聯合檢測六項白帶生化標志物在陰道炎中的臨床應用

宋志廣

陰道炎是婦女多發病、常見病。隨著生活節奏的不斷加快, 其發病率呈逐年上升趨勢, 而在婦科疾病的診斷過程中白帶常規檢測(簡稱白帶常規)發揮著關鍵作用。白帶常規主要包括滴蟲、線索細胞、念珠菌和白細胞(清潔度)等。現大多數醫院對白帶常規的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢, 兩者均需借助顯微鏡, 具有對檢測者經驗要求高、試驗重復性差、個人主觀性較強、往往由于取樣失敗或者工作量大而導致漏檢等缺點。近年來, 國內外有不少研究報道［1-4］開始利用白帶生化標志物間接地檢驗某種病原微生物, 對陰道炎癥、細菌性陰道病等疾病進行診斷, 替代了人工顯微鏡鏡檢, 使操作標準化、快速化、批量化, 從而提高了工作效率。本次研究采用專用試劑盒對450例患者進行六項白帶生化標志物的檢測, 總結報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月～2014年4月來本院門診就診的500例患者為研究對象, 年齡18～70歲, 平均年齡(29.8±7.8)歲；就診前 3 d所有患者均無性生活、陰道用藥及沖洗。其中50例患者的白帶標本因帶有血液、用藥后有明顯顏色被排除, 剩余450例標本被定為最后的研究對象。所有標本由婦科醫師用無菌專用棉拭子在子宮頸、陰道后穹隆及陰道壁上旋轉提取, 對帶有血液、用藥后有明顯顏色的標本, 改用涂片革蘭染色鏡檢或生理鹽水涂片報告結果。

1.2 試劑、儀器與方法 河南安圖綠科生物工程公司生產提供聯合檢測試劑盒, 儀器采用安圖公司配套自動化woMO聯檢分析儀。操作過程嚴格按說明書進行。

2 結果

450例標本中95例N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶呈弱陽或陽性, 其中14例>4.8, 占14.7%, 經革蘭染色或生理鹽水涂片鏡檢為陰道毛滴蟲感染；81例pH≤4.6, 約占85.3%,為假絲酵母菌感染。135例脯氨酸氨基肽酶或(和)唾液酸苷酶呈陽性, 315例全陰性。280例白細胞酯酶陰性, 170例陽性。290例H2O2呈陰性或弱陽性, 160例呈陽性。240例pH值在4.0～4.5之間, 210例>4.5。

3 討論

目前, 大多數醫院對白帶常規的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢。 但近些年來, 國內外有不少研究報道［1-4］開始利用白帶生化標志物間接地檢驗某種病原微生物, 對陰道炎癥、細菌性陰道病等疾病進行診斷, 并與革蘭染色鏡檢比較, 細菌性陰道病、乳桿菌、陰道毛滴蟲、真菌兩種方法之間具有較好的符合性, 因此, 應用生化標志物聯合檢測具有很好的應用價值。

生化標志物聯合檢測的原理：在試劑板中, 微生物本身產生的生化標志物與預先固定好的、特異性底物反應呈色或通過加顯色液顯色, 從而通過試劑板各孔的呈色情況來判斷微生物的存在情況。

乳桿菌屬在健康婦女陰道中占正常陰道菌群內常駐菌的95%以上［5］, 乳桿菌具有維持陰道內環境pH值的作用, 使其維持在4.0～4.5, 主要通過分解陰道上皮細胞所含糖原發揮作用。乳桿菌還可合成H2O2, 從而調節陰道微生態平衡, 維持陰道正常微環境, 使感染得到有效預防［6］。H2O2在過氧化物酶的作用下, 可與相應底物發生呈色反應。本研究顯示,H2O2呈陽性反應171例, 占38.0%, 提示乳桿菌極少或不存在。呈弱陽性或陰性的為279例, 占62.0%, 提示乳桿菌中等量至大量存在。

在念珠菌感染時, 乳桿菌可呈弱陽或陽性, 可以同時存在。當感染念珠菌時, pH可正常或略>4.5。感染厭氧菌、滴蟲時pH可達5.5左右。更年期女性由于雌激素水平低落或缺乏, 使細胞內糖原含量減少, 阻礙乳酸桿菌的生長, 使PH 值上升, 容易導致病原菌感染。在乳酸菌呈弱陽性或陽性時, 患者應用了各種洗液等造成pH值升高。

細菌性陰道病(BV)好發于育齡婦女, 約占15%～50%［4,5］,本研究顯示, 共135例患者BV呈弱陽或陽性。BV在細菌學上主要表現為陰道正常菌群減少, 被擬桿菌屬、陰道加德納菌、動彎桿菌、消化球菌、普雷沃菌等取代, 在陰道菌群中,擬桿菌和普雷沃菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌。在陰道環境中, 與脯氨酸氨基肽酶相關細菌包括動彎桿菌和加德納菌, 是BV分泌的特異性標志物［6］。作者認為, 綜合檢測脯氨酸氨肽酶和唾液酸苷酶, 可克服兩種方法在靈敏度上的缺陷, 成為檢測BV的理想方法［7］。

念珠菌陰道炎最常見的病原體是熱帶念珠菌和白色念珠菌, 這兩種念珠菌及陰道毛滴蟲均具有氨基葡萄糖苷酶的活性［8］。在堿性條件下, N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶可通過水解特異性的底物與乙酰氨基葡萄糖苷酶發生呈色反應。同時根據感染陰道毛滴蟲時, pH值會顯著增高, 通常在5.0左右, 感染念珠菌時, pH值基本上在正常范圍內, 或略>4.5, 結合N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶和pH值來判斷感染類型。

綜上所述, 作者認為聯合應用白帶的六項生化標志物檢測, 結果客觀、簡單易行, 對于輔助診斷女性陰道微生態環境具有重要的應用價值, 可廣泛應用于臨床。

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