外陰陰道假絲酵母菌病致病菌種分布及藥敏分析

邱麗紅 鄭玉蘭

外陰陰道假絲酵母菌病致病菌種分布及藥敏分析

邱麗紅 鄭玉蘭

目的 探討外陰陰道假絲酵母菌病的致病菌種及其在體外對常用抗真菌藥物的敏感性。方法 采用科瑪嘉真菌培養鑒定和ATBFUNCUS藥敏試劑盒對310 例外陰陰道假絲酵母菌病患者臨床標本進行菌種分析和藥敏試驗。結果 310 例外陰陰道假絲酵母菌病的致病菌主要為白假絲酵母菌265例 , 占85.48%, 非白假絲酵母菌45例, 其中熱帶假絲酵母菌32例, 占10.32%, 光滑假絲酵母菌9例, 占2.9% , 克柔假絲酵母菌4例, 占11.30% 。 4 種抗真菌藥物的敏感性為兩性霉素 B(100%)、5- 氟胞嘧啶(99.03%) 、氟康唑(86.45%)、伊曲康唑(79.68%)。結論 外陰陰道假絲酵母菌病的主要致病菌為白假絲酵母菌。不同菌種對常用抗真菌藥物的敏感性存在差異, 應根據藥敏結果選擇合理的抗真菌藥物。

外陰陰道假絲酵母菌病; 致病菌種; 藥敏試驗

外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)是一種常見的由假絲酵母菌感染引起的外陰陰道炎癥。約 75% 的女性一生中罹患過VVC, 約 40% ~ 50% 復發過。假絲酵母菌是一種條件致病菌,約 10%非妊娠婦女及 30%妊娠婦女陰道中有此菌寄生, 但菌量很少, 并不引起癥狀。當機體免疫力下降, 正常防御力減弱或菌群失調時, 可大量繁殖, 引起 VVC［1］。 近年來, 由于種種原因, VVC 復發率有所增加, 嚴重影響婦女的身心健康。因此, VVC 致病菌菌種分析和藥敏試驗為臨床正確、合理地選擇抗真菌藥物提供用藥依據, 對有效治療本病和減少復發有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 310 例病例均來自本院婦科門診 2011 年 7月 ~ 2013 年 12月就診的患者。年齡 15~ 54 歲 , 平均 35 歲。具有外陰瘙癢, 輕度灼痛, 白帶增多 , 陰道豆腐渣樣或凝乳樣分泌物等典型外陰陰道假絲酵母菌病臨床癥狀。取陰道分泌物行真菌鏡檢, 查出孢子、假菌絲者為研究對象, 并行真菌培養及藥物敏感試驗。

1.2 材料 沙保弱培養基購自貝瑞特生物技術(鄭州)責任有限公司；科瑪嘉念珠菌顯色培養基、ATBFUNCUS藥敏試劑盒購自法國生物梅里埃公司, 內含氟康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶、兩性霉素 B。

1.3 方法 一次性拭子自陰道壁取分泌物兩份, 一份用生理鹽水直接涂片鏡檢, 如見到卵圓形孢子、芽孢和菌絲, 則考慮其為致病性假絲酵母菌感染。將同時取材的另一份樣本接種于沙保弱培養基, 真菌培養陽性時, 再轉種科瑪嘉念珠菌顯色培養基, 置 35 ℃培養 18~24 h, 據菌落顯色不同判斷念珠菌的種類, 在顯色培養基上生長為翠綠色菌落為白假絲酵母菌, 藍灰色菌落為熱帶假絲酵母菌, 紫紅色邊緣模糊有微毛為克柔假絲酵母菌, 整個菌落為紫紅色為光滑假絲酵母菌, 白色至粉色為其他假絲酵母菌。同時用 ATBFUNCUS 藥敏板進行藥敏試驗。試劑盒藥敏區上下兩排孔分別為每種藥物的高低濃度孔,根據各孔真菌生長情況判斷真菌對抗真菌藥物的敏感程度。

2 結果

2.1 菌種鑒定 310 例外陰陰道假絲酵母菌病患者的臨床標本中共分離出白假絲酵母菌265株, 占 85.48%, 非白假絲酵母菌45株, 占 14.52% ,其中熱帶假絲酵母菌32株, 占10.32%, 光滑假絲酵母菌9株, 占2.9% , 克柔假絲酵母菌4株,占1.30% 。見表1。

表1 假絲酵母菌菌種構成情況

2.2 藥敏結果 所分離的310 株假絲酵母菌對 4 種抗真菌藥物的敏感性為: 兩性霉素 B 100%敏感、5-氟胞嘧啶99.03%敏感、氟康唑86.45%敏感、伊曲康唑79.68%敏感。見表2。

表2 假絲酵母菌對4種抗真菌藥物的敏感性［例(%)］

3 討論

外陰陰道假絲酵母菌病是一種由假絲酵母菌引起的常見的外陰陰道炎, 假絲酵母菌是人體正常菌群之一, 約有 10%健康無癥狀婦女的陰道分泌物可培養出此菌。假絲酵母菌與陰道內其它正常菌群相互制約相互影響, 同時與陰道局部環境相互作用, 從而達到一種動態平衡。任何因素一旦打破了陰道局部環境的穩態, 都可能導致 VVC的發生［2］。 糖尿病妊娠長期使用抗生素免疫抑制劑和皮質醇藥物是 VVC 好發因素。引起 VVC 的病原體主要是白假絲酵母菌, 少部分由其它酵母菌引起。

據報道［3］,從 VVC 分離的菌株 80%~90%為白假絲酵母菌, 10%~20%為非白假絲酵母菌, 后者主要是光滑假絲酵母菌, 其次是熱帶假絲酵母菌。本次研究結果顯示, 310 例VVC 患者標本培養的病原菌中, 265例為白假絲酵母菌, 占85.48% 。非白假絲酵母菌中主要是熱帶假絲酵母菌, 其次是光滑假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌, 未檢出其它菌種。顯示外陰陰道假絲酵母菌病病原體主要是白假絲酵母菌, 與以往報道一致, 但是非白假絲酵母菌各菌種所占比例與以往的報道有所不同, 這可能與樣本大小及研究對象所處不同地域有關, 不規范治療如短療程治療、非處方藥的廣泛應用可能與致病菌譜變化有一定關系。

目前有報道假絲酵母菌對抗真菌藥物的敏感性有下降的趨勢［4］, 本研究發現310株假絲酵母菌對抗真菌藥物的敏感率仍較高。白假絲酵母菌對氟康唑和伊曲康唑的敏感率在80%以上, 非白假絲酵母菌對氟康唑和伊曲康唑的敏感率明顯低于白假絲酵母菌, 這表明難治性VVC及RVVC可能與非白假絲酵母菌感染有關。唑類藥物在臨床上的廣泛應用和不合理用藥可能是造成其敏感性較低的直接因素。目前臨床上大多采用鏡檢方法診斷, 治療上多采用經驗治療。鑒于VVC 菌種變遷和菌株耐藥性變化, 不同菌種對抗真菌藥物的差異性, 如克柔假絲酵母菌對氟康唑存在天然耐藥, 作者認為在有條件的情況下行真菌培養及藥敏試驗, 根據菌種類型和藥敏結果選擇抗真菌藥物進行治療, 可有效指導合理用藥,提高療效, 減少 RVVC 發生, 減少耐藥菌株的產生。尤其對于RVVC患者, 根據真菌培養及藥敏試驗用藥意義更大, 有利于控制耐藥菌株的產生和提高診治效果, 從而減少患者痛苦, 提高生活質量。

［1］ 謝幸.婦產科學.第 8 版.北京:人民衛生出版社, 2013:249.

［2］ 李奎,劉朝暉.外陰陰道假絲酵母菌病與陰道局部環境.實用婦產科雜志, 2010,26(2):87-89.

［3］ 傅志宜.檢驗醫學高級教程.北京:中國協和醫科大學出版社, 2007:142-144.

［4］ 張文,柏彩英,周強.念珠菌性陰道炎的菌種分布及耐藥性分析.皮膚性病診療學雜志, 2012,19(3):139-141.

Investigation on pathogenic distribution and drug susceptibility of vulvovaginal candidiasis

QIU Li-hong, ZHENG Yu-lan.First Affiliated Hospital of Fujian Medical University Minnan Branch, Quanzhou 362800, China

Objective To study the pathogen and drug sesceptibility of vulvovaginal candidiasis in vitro.Methods Vaginal secretion sample were collected from 310 vulvovaginal candidiasis patients, pathogen identification and drug sensitivity tests were carried out with CHROMagar chromogenic culture media and ATBFUNCUS susceptibility kit.Results Among the 310 cases of VVC, Candida albicans was the main fungi, there were 265 strains of Candida albicans(85.48%), 45 candida non-albicans.And among non-albicans, 32 candida tropicalis (10.32%), 9 candida glabrata (2.9%), 4 candida kruseii (1.30%).The susceptibility of 4 common antifungal drugs were showed as following: amphotericin B 100%, flurocytosine 99.03%, fluconazol 86.45%, itraconazole 79.68%.Conclusion Candida albicans is the most common pathogenic candida species causing vulvovaginal candidiasis.Susceptibility to common antifungal drugs shows difference among variant species.We should choose reasonable antifungal drugs according to the Antifungal susceptibility testing result.

Vulvovaginal candidiasis; Pathogen; Antifungal susceptibility testing

福建醫科大學附屬第一醫院閩南分院醫學科研專項基金(項目編號：MNZX-10-5)

362800 福建醫科大學附屬第一醫院閩南分院