武莉芳
·臨床研究·
溶血現(xiàn)象對(duì)酶類生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響
武莉芳
溶血;酶類生化檢驗(yàn);標(biāo)本
隨著醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展,臨床生化檢驗(yàn)在疾病的診斷、治療、用藥選擇、療效觀察及判斷病情預(yù)后等諸多方面,都起著非常重要的作用。因此,確保生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠,具有重要的臨床意義。血液標(biāo)本的采集過(guò)程是保證標(biāo)本質(zhì)量的重要環(huán)節(jié),也是影響檢驗(yàn)質(zhì)量的重要因素。檢測(cè)血樣出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,是臨床生化檢測(cè)中最為常見(jiàn)的干擾因素。血樣發(fā)生溶血后,其酶濃度的變化非常顯著,對(duì)酶類生化檢測(cè)項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果存在較大的干擾。為了驗(yàn)證此結(jié)論的正確性,我們選擇2012年12月至2013年12月需進(jìn)行酶類生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的患者60例,同時(shí)對(duì)溶血與非溶血標(biāo)本分別檢測(cè),并進(jìn)行對(duì)照,報(bào)告如下。
1.1 一般資料 選擇臨床需要檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)等生化項(xiàng)目的患者60例,男42例,女18例;年齡25~65歲,平均年齡(47±9)歲。
1.2 方法 抽取血樣時(shí),所有患者均采取坐位。每位患者均同時(shí)準(zhǔn)備兩支取樣管,取雙份血樣,每份血樣2.5 ml,其中1份為觀察樣,另1份為對(duì)照樣。觀察樣標(biāo)本采用室溫自然分離30 min后,置于離心機(jī)中以1 200 r/min的速度離心10 min,使血清分離,取1 ml血清作為檢測(cè)樣品,貼好標(biāo)簽備測(cè);對(duì)照樣本標(biāo)本采用人工方法使血樣發(fā)生溶血現(xiàn)象,以相同條件離心分離血清,取1 ml血清作為檢測(cè)樣品,貼好標(biāo)簽備測(cè)。
所有檢測(cè)血樣均按照生化分析儀的操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè),分別測(cè)定2組ALT、LDH、AST、ALP等數(shù)值。

對(duì)照組血樣檢測(cè)結(jié)果與觀察組血樣比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。
表1 2組血樣檢測(cè)結(jié)果比較

組別ALTLDHASTALP觀察組45±4*98±7*51±5*130±10*對(duì)照組56±6 197±8 65±4 90±9
注:與對(duì)照組比較,*P<0.05
溶血是指紅細(xì)胞破裂,血紅蛋白逸出紅細(xì)胞的現(xiàn)象。引起血液標(biāo)本性狀發(fā)生改變的最常見(jiàn)原因是溶血,溶血現(xiàn)象可由多種原因造成,根據(jù)原因不同溶血現(xiàn)象可分為體內(nèi)溶血和體外溶血。體內(nèi)溶血是由貧血、藥物反應(yīng)、嚴(yán)重感染、輸血反應(yīng)及其他可引起體內(nèi)溶血的疾病所致。體內(nèi)溶血標(biāo)本屬合格標(biāo)本,應(yīng)在報(bào)告單上注明。體外溶血標(biāo)本是臨床檢驗(yàn)工作中經(jīng)常遇到的,體外溶血因素包括化學(xué)因素、物理因素和代謝因素。血液在體外,常因機(jī)械性震蕩、低滲、驟冷、過(guò)度酸堿,以及與乙醇、皂堿、乙醚、膽堿鹽等接觸而引起溶血。其中,血液在采集過(guò)程中的影響因素尤為常見(jiàn),如在采血過(guò)程中,靜脈穿刺消毒未干,立即采血;采血者抽血時(shí)將止血帶扎的過(guò)緊,時(shí)間太長(zhǎng),血液注入試管速度過(guò)快;血管不充盈,暴露不明顯,摸不著血管走向并反復(fù)拍打穿刺部位;在采血過(guò)程中,用手劇烈搖蕩采集血液;抽血時(shí)產(chǎn)生的泡沫一同注入試管;采血時(shí)進(jìn)針部位不準(zhǔn)確,針尖滑出血管外;采血時(shí)間太長(zhǎng)或不順利,血液很快凝固引起溶血。判定標(biāo)本有無(wú)溶血?jiǎng)t決定于血液標(biāo)本中所測(cè)定出的血紅蛋白濃度,如血漿超過(guò)20 mg/ml或血清超過(guò)50 mg/ml即認(rèn)為是標(biāo)本溶血,上述指標(biāo)系指標(biāo)本溶血的嚴(yán)格定義,但一般的溶血是指血漿或血清中檢出血紅蛋白的濃度超過(guò)300 mg/ml[1]。標(biāo)本溶血后對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響較大:(1)由于許多成分在細(xì)胞內(nèi)外相差很多倍,細(xì)胞內(nèi)含量高的物質(zhì)進(jìn)入血清后造成測(cè)定結(jié)果偏高,如紅細(xì)胞內(nèi)鉀離子(K+)是血清中的20倍[2]。ALT、LDH、AST、ALP等物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)液的含量是在細(xì)胞外液含量的22~160倍,其在細(xì)胞內(nèi)外巨大的濃度差,使得輕微的溶血現(xiàn)象即可導(dǎo)致此類物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果發(fā)生顯著變化。(2)血紅蛋白是有顏色的物質(zhì),可對(duì)光度分析進(jìn)行干擾,血紅蛋白可引起光譜短波長(zhǎng)段(300~500 nm)的吸光度明顯增高,使樣品中分析物測(cè)定濃度假性升高[3]。同時(shí)溶血后紅細(xì)胞中的物質(zhì)進(jìn)入到血清中,會(huì)導(dǎo)致血清體積增加,造成血清中原有物質(zhì)的濃度降低。尤其酶類檢測(cè)物質(zhì),血樣發(fā)生溶血后,其酶濃度變化非常顯著。很多學(xué)者已達(dá)成共識(shí),認(rèn)為酶對(duì)血清樣本的要求比其它任何一項(xiàng)生化檢驗(yàn)指標(biāo)要求都高,在臨床生化檢測(cè)過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)血樣出現(xiàn)溶血,則該血樣不得用于酶類檢測(cè)項(xiàng)目的測(cè)定[4]。本研究結(jié)果也表明,血樣發(fā)生溶血后,其酶濃度的變化是非常顯著的。這種變化對(duì)疾病的診斷和治療均會(huì)造成一定的影響。
為最大限度減少標(biāo)本溶血現(xiàn)象的發(fā)生,采血過(guò)程中應(yīng)做到以下幾點(diǎn):(1)抽血時(shí)止血帶不應(yīng)扎得太緊,抽血速度不能太快,不能劇烈搖蕩試管;(2)要保持注射器、試管、針頭的清潔,針頭不得使用酒精消毒,因酒精可導(dǎo)致溶血;同時(shí)應(yīng)防止消毒液或其他物質(zhì)進(jìn)入標(biāo)本,以免造成溶血現(xiàn)象[5],對(duì)于肥胖或血管不清的采血困難者,應(yīng)找有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)務(wù)人員,避免反復(fù)多次穿刺同一部位。同時(shí)要強(qiáng)化檢驗(yàn)科工作人員的思想和技術(shù)素質(zhì),做好檢驗(yàn)質(zhì)量控制,以高度負(fù)責(zé)的精神對(duì)待每一份標(biāo)本,做到立即送檢。許多學(xué)者認(rèn)為,溶血原因大部分是由于采血不順利,運(yùn)送標(biāo)本時(shí)劇烈震蕩或由于分離血清時(shí)離心速度過(guò)快所致[6]。溶血是臨床化學(xué)檢驗(yàn)面臨的難以避免的問(wèn)題,其對(duì)臨床生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響已成定論。生化檢驗(yàn)結(jié)果是否能真實(shí)地反映患者血清中的實(shí)際情況對(duì)臨床的正確診斷至關(guān)重要,因此,在標(biāo)本采集、運(yùn)送、分離和檢測(cè)過(guò)程中,都應(yīng)盡量避免人為的因素而造成的溶血,如發(fā)現(xiàn)采集標(biāo)本已經(jīng)溶血,應(yīng)當(dāng)重新采集,如不能重新采集,應(yīng)當(dāng)在化驗(yàn)結(jié)果上注明,以便于臨床醫(yī)師對(duì)疾病的診治,更好的救治每一位患者。
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10.3969/j.issn.1002-7386.2014.17.044
075100 河北省張家口市,河北北方學(xué)院附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科
R 446.1
A
1002-7386(2014)17-2660-02
2014-01-11)