在確定血液制品有效期中加速試驗的重要應用

徐毅

山西康寶生物制品股份有限公司 山西 長治 046011

在確定血液制品有效期中加速試驗的重要應用

徐毅

山西康寶生物制品股份有限公司 山西 長治 046011

目的：探討加速試驗在確定血液制品有效期中的應用。方法于2013年03月至2014年03月在我公司選取的血液制品進行研究，按照隨機分組方式將其分為三組，即一組、二組和三組，將不同組樣品分別置于不同溫度下保溫，在規定的時間內取出樣品作相關物質及含量等相關項目的檢測，通過對試驗數據進行分析，從而計算出樣品的有效期。結果不同組別樣品的計算結果基本相同。結論在確定血液制品有效期時，可以通過采用加速實驗法來做初步統計計算，值得在臨床上推廣應用。

加速試驗法；血液制品；有效期計算

加速試驗法在臨床確定血液制品有效期的使用已經變得非常廣泛，但是在應用過程中，試驗方法都比較復雜，而且試驗跨度和周期都比較長，計算方法復雜[1]。下面本文通過2013年03月至2014年03月在我公司選取的人血白蛋白進行研究，按照隨機分組方式將其分為三組，即第一組、第二組和第三組，將不同組樣品置于不同溫度下保溫，分次取出樣品作相關質量指標的檢測，通過對試驗數據進行分析，從而計算出樣品的有效期，現總結如下。

1.儀器和試藥

恒溫裝置：生化培養箱，溫度需要精確到±1攝氏度；澄明度檢測儀器：型號為YB-Ⅱ型澄明度檢測儀，廠商為天津天光光學儀器有限公司、高效液相色譜儀：型號為安捷倫1260 Infinity；色譜柱為GSK-GEL G3000SW；人血白蛋白制品[2]，是本次試驗研究用血液制品，按照隨機分組方式分為一組、二組和三組。

2.方法與結果

2.1 實驗方法

將三組樣品分別放置在不同溫度下進行保溫，溫度分別控制在5攝氏度、23攝氏度、37攝氏度和50攝氏度，每天對供試品觀察兩次，做到對血液制品以及溫度控制范圍的檢測。每隔48h取樣檢測，和在醫院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品進行對比研究，分別提取三組樣品，其中一組樣品放置了22天，二組樣品放置了60天，三組樣品放置了20天，使用高效液相色譜檢測保溫后不同時間取樣的多聚體含量，從而有效地計算出樣品中白蛋白單體和二聚體的含量，利用公式推測出樣品在10攝氏度和30攝氏度條件下避光保存的有效期限。

2.2 實驗數據和計算結果分析[2]

通過對各組樣品在不同溫度下的檢測統計結果分析，我們發現，從實驗樣品的外觀上看，除了在50攝氏度條件下保存的樣品外觀顏色加深以外，其他溫度條件下的樣品和醫院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品對比沒有顯著變化，都是黃色澄明的液體，沒有異物、渾濁和沉淀出現。如下表所示：

表一 各組樣品在不同溫度下的檢測統計結果分析

2.3 有效期計算

計算出樣品在不同溫度下保溫時的1/T值，lgK值，從而進一步進行線性回歸計算，通過公式Arrhenius進行計算以后，可以發現不同批次樣品的計算結果基本相同。

2.4 樣品全檢結果[3]

在試驗前后對樣品進行全檢，根據各項藥典標準進行判定，如蛋白質含量應超過標示量的95%、純度應超過蛋白質總量的96%、吸收度不超過0.15、多聚體含量不得超過5%、辛酸鈉含量在0.14-0.18之間等。結果發現，各組樣品由于保溫時間不同，取樣時間不同，其各項檢驗結果也存在一定的差異。

對各組樣品的全檢結果進行分析探討，其中在實驗之前，一組、二組、三組的蛋白質含量超過標示量95%的分別為201.9、201.2、198.7；純度為蛋白質總量的96%的分別為99.5%、99.5%、99.6%；吸收度不超過0.15分別為0.03、0.03、0.04；多聚體含量不超過5%分別為2.35%、2.14%、2.23%；辛酸鈉含量在0.14-0.18之間的分別為0.169、0.170、0.174。在實驗之后，一組、二組、三組的蛋白質含量超過標示量95%的分別為201.4、201.8、198.9；純度超過蛋白質總量的96%的分別為99.2%、99.2%、99.5%；吸收度不超過0.15分別為0.10、0.08、0.09；多聚體含量不超過5%分別為2.78%、2.97%、2.77%；辛酸鈉含量在0.14-0.18之間的分別為0.164、0.167、0.169．試驗指標全部合格。

3.討論

加速試驗法在臨床確定血液制品有效期的使用已經變得非常廣泛，但是在應用過程中，操作過程都比較復雜，而且時間跨度和周期都比較長，計算方法復雜。本文通過2013年03月至2014年03月在我公司選取的血液制品進行研究，通過不同溫度對樣品進行保溫試驗處理，并且進一步對樣品各檢驗數據進行分析，發現供試品質量在保溫前后都符合我國2010版的《中國藥典(三部)》4的相關檢測標準。樣品在不同溫度的保溫前后，基本上都是顏色有些加深，多聚體的含量有所增加，吸收度有所增長。除了在50攝氏度條件下保存的樣品外觀顏色明顯加深以外，其他溫度條件下的樣品和醫院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品對比沒有顯著變化，都是黃色澄明的液體，沒有異物、渾濁和沉淀出現。這說明各組樣品由于保溫時間不同，各檢測指標結果也存在一定的差異。因此在臨床確定血液制品的有效期限時，需要采用加速試驗法和統計學方法來加以計算和統計分析，從而能夠更加準確的判斷血液制品的有效期限，為生物制品臨床學發展起到一定的推動作用。

[1]張林，劉睿斌，李秀梅.加速試驗在確定血液制品有效期中的應用[J].中國藥業，2009,18(04)：41-42.

[2]朱征宇，汪恩浩，王媛.應用統計分析和化學動力學參數評價生物制品的穩定性[J].中國生物制品學雜志，2008,21(02):126-130.

[3]李引乾，楊亞軍，吳秋霞，黃勇旗，劉江明.長效沙星注射液的化學穩定性試驗[J].西北農林科技大學學報(自然科學版)，2007,35(11)：37-40.

[4]國家藥典委員會.中國藥典2010年版第三部.中國醫藥出版社，2010,1，：212-213.

R446.1

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1009-6019(2014)08-0240-01