藥物治療老齡骨質疏松大鼠骨顯微結構與骨組織形態學指標的變化

李 鵬 羅 民 馬洪順

(吉林大學南嶺校區工程力學系，吉林 長春 130022)

骨質疏松及骨質疏松性骨折是最常見的老年性疾病，尤其是絕經后的婦女，隨著絕經后時間增加，骨質疏松率大幅度上升，表明卵巢分泌的雌激素對骨質疏松的發生和發展有影響，骨質疏松是被世界衛生組織WHO列為危害中、老年人健康的三大疾病之一〔1〕。其中髖骨骨折是最嚴重的一種，美國每年約有1.6×106人會發生髖骨骨折〔2〕。關于骨質疏松人和動物骨組織的形態計量學研究較多〔3～10〕，但多為研究動物模型的組織形態計量學。關于幾種藥物治療骨質疏動物模型骨的骨顯微結構與骨組織形態計量學測量分析報道極少。鑒于預防、診斷、治療骨質疏松的需要，本文以去卵巢法復制骨質疏松動物模型，分別以中藥、西藥、鈣劑、維生素K(VK)治療骨質疏松動物模型大鼠，對各組大鼠飼養15 w后處死，取各組大鼠脛骨進行骨顯微結構分析和骨形態計量學測量。

1 材料與方法

1.1材料 實驗動物選用體重為290～330 g，10月齡Wistar大鼠，均為雌性，由中國醫科大學實驗動物部提供。飼料購自沈陽市實驗動物飼料廠，產品標準代號：DB-21741-93。阿侖膦酸鈉為美國默沙東公司出品，鈣劑逸得樂為法國伊諾岱國際醫藥公司出品，VK為天津藥業集團出品。掃描電子顯微鏡，德國蔡司公司；BI-2000醫學圖像分析儀，成都泰盟公司；Poegcuts型切片機，德國OPTON公司；YD-51電鼓風干燥箱，上海實驗儀器四廠。

1.2方法 將60只大鼠隨機分成6組，分別設為正常對照組 10只，模型組10只，中藥組10只，阿侖磷酸鈉組(西藥組)10只，VK組10只，鈣劑組10只，組間體重無統計學差異(P<0.05)所有動物自由攝食、飲水。對實驗組動物(模型組和治療組)摘除雙側卵巢。中藥組動物每日給服中藥0.9 g/kg、西藥組動物每日給服阿侖磷酸鈉1 mg/kg、對VK治療組動物每日給服雌激素0.1 mg/kg、對鈣劑治療組動物每日給服2 mg/kg。對各組大鼠飼養 15 w后在腹主動脈采血進行生化檢測，之后以腹主動脈放血法處死大鼠。取大鼠左、右側股骨、脛骨用以生理鹽水浸濕的紗布包裹試樣，貯于-20℃冰箱內保存備用檢測骨組織形態學計量指標。

1.3統計學方法 組間比較行t檢驗。

2 結 果

2.1各組脛骨骨纖維結構掃描電鏡照片 正常對照組脛骨骨小梁排列整齊、細密，中藥組、西藥組脛骨骨小梁排列也較整齊、細密。模型組脛骨骨小梁排列稀疏。鈣劑組骨小梁排列也有一定的紊亂。見圖1。

2.2各組骨組織形態學計量指標 骨小梁周長、骨小梁面積、骨小梁相對體積、骨小梁平均厚度、骨小梁平均間距小于正常對照組、中藥組、西藥組、VK組(P<0.05)，模型組與鈣劑組各項指標差異不顯著(P>0.05)。見表1。

圖1 各組脛骨骨纖維結構掃描電鏡照片

表1 各組大鼠脛骨形態計量學結果

3 討 論

骨形態計量學是指從微觀結構觀察骨的形態變化(包括骨小梁的變化、骨皮質的變化、骨細胞的變化等)。它們從不同的側面反映骨的生理特性和病理特點，是測量骨量的重要手段之一。美國FDA把用骨組織形態計量學的方法觀察藥物對去卵巢大鼠骨形態計量學的改變作為評價新藥的藥學標準之一〔6〕。骨的形態計量學特性是從更細微的角度來觀察骨組織，此種方法具有直接性客觀性等特點。它可以直觀地反映骨小梁的變化，骨細胞的狀態，骨皮質的薄厚。骨組織形態定量檢查，即骨形態計量能夠準確的測量骨礦化的動態指標，并能客觀的記錄經過治療以后骨組織的變化，所以骨形態計量學越來越廣泛應用于骨質疏松及其他代謝性骨疾病的臨床和科研領域〔2〕。

原發性骨質疏松是以骨量減少，骨的微觀結構退化為特征的，致使骨的脆性增加以及易于發生骨折的一種全身性骨骼疾病，骨量減少，應包括骨礦物質和骨基質比例減少。骨的微觀結構退化，由骨吸收所致，表現為骨小梁變細、變稀，甚至斷裂，這實際上是一種微骨折，致使周身疼痛〔2〕。

實驗結果表明，模型組骨小梁稀疏、排列紊亂、骨髓間隙大。而治療各組骨小梁有明顯的新增現象。骨組織形態計量結果說明中藥、西藥、VK對治療骨質疏松都有一定效果，對大鼠骨小梁的再生和修復發揮了作用，尤其是中藥效果表現更為明顯。關于雙磷酸鹽藥物治療骨質疏松時曾發生有骨軟化的發生。因此長期用藥是否會由于過度抑制骨吸收而影響骨轉化過程，降低骨質量，有待于長期的觀察〔2〕。有研究認為鈣劑聯合維生素D能降低老年四肢骨的骨折發生率〔2〕還有研究認為〔11〕，骨疏康聯合鈣劑防治骨質疏松，有效地防止了骨丟失。得出了通過單純補鈣并未改善大鼠骨質疏松的說法，單純補鈣對骨量不能降低骨折的發生率。Stevenson等〔12〕認為補鈣對于治療骨質疏松只是一個輔助措施，聯合其他藥物可以起到一定作用。關于VK治療骨質疏松，有應用VK治療難愈性骨折收到良好效果的報道〔13〕。但也有研究認為VK的治療效果有明顯的藥物依賴性，vk的作用機制已經明確，但其確切的臨床效果有待進一步研究〔14〕。

目前防治骨質疏松的化學合成藥物頗多，但大多數不能有效增加骨量，降低骨折的發生率，而且副作用多，價格昂貴等諸多因素限制了它的廣泛應用。在眾多的中醫藥預防和治療骨質疏松的臨床和動物實驗表明，中醫藥對預防和治療骨質疏松發揮著重要的作用，具有廣泛的發展前景。

4 參考文獻

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