滄州血站篩查抗-HIV的兩種ELISA試劑質量的評估

薛文穎 王瑞麗 許丹 張燕 張國霞

·調查研究·

滄州血站篩查抗-HIV的兩種ELISA試劑質量的評估

薛文穎 王瑞麗 許丹 張燕 張國霞

抗-HIV；試劑；篩查

目前我國大部分血站對輸血傳染病的篩查方法是ELISA血清學檢測，采用的模式是使用兩個廠家的ELISA試劑對標本進行抗原或抗體篩查。隨著科技的進步分子生物學得到突飛猛進的發展，核酸檢測技術已成熟發展起來。滄州中心血站在2010年著手開展核酸檢測技術應用于獻血者篩查的準備和實驗工作。2012年初我國衛生行政主管部門出臺新的《血站技術操作規程》提出了允許采供血機構采用ELISA檢測和核酸檢測各一遍的檢測模式對血液進行安全檢測。為此，將在兩個ELISA試劑中取消一個，為了探討檢測模式的改變是否對血液安全造成影響，我們僅就兩個ELISA試劑廠家對45 463份獻血者血樣抗-HIV篩查結果進行統計分析，并對篩查出的樣本做進一步確認試驗。結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2012年1月1日至2012年12月31日65 463名次符合《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)ALT快速篩查及HBsAg試紙條快速篩查合格采集大血后留取的血樣。

1.2 試劑與主要儀器 A試劑為 上海科華ELISA抗-HIV1/HIV2(批號：201201011,201206020) B試劑為試劑為 北京萬泰(批號：H20111211,H20120704 )；檢測儀器TECAN EVO150/8全自動加樣器， 奧斯邦的FAME24/20酶免后處理。

1.3 檢驗方法與結果判定 將標本同時用兩個廠家的ELISA試劑嚴格按照試劑盒說明書及操作規程進行檢測。在試驗環境，陰陽性對照符合要求，質控數值在控的條件下：S/CO≥1時判定為陽性，檢測結果為不合格。1>S/CO≥0.7時判定為待查，用兩種試劑進行雙孔再檢，有一孔S/CO≥1時再檢結果為陽性；1>S/CO≥0.7時按其他項報廢。 S/CO<0.7時判定為陰性(本站從血液安全方面考慮設置了灰區，灰區范圍是1>S/CO≥0.7 對抗-HIV檢測處在灰區的標本不報陽性結果按其他項報廢)。

1.4 結果確認 將所有A B試劑檢測出的抗-HIV陽性標本送疾控中心進行確認(WB試驗)。

1.5 統計學分析 計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 A、B兩種試劑對45463份血樣抗-HIV篩查結果 A、B兩種試劑共檢出37份抗-HIV不合格樣本，其中A試劑檢出12份，B試劑檢出36份。 篩查結果顯示A B兩種試劑對抗-HIV篩查有顯著差異。使用B試劑檢測不合格率要明顯高于A試劑(是A試劑的3倍)。見表1、2。

表1 A B兩種ELISA試劑對45463份血樣抗-HIV篩查結果 份

注：與試劑比較，*P<0.05

表2 A試劑和B試劑共篩出37份抗-HIV陽性標本結果 份

2.2 37份抗-HIV不合格標本確認結果 確認為HIV-1抗體陽性的標本9例A, B均已檢出，有4例HIV抗體不確定標本A試劑未能檢出。但從真陽性率看A試劑要高于B 試劑(是B 試劑的3倍)。見表3。

表3 37份抗-HIV不合格標本確認結果

注：A 試劑真陽性率75%，B試劑真陽性率25%

3 討論

多年來，我國對獻血者的血液傳染病的篩查方法是采用2個不同生產廠家的ELISA試劑進行檢測[1]。這種篩查模式對血液安全起到了一定作用。隨著科技不斷發展，國民經濟的不斷提高，分子生物學的時代已悄然到來，核酸檢測應用于血液篩查將引起采供血機構一場跨時代的革命。

自從[2010]226號《衛生部辦公廳關于開展2010年血站核酸檢測試點工作的通知》以來，血站核酸檢測試點單位已有40余家[2]。2012年新的《血站技術操作規程》增加了一種檢測模式即取消一遍ELISA檢測，增加一遍核酸檢測[3]。滄州中心血站就目前使用的兩種ELISA抗-HIV檢測試劑的篩查結果對輸血安全有無差異進行了統計分析。數字說明A、B兩種試劑在質量上有一定差異。A、B試劑雖然未檢出相互漏檢的陽性確認標本，但B試劑的假陽性遠大于A試劑，嚴重的是有4例HIV抗體不確定標本A試劑未檢出。因為單片段的抗體或抗原的感染者我們都不能排除其傳播該病毒的可能性，所以盲目的去掉一種ELISA檢測方法勢必增加了血液的殘余危險度。

ELISA檢測對確保用血安全有相當重要的意義。ELISA可以檢測到因病原體在外周血中存在有間歇性現象而造成核酸檢測漏檢的陽性標本[4，5]。因此，核酸檢測不能完全替代ELISA在血液篩查中的作用。

血液安全的提高，需要科學的方法和先進的技術，但在檢測模式的轉變過程中一定要穩步前進，用大量的試驗來對血液安全的有效性進行評估。相關部門也應該掌握基層的工作情況，對目前試劑的檢測水平和質量加強管理和監控。確保用血安全。

1 中華人民共和國衛生部.獻血者健康檢查要求.GB18467-2011.

2 李金明.我國血站核酸檢測及質量管理的現狀與展望.中國輸血雜志，2012，25:933-934.

3 中華人民共和國衛生部.全血及成分血質量要求.GB18469-2012.

4 曾勁峰,鄭欣,許曉絢.ELISA檢測與NAT在血液篩查應用中的互補性研究.中國輸血雜志，2012,25：1012-1014.

5 王卓妍，陳立，龔曉燕，等.獻血者血液乙型肝炎病毒核酸及血清學篩查策略的探討.中國輸血雜志，2012,25：995-998.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.13.055

061000 河北省滄州市中心血站

R 915.5

A

1002-7386(2014)13-2046-02

2013-12-14)