HBV－M在慢性乙型肝炎、肝硬變及肝癌中的表達及意義

單 靜，唐寬銀，田方圓，曹武奎

(1.天津醫科大學研究生院，天津 300070;2.天津市第二人民醫院，天津市肝病醫學研究所，天津 300192)

全球約3.5億至4億人有慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染［1］。我國慢性乙型肝炎高發，乙型肝炎病毒感染者約有9 300萬。慢性HBV感染可導致肝硬變、肝癌及肝功能衰竭等嚴重并發癥，現已成為導致疾病死亡的一個重要因素。在乙型肝炎病毒感染患者的抗病毒治療過程中，大部分患者HBsAg和(或)HBeAg是很難轉陰的。臨床上以HBsAg、HBeAg和HBV DNA的轉陰作為評價抗病毒療效的指標，我們通過測定這三者在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬變、肝癌患者中的水平，分析探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 診斷(排除)標準 ①慢性乙型肝炎及乙型肝炎肝硬變的診斷符合《慢性乙型肝炎防治指南》的診斷標準［2］，肝癌的診斷符合2001年中國抗癌協會肝癌專業委員會修訂的《肝癌臨床診斷標準》［3］;②各組患者均有乙型肝炎病毒感染史(乙肝表面抗原陽性大于6個月);③所有患者均無抗病毒治療史。

1.2 研究對象 收集2012年1月至2013年4月天津市第二人民醫院住院的患者資料，其中符合標準的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)組患者149例，乙型肝炎肝硬變(liver chrrhosis，LC)組患者115例，HBsAg為陽性的原發性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)組患者146例。

1.3 方法 所有實驗室指標均為確定診斷疾病時的檢測值，采用熒光PCR法檢測血清HBV DNA水平，檢測靈敏度為≤500拷貝/mL;采用Abbott化學發光微粒子免疫分析技術檢測 HBsAg和 HBeAg的滴度，將HBsAg＞0.05 U/mL 和 HBeAg≥1.00 S/CO 判為陽性，前者為定量檢測，后者為半定量檢測。

1.4 統計學方法 所得數據采用SPSS19.0軟件進行統計學處理，符合正態分布的數據采用均數±標準差表示，多組比較采用單因素方差分析的F檢驗，2組間比較采用t檢驗進行分析;不符合正態分布的數據以中位數和4分位數間距［M(QR)］表示，多組比較采用Krushal－Wallis H檢驗，2組間比較采用 Mann－Whitney U檢驗;計數資料采用卡方檢驗。

2 結 果

2.1 一般情況:慢性乙型肝炎(CHB)組患者149例，其中:男110例，女39例;年齡44.57±11.94歲。乙型肝炎肝硬變(LC)組患者115例，其中:男97例，女18例;年齡53.37±9.91歲。HBsAg為陽性的原發性肝癌(HCC)組患者146例，其中:男122例，女24例;年齡56.37±9.97歲。3組患者在年齡和性別上比較，差異均有顯著性差異(P＜0.05)。

2.2 3組患者HBeAg滴度陽性情況 結果詳見表1。

表1 3組患者HBeAg滴度陽性情況

3 組比較有顯著性差異(F=9.944，P=0.007)。進一步兩兩比較，CHB組與LC組、HCC組比較均有顯著性差異(χ2=4.147，P=0.042;χ2=9.499，P=0.002)，但LC組與HCC組比較無顯著性差異(χ2=0.747，P=0.387)。

2.3 3組患者HBsAg滴度情況 結果詳見表2。

表2 3組患者HBsAg滴度情況

在不同HBeAg狀態下，HBsAg定量值在CHB組與LC組患者中比較均有顯著性差異(t=2.549，P=0.012;t=2.428，P=0.017);但在 HCC 組中無顯著性差異(t=1.375，P=0.171)。

2.4 3組患者HBV DNA水平情況 結果詳見表3。

表3 3組患者HBV DNA水平情況

HBV DNA 定量值在3 組患者中比較，差異均有顯著性差異(Z 分別為3.148、6.544、4.520，P ＜0.05)。

3 討 論

HBV感染后受許多因素的影響，臨床預后極為復雜，其中有15% ～40%的患者會有發生肝硬變、肝衰竭及肝癌的危險［4］。絕大多數肝癌的發生與發展有慢性肝炎－肝硬變－肝癌的進程。除血清HBV DNA載量是HBV復制的重要指標之外，血清HBsAg、HBeAg與病毒復制也密切相關［5－7］。我們可以通過測定HBsAg、HBeAg與HBV DNA在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬變、肝癌患者中的水平，將三者結合起來為臨床提供準確可靠的診斷依據和治療數據，以預測疾病的進展。

本資料中男性比例高，可能與女性雌激素雌二醇抑制線粒體膜脂質過氧化，并清除氧自由基誘導凋亡等作用有關［8］。本研究發現在CHB階段患者主要以HBeAg陽性的形式存在，而在LC和HCC階段主要以HBeAg陰性的形式存在，可認為 HBeAg陰性慢性HBV感染經歷了更長的免疫清除過程，或HBeAg是免疫耐受的調節因子，它的缺失可導致免疫耐受破壞，誘導炎癥活動，HBeAg又是細胞毒性T細胞的靶抗原，在肝細胞膜上的缺失，會使變異株逃避宿主免疫清除，而使感染持續存在，病變趨于進展，最終發展成肝硬變、原發性肝癌等終末期肝病。可見在一定范圍內，隨著HBeAg的陰轉疾病病情并不呈現好轉，而是病變趨向于進展。因此，在臨床工作中應高度重視HBeAg陰性的HBV感染者，積極采用更為合理的治療方案，以免延誤病情。

HBV cccDNA作為HBV在HBV基因組的復制中間體、前基因組RNA和mRNA的模板，在HBV持續感染、治療停止后病情復發及耐藥等方面起著關鍵性的作用，臨床上很難普及檢測cccDNA。陳嵬等［9］研究提示血清HBsAg定量可作為反映肝組織中HBV cccDNA水平的指標。本文結果顯示在不同的HBeAg狀態下，這3組患者中HBsAg水平均呈逐漸下降趨勢，而慢性乙肝和肝硬變組中差異有顯著性差異，隨著慢性HBV的感染與疾病病程的進展，病毒復制活性降低，可能是因為機體感染HBV后，機體的免疫應答造成肝細胞損傷，免疫損傷越嚴重，肝細胞損害的程度及數量就越多，從而導致依賴于肝細胞的HBsAg的產生減少，而在肝癌組中沒有顯著性差異，可能與樣本例數較少有關，目前機理尚不明確，需臨床更多的資料加以驗證分析。此外，有研究表明HBsAg定量檢測可以精確區分HBeAg陰性的慢性肝炎患者是處于活動期還是非活動期［10－11］，這也表明 HBsAg在疾病預測方面起著重要作用。HBV DNA定量水平在這3組患者中也呈逐漸下降趨勢，并且在HBeAg陰性患者中HBV DNA水平較HBeAg陽性患者明顯降低，可見隨著疾病的進展，肝細胞損害越嚴重，HBV DNA雖然呈低復制狀態，并不能證明疾病病情的緩解。由此可見，定量檢測HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平，可預測肝病進展情況，在某種程度上，三者水平越低，肝臟病變越嚴重，尤其應重視對HBeAg陰性患者的治療。

綜上所述，在臨床上應同時檢測 HBsAg、HBeAg和HBV DNA的水平，將三者結合起來，這樣才能夠較全面地反映乙肝病毒在患者體內的真實情況，獲得更加精確的疾病診療方案，為肝炎患者疾病的進展及預后判斷提供更加客觀可靠的實驗數據。

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