成因子和血紅素氧合酶對(duì)子癇前期的影響研究進(jìn)展[J].西南軍醫(yī)，2010，12（4）：751-753.

[14] 侯曉芬，張延麗.子癇前期患者胎盤(pán)組織中Ang-1的表達(dá)及意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2010，5（34）：27-28.

[15] 王麗靜，陳維萍，彭偉，等.重度子癇前期病人血清Ang-2及其可溶性受體水平變化[J].青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，47（3）：248-250.

（收稿日期：2014-05-07）