小金縣疾控中心結核分枝桿菌檢測方法探討

毛太蘭

【摘要】有效控制結核病的障礙在于對機體缺乏早期、準確的檢測方法，結核分枝桿菌檢測作為結核病早期診斷的方法可能具有很高的診斷價值。我們通過了解疾控中心此方面的具體工作，簡要綜述了結核分枝桿菌檢測方法，并針對這些方法做出相關研究進展的探索，旨在與同仁間互相學習，更好的服務于群眾。

【關鍵詞】縣疾控中心；結核病診斷；結核分枝桿菌；檢測方法

【中圖分類號】 R378.91+1【文獻標識碼】B

隨著環境污染和艾滋病的傳播，結核病發病率越發強烈，結核病是由結核桿菌感染引起的慢性傳染病，也是一個嚴重的公共衛生問題。

1結核分枝桿菌檢測的意義

20世紀80年代后，由于艾滋病和結核分枝桿菌耐藥菌株的出現、免疫抑制劑的應用、吸毒、貧困及人口流動等因素，結核病的疫情驟然惡化。中國有5.5億人感染過結核菌，約占全國人口的45%，高于全球平均水平。全國約有80%的結核病人集中在農村及經濟不發達的中西部地區，全國結核病耐藥率高達28%[1-4]。隨著抗結核藥物的不斷發展和衛生生活狀況的改善，結核的發病率和死亡率也一度大幅下降，而肺結核的及時診斷對治療結核病有著重要的意義，以下我們通過探討結核分枝桿菌檢測方法，來對肺結核的診斷做出說明及認識。

2結核分枝桿菌檢測方法的比較分析

（1）病原學檢測方法

病原學檢測方法主要包括萋尼染色、熒光染色；羅氏培養、分枝桿菌快速培養。

涂片鏡檢的抗酸染色方法是目前為止最快的檢出方法，可用來檢測病情進展，為感染控制提供參考依據，可確證培養物為陽性。熒光染色法是涂片法中陽性率較高，較快速的方法，但是由于假陽性率較高，保存時間短，熒光顯微鏡成本高等缺點，熒光染色法一直沒有得到廣泛的應用。

結核菌培養仍是目前診斷的金標準，是鑒定是否為活菌的可靠方法。羅氏培養法準確度、靈敏度略高于涂片法，可以鑒定死菌與活菌，可進一步進行菌種鑒定和藥敏試驗。但是診斷周期長，有一定的污染率。分枝桿菌快速培養技術是一個鑒定及藥敏系統，操作簡便，陽性標本檢出率比傳統固體培養提高10%左右。

（2）免疫學檢測方法

免疫學檢測方法包括抗原抗體檢測及細胞因子檢測。

結核菌素試驗優點是對活動性結核的診斷靈敏度高達77%。缺點是假陰性產生于小兒結核、老年人結核、免疫缺陷或免疫功能低下患者；假陽性產生于接種過卡介苗的人，其也會產生陽性反應[5]。

γ干擾素釋放試驗被認為是近十年來結核診斷史上取得的最重要成就，該檢測方法目前市售兩種：QFT-G和T-SPOT.TB，比較兩種方法，T-SPOT.TB更靈敏但QFT-G更特異，但均優于結核菌素試驗，同時也被推薦用于潛伏結核診斷。

（3）分子生物學檢測方法

分子生物學檢測方法包括熒光定量PCR、芯片雜交。

近年來核酸擴增技術和雜交分析技術的發展，為分枝桿菌的檢測、鑒定和藥敏實驗提供了極大的方便，可將診斷時間從幾周降低到幾天。研究、應用報道較多的結核病基因診斷技術主要包括PCR、核酸探針雜交、DNA序列測定等。

3小金縣疾控中心結核分枝桿菌檢測方法的現狀及發展

小金縣位于四川省阿壩藏族羌族自治州南部，全縣人口近9萬人，主要由漢族、藏族、回族等民族分布，農村生活習慣非常不好，有時甚至會出現幾十個人供用一個酒杯的情況，這使得結核病的蔓延變得容易，因此衛生宣傳工作一直是衛生系統部門的重點工作[6-7]。另一方面，改革開放以來，小金縣衛生設施逐漸完善，疾控中心利用國債和災后重建資金建成，并按照要求配備了縣級實驗室設備，并建成了潔凈實驗室及P2實驗室，大大地提高了實驗室檢測能力。

對于結核病的診斷，目前疾控中心近年均150多個病人，有10多個呈現陽性，而檢測方法則以抗酸染色法為主，痰涂片抗酸染色試劑由珠海貝索生物技術有限公司提供。抗酸染色法用普通高倍顯微鏡，顯示菌色為紅色。此檢測方法操作方便，易于掌握；片中結核菌分布均勻，染色效果清晰；消化，制片，烤片，染色均在超凈工作室中完成，更好的提高了操作的安全性。但是抗酸染色對分枝桿菌非特異，其他如奴卡、紅球菌屬、軍團菌、隱孢子蟲等孢球蟲等有抗酸菌特點，所有分枝桿菌均可著色，不能區分結核和非結核分枝桿菌；無法區別死菌與活菌，結果均為陽性；且敏感性低，一般1mL痰中有5000-10000條菌時可檢出，而培養可檢出>10-100條菌。我們一般要求新病人早晚各一口痰進行檢測，而通過多年的檢測經驗得出，我們發現病人早上第一口痰檢測率相對較高，這樣我們可以此方法的缺陷中盡量提高我們的診斷能力。雖然目前抗酸染色法、胸部影像、癥狀診斷法已經能滿足縣內需求，而小金縣亦作為一個旅游縣級市，為了更好的服務廣大群眾，對于醫護人員來說，而提高我們自身的技術水平的同時，也要積極學習其他檢測方法，在有條件的情況下發揮作用[8]。

4結束語

結核病臨床表現癥狀為咳嗽、咳痰大于2周，或咯血為肺結核可疑癥狀。早期肺部體征不明顯，當病變為大葉性干酪性肺炎時，局部叩診呈濁音，聽診可聞及管狀呼吸音，有空洞合并感染或合并支氣管擴張時，可聞及干或濕性啰音。胸部影像學檢查不同類型肺結核的典型胸部影像學也有不同表現，而對于小金縣疾控中心來說主要通過以上檢測方法來進行診斷，在結核分枝桿菌檢測中我們還有很多工作要完善，我們也要利用現有設備及科研成果，為廣大群眾提供更專業的服務。

參考文獻

[1]王仙，袁俐.結核病實驗室診斷技術[J].新疆農業科學，2004，41：45-48.

[2]樊學軍，孫敏.結核病實驗室診斷技術的比較研究[J].中國國境衛生檢疫雜志，2005，28：03.

[3]陳雙紅，封巖.結核實驗診斷的研究進展[J].海軍醫學雜志，2002，23：2.

[4]王仙，袁俐.結核病實驗室診斷技術[J].新疆農業科學，2004，41：45-48.

[5]張立群，王云霞.4種不同結核分枝桿菌檢測方法對結核病的診斷價值比較[J].中華醫院感染學雜志，2010，9：266.

[6]尹志濤.我國近10年肺結核發病率分析及結核分枝桿菌快速檢測方法研究[J].第三軍醫大學，2013，10：23.

[7]陳琪，張軒.結核分枝桿菌快速檢測方法研究進展[J].國際檢驗醫學雜志，2013，3：261.

[8]王華鈞，孫小軍.4種結核分枝桿菌檢測方法的比較[J].中華醫院感染學雜志，2012，9：17-20.