GC-MS法快速測定別克參中有機氯農藥殘留量研究

陳春麗+李雪+謝湘云+李宏宇+熱娜•卡斯木

摘要:采用乙腈超聲提取,GC-MS法測定別克參(Erythronium sibiricum)中10種有機氯農藥殘留量?結果表明,各農藥標準工作曲線線性關系良好,分析結果的相對標準偏差為1.79%~4.30%,加樣回收率為75.7%~123.3%?所測10種有機氯農藥在3批別克參藥材中的含量均在檢測限以下?該方法前處理方法簡單?靈敏度高?穩定性好,能夠滿足別克參藥材中有機氯農藥殘留快速檢測的要求?

關鍵詞:別克參(Erythronium sibiricum);有機氯農藥殘留;GC-MS

中圖分類號:O657.63文獻標識碼:A文章編號:0439-8114(2014)11-2647-03

Rapid Determination of Organochlorine Pesticide Residues in Erythronium sibiricum

by GC-MS

CHEN Chun-li1,LI-Xue2,XIE Xiang-yun1,LI Hong-yu2,Renakasimu1

(1.Pharmacy College of Xinjiang Medical University,Urumqi 830011,China;

2.Xinjiang Agricultural Product Quality Safety Supervision and Inspection Center, Urumqi 830049, China)

Abstract:To establish a method for rapid determination of organochlorine pesticide residues in Erythronium sibiricum, the samples were ultrasonically extracted with acetonitrile and determined by GC-MS. Satisfactory linearities for 10 pesticides were obtained with the precision of measurement ranging from 1.79% to 4.30%. The recoveries of detection were ranged from 75.7% to 123.3%. Erythronium sibiricum samples did not contain any organochlorine pesticide residues. The established method was simple, stable and sensitive, which could satisfy the need for rapidly determing of organochlorine pesticide residues.

Key words:Erythronium sibiricum;organochlorine pesticide residues;GC-MS

基金項目:新疆維吾爾自治區科技重大專項(201130105-2)

以六六六(BHC)?滴滴涕(DDT)為代表的有機氯農藥因其高效,廣譜的殺蟲特點,曾廣泛應用于農業生產,雖已被世界各國禁用,但由于其具有半衰期長?不易降解的特點,目前在土壤?農產品?中藥材中仍能檢出BHC?DDT?中藥材是我國醫藥發展的物質基礎,農藥殘留是制約中草藥質量的因素之一,為了保障中藥材用藥安全,《藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》對有機氯農藥的殘留限量有明確規定,相關的檢測方法研究報道較多[1-4],但對別克參中有機氯農藥殘留研究尚未見報道?

別克參(Erythronium sibiricum)為百合科豬牙花屬植物新疆豬牙花的干燥肉質鱗莖[5,6],產自新疆北部(天山至阿爾泰?福海),生于陰坡?葉緣草叢?林下?灌叢下和亞高山草地上,海拔1 100~2 500 m?藥用部位為鱗莖,性干?微苦,具有滋補?強身?壯體等功效,主治體虛多病,腰膝酸軟?無力,是新疆哈薩克民族歷史悠久的藥食兩用植物之一?國內外針對別克參的研究處于起步階段[7-10]?本研究采用GC-MS法分析了別克參中10種有機氯農藥殘留的含量?

1材料與方法

1.1儀器

QP2010型氣相色譜-質譜聯用儀(日本島津公司),配Rtx-5MS毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);BS-110S型分析天平(北京賽多利斯天平有限公司);KQ-500DE型超聲波提取儀(昆山市超聲儀器有限公司);TDL-5型離心機(上海隆拓儀器設備有限公司)?

1.2藥材

別克參藥材3批(2011-2013年藥材各1批),均產于新疆阿勒泰,經新疆醫科大學藥學院熱娜?卡斯木教授鑒定為百合科豬牙花屬植物新疆豬牙花的鱗莖?

1.3試劑與標準品

農藥標準品:六六六(α-BHC??茁-BHC?γ-BHC?δ-BHC);DDT(p,p′-DDE?o,p′-DDE?p,p′-DDD?o,p′-DDD?p,p′-DDT);五氯硝基苯(Quitozene),購自農業部環境質量監督檢驗測試中心,濃度均為1 000 mg/L?

乙腈?無水硫酸鈉?氯化鈉均購自國藥集團(分析純);吸附劑C18(50 μm,60 ?魡),PSA(40-60 μm)購自天津博納艾杰爾科技有限公司,環己烷?丙酮購自韓國DUKSAN公司(色譜純)?

2結果與分析

2.1混合標準儲備液的配置

精密量取10種有機氯農藥殘留標準溶液各1 mL,置于25 mL容量瓶中,加入環己烷∶丙酮(7∶3,V/V)混合溶液稀釋,定容至刻度,即得濃度為40 μg/mL的混合標準儲備液?

2.2樣品前處理方法

精確稱取別克參藥材粉末2 g,加10 mL乙腈,超聲提取30 min,加入約1.0 g NaCl和0.5 g無水MgSO4,振搖后4 000 r/min離心,離心后取上清液2 mL,加入MgSO4?C18?PSA各0.5 g,振蕩2 min,離心后取上清液,過0.2 μm濾膜,待測?

2.3GC-MS工作條件

離子源EI 200 ℃;檢測器電壓1 kV;接口溫度300 ℃;載氣為He;柱流量1.5 mL/min;進樣口溫度120 ℃保持4.5 min,以80 ℃/min升溫至250 ℃保留27.87 min;柱溫為82 ℃保持5 min,以8 ℃/min升溫至300 ℃保持8 min;進樣量為1 μL?

2.4標準工作曲線與檢出限

精密吸取一定量的混合標準儲備液,加入環己烷∶丙酮(7∶3,V/V)混合溶液逐級稀釋,配制成濃度為0.00?0.01?0.05?0.10?0.50?1.00 μg/mL的一系列梯度溶液,按“2.3”條件進樣,測定峰面積,繪制標準工作曲線,結果如表1所示,典型色譜圖如圖1所示?

2.5精密度試驗

精密吸取同一濃度的混合標準品溶液,連續進樣6次,以峰面積為指標計算RSD值,結果見表2? 2.6重復性試驗

精確稱取同一批別克參藥材粉末6份,按照“2.2”樣品前處理方法進行,考察方法的重復性?結果表明,6次測試結果完全一致,重復性良好?

2.7加標回收率試驗

精密稱取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標準混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進行提取,測定,計算各農藥的回收率?

2.8含量測定

精密稱取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測定10種農藥殘留量?結果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機氯農藥殘留?

3小結與討論

目前中草藥中有機氯農藥殘留檢測中普遍存在的問題是前處理步驟繁瑣,本試驗采用乙腈超聲提取,GC-MS法測定別克參中10種有機氯農藥殘留,前處理簡單,測試時間短,滿足別克參藥材中有機氯農藥殘留快速測定的要求?

3批藥材測試結果表明,別克參中未檢出待測農藥殘留,這可能與該藥材的生長環境有關,別克參主要生長于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

參考文獻:

[1] 徐曉琴,胡廣林,王小如,等.氣相色譜法在中草藥及其制劑中痕量有機氯類農藥殘留分析上的應用進展[J].分析測試學報, 2004,23(7):112-117.

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[3] 張瀟瀟,陳曉輝,董婷霞,等.固相萃取-毛細管氣相色譜法測定黨參?龍膽中15種有機氯農藥的殘留量[J].沈陽藥科大學學報,2006,23(13):776-780.

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[10] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西.不同光照條件對新疆豬牙花花粉生活力及柱頭可授性的影響[J].南方農業學報,2013, 40(36):17543-17546.

2.7加標回收率試驗

精密稱取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標準混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進行提取,測定,計算各農藥的回收率?

2.8含量測定

精密稱取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測定10種農藥殘留量?結果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機氯農藥殘留?

3小結與討論

目前中草藥中有機氯農藥殘留檢測中普遍存在的問題是前處理步驟繁瑣,本試驗采用乙腈超聲提取,GC-MS法測定別克參中10種有機氯農藥殘留,前處理簡單,測試時間短,滿足別克參藥材中有機氯農藥殘留快速測定的要求?

3批藥材測試結果表明,別克參中未檢出待測農藥殘留,這可能與該藥材的生長環境有關,別克參主要生長于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

參考文獻:

[1] 徐曉琴,胡廣林,王小如,等.氣相色譜法在中草藥及其制劑中痕量有機氯類農藥殘留分析上的應用進展[J].分析測試學報, 2004,23(7):112-117.

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2.7加標回收率試驗

精密稱取同一批別克參藥材粉末9份(表2),加入高?中?低3種濃度的標準混合溶液,每水平各3份,按照“2.2”樣品前處理方法進行提取,測定,計算各農藥的回收率?

2.8含量測定

精密稱取別克參2011-2013年份3批藥材粉末,按照“2.2”樣品前處理方法制備供試品溶液,按“2.3”條件測定10種農藥殘留量?結果表明,3批別克參藥材中均未檢出有機氯農藥殘留?

3小結與討論

目前中草藥中有機氯農藥殘留檢測中普遍存在的問題是前處理步驟繁瑣,本試驗采用乙腈超聲提取,GC-MS法測定別克參中10種有機氯農藥殘留,前處理簡單,測試時間短,滿足別克參藥材中有機氯農藥殘留快速測定的要求?

3批藥材測試結果表明,別克參中未檢出待測農藥殘留,這可能與該藥材的生長環境有關,別克參主要生長于海拔1 100~2 500 m的阿勒泰山,人工栽培的較少,多為純天然的野生植物?

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[4] 封棣,閻正,趙亞奎,等.固相萃取-毛細管氣相色譜法測定中草藥及其土壤中多種有機氯農藥殘留量[J].分析實驗室, 2005,24(10):8-12.

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[8] 馬智,馬淼,趙紅艷.類短命植物新疆豬牙花解剖結構及其生態適應性的研究[J].廣西植物,2012,32(3):304-309.

[9] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西,張永帥,等.新疆豬牙花種子生物學特征研究[J].安徽農業科學,2012,44(9):1444-1447.

[10] 古麗江?賈曼拜,古麗西拉?沙菩西.不同光照條件對新疆豬牙花花粉生活力及柱頭可授性的影響[J].南方農業學報,2013, 40(36):17543-17546.