老年IgA腎病患者不同部位血管內皮生長因子水平及其與尿蛋白的相關性

應一櫻 陳 潔 朱飛波

(寧波市鄞州區第二醫院腎內科，浙江 寧波 315100)

IgA腎病可導致終末期腎病，目前尚未標準的治療方案〔1〕。血管內皮生長因子(VEGF)是一種分泌性的糖蛋白，作為血管內皮細胞特異性的促有絲分裂原，可促進血管內皮增生，繼而加速新生血管生成〔2〕。近年來發現多種腎臟疾病的腎組織VEGF水平異常〔3〕，但對IgA老年腎病VEGF的表達水平研究較少。本研究擬分析IgA腎病尿蛋白與VEGF的相關性，為IgA腎病防治提供依據。

1 資料和方法

1.1一般資料 本院2005年6月至2011年6月收治的67例IgA腎病老年患者，男39例，女28例，年齡60～71〔平均(65.3±4.2)〕歲；Lee氏分級：Ⅰ級14例，Ⅱ級18例，Ⅲ級23例，Ⅳ級12例；臨床分型：孤立性血尿型9例，孤立性蛋白尿型16例，血尿伴蛋白尿型20例，急性腎炎型9例，腎病綜合征型13例；其余情況見表1。納入標準：(1)均經腎活檢確診；(2)排除紫癜性腎炎、慢性肝病、乙肝病毒相關性腎炎和狼瘡性腎炎等繼發性IgA腎病。選取70例健康體檢者和41例狼瘡性腎炎作對比，兩組的性別構成與年齡與IgA腎病組無統計學差異。

1.2方法

1.2.1檢測方法 選取入組病例的腎臟組織并采用免疫組織化學技術PV6000二步法檢測VEGF的表達情況。采用陽性細胞計數與染色強度相結合的二級計分法評價免疫組化結果。染色強度：陰性為0分，淡黃色為1分，黃或深黃色為2分，褐或棕褐色為3分；陽性細胞計數：0～10%為0 分，6%～25%為1 分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為 4分。患者于入院次日，前臂靜脈抽血5 ml，同時留取空腹中段晨尿5.0 ml，離心后均保留上清，采用固相夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血和尿VEGF水平，嚴格按照VEGF ELISA試劑盒說明書操作。

1.2.2治療方法 均給予潑尼松口服，起始劑量為每天1 mg/kg(最大劑量為60 mg/d)，8～12 w后減量，每2周減量5～20 mg/d，以后4 w每2周減量2.5 mg/d，其后每4周減2.5 mg/d，直至10 mg/d維持。用藥期間不使用其他免疫抑制劑，密切監測患者的血常規、尿常規及生命體征。

1.3評價指標 (1)分析IgA腎病總體及不同病理參數(Lee氏分級、臨床分型、腎小管間質損傷和Katafuchi總積分)患者的腎臟VEGF表達、血和尿VEGF水平，并與健康對照組和狼瘡性腎炎組比較；(2)分析IgA腎病不同尿蛋白程度(<1.0 g/24 h、1.0 ～3.0 g患者和> 3.0 g患者)患者的腎臟VEGF表達、血和尿VEGF水平及相關性；(3)以3.0 g(24 h尿蛋白)和200.0 pg/ml(尿VEGF)為界值，將患者分為4組，分析組間血清白蛋白(sAlb)、免疫球蛋白A(IgA)、肌酐(Scr)、估算腎小球濾過率(eGFR)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿滲透壓和血尿素氮(BUN)水平及治療效果。

1.4療效評價標準〔4〕完全緩解：24 h尿蛋白<0.3 g，sAlb≥35 g/L，Scr及eGFR恢復正常或穩定；部分緩解：相對于基礎值，24 h尿蛋白定量下降幅度≥50%(但≥0.3 g)，sAlb≥30 g/L，Scr及eGFR恢復正常或穩定；治療無效：相對于基礎值，24 h尿蛋白定量下降幅度<50%，其他指標惡化。顯效=完全緩解+部分緩解，計算顯效率。

2 結 果

2.1IgA腎病不同病理參數的VEGF分布情況 IgA腎病組的尿和血VEGF水平高于健康對照組和狼瘡性腎炎組(P<0.01)，腎組織VEGF表達水平高于狼瘡性腎炎組(P<0.01)；且IgA腎病患者VEGF水平在不同Lee氏分級、腎小管間質損傷和Katafuchi總積分的分布有統計學差異，且隨著病理嚴重程度的增加而升高，但在臨床分型上無差異，見表1。腎臟組織的VEGF免疫組化圖見圖1。

2.2IgA腎病不同尿蛋白水平的VEGF分布及其相關性 IgA腎病不同程度尿蛋白患者的腎組織、尿和血VEGF水平有統計學差異(P<0.05)。IgA腎病的尿蛋白水平與腎組織VEGF表達(r=0.59,P<0.01)、尿VEGF(r=0.46P<0.01)和血VEGF(r=0.37,P<0.05)呈正相關，見表2。

表1 不同病理參數組VEGF分布情況

2.3IgA腎病不同尿蛋白和VEGF組合的生化指標比較 IgA腎病同一尿蛋白水平、不同VEGF水平組間sAlb、血IgA、Scr、eGFR、β2-MG、尿滲透壓和BUN有統計學差異(P<0.05)；尿VEGF≤200.0 pg/ml的患者中，除β2-MG外，尿蛋白不同水平間的其余病理指標有統計學差異(P<0.05)；尿VEGF>200.0 pg/ml的患者中，除血IgA和eGFR外，尿蛋白不同水平間的其余病理指標有統計學差異(P<0.05)。見表3。

狼瘡性腎炎

IgA腎病VEGF低表達

IgA腎病VEGF高表達

表2 不同尿蛋白水平的VEGF分布

表3 IgA腎病不同尿蛋白和VEGF組合的生化指標

2.4IgA腎病不同尿蛋白和VEGF組合的治療效果 IgA腎病同一尿蛋白水平，尿VEGF≤200.0 pg/ml組的顯效率高于尿VEGF>200.0 pg/ml組(P<0.05)；同一VEGF水平，不同尿蛋白組間的完全緩解和部分緩解率有統計學差異(P<0.05)，但顯效率無統計學差異(P>0.05)。見表4。

表4 IgA腎病不同尿蛋白和VEGF組合的治療效果〔n(%)〕

3 討 論

VEGF可促進血管再生，同時亦可促進腎臟缺血性疾病的側支循環建立，增加代償機制，改善組織缺血〔5〕。在腎臟的基本結構中，腎小球主要由毛細血管組成，VEGF可在內皮細胞中表達，而IgA 腎病是常見的原發性腎小球病，在腎小球系膜區可見IgA或IgA沉積為主的病理改變，導致腎小球結構損傷〔6〕，如間質損傷和系膜增生等，因此推測IgA腎病的VEGF水平會出現異常。在狼瘡性腎炎中發現腎臟組織的VEGF表達升高，認為缺氧、缺血是導致VEGF升高的主要原因〔7〕，而IgA腎病由于腎臟受損，也存在缺氧、缺血環境，故刺激了IgA患者VEGF表達。腎活檢是診斷疾病的金標準，也是獲取腎臟組織VEGF表達的直接途徑，但具有創傷性，很難在基層醫院開展。尿和血VEGF水平易檢測，操作容易，可反復操作，目前常用于多種疾病的診斷和預測〔8〕。

本研究發現IgA腎病患者VEGF出現異常表達，可能原因：(1)IgA腎病的缺血、缺氧環境導致VEGF表達代償性上調，而腎小球毛細血管基底膜結構的改變導致VEGF分泌和釋放量增多〔7〕；(2)IgA腎病的病理改變導致調節VEGF表達合成的因素變化，間接導致VEGF表達增強。IgA腎病VEGF不同形式的水平均上調，提示該指標的同質性較好，可用于IgA腎病的輔助治療。本研究結果表明VEGF水平可用于預測IgA腎病的嚴重程度，但不同臨床分型沒有差異，主要原因是該參數的異質性較高，包含多種其他參數〔1〕。由以上可看出，血和尿VEGF水平與腎組織的VEGF表達趨勢相同，推測可用血和尿VEGF水平替代腎組織VEGF表達的檢測。

本研究表明VEGF水平與IgA腎病的腎損傷程度有關，提示檢測IgA腎病VEGF水平有更好的應用價值，可與尿蛋白共同預測IgA腎病的嚴重程度及預后。

4 參考文獻

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8任選義，魏金星，李華強，等.轉錄因子Spl和血管內皮生長因子在進展期腎癌中的表達及臨床意義〔J〕.中華實驗外科雜志，2012;29(3)：498-9.