穩心顆粒劑在大鼠心肌缺血再灌注損傷時對心肌細胞的影響

王 多 劉 全

(一汽總醫院，吉林 長春 130011)

近年來隨著溶栓療法、動脈搭橋術、經皮腔內冠脈血管成形術、心臟移植術等方法的建立和推廣，心肌的缺血再灌注損傷十分常見，并且是一個十分棘手的問題。因此，采取一系列方法是減輕缺血再灌注損傷的一個關鍵〔1〕。穩心顆粒是一種中成藥，主要成分有黨參、黃精、三七、甘松，臨床主要用于治療心律失常。有文獻報道穩心顆粒對于預防治療缺血再灌注性心律失常也十分有效〔2〕，本研究旨在探討在心肌缺血再灌注損傷時穩心顆粒對心肌細胞的影響及其機制。

1 材料與方法

1.1實驗動物分組和造模 健康的體重約為220～280 g雌雄各半的SD大鼠160只(符合國家動物協會實驗動物標準)，隨機分為假手術組、缺血再灌注組、穩心顆粒大劑量組和穩心顆粒小劑量組。在缺血再灌注模型建立前4天，假手術組和缺血再灌注組每只每日給予生理鹽水(1.0 ml/100 g)灌胃，穩心顆粒大劑量組和穩心顆粒小劑量組分別每日給予生理鹽水稀釋的穩心顆粒18 g/kg，9 g/kg灌胃。以上四組大鼠在實驗前1 h再進行1次灌胃。缺血再灌注組和兩組給藥組將大鼠用乙醚吸入麻醉后固定在手術臺上，沿正中線剪開其胸前的皮膚，在大鼠左前胸第4、5肋間用止血鉗撥開，暴露心臟，在左冠狀動脈近端下穿3-0號縫線結扎左冠狀動脈(縫線打活結)，隨后關胸，1 h后松開縫線再灌注6 h，之后用5%戊巴比妥鈉(1 ml/100 mg)腹腔麻醉后打開胸廓，將心臟全部取出，在結扎線下取心肌組織，置于4%戊二醛溶液中固定，按常規方法制作電鏡標本。假手術組手術方法同上，但不結扎左冠狀動脈。

1.2心肌梗死范圍測定 假手術組、缺血再灌注組、穩心顆粒大小劑量組分別于再灌注6 h后麻醉摘取心臟，剪除心房和右心室，沿房室環從心尖至心底切成約4 mm厚的組織塊，置1%氯化硝基四氮唑藍(NBT)磷酸鹽緩沖液中染色20 s(37℃)，稱取左室重量，再沿梗死邊緣切除梗死部分心肌并稱重，以梗死心肌(MIW)與全左心室心肌重量(LVW)的百分比表示心肌梗死范圍。

1.3電鏡制作 缺血再灌注組、穩心顆粒大小劑量組每組各取1只，迅速去心臟，在結扎線下損傷的心肌組織處取5 mm×5 mm×2 mm組織各一塊，置于4%戊二醛溶液中固定，送電鏡室經脫水、包埋、切片、載網、染色后進行電鏡(JEM-1200EX/S型透射電鏡，日本光學電子公司生產)觀察，攝片。

2 結 果

2.1各組心肌梗死范圍的改變 心肌梗死范圍：與缺血再灌注組(0.214 8±0.034 0)比較，兩給藥組(小劑量組：0.154 3±0.033 5，大劑量組：0.148 1±0.258 7)顯著減小(P<0.05)；兩給藥組之間差異無顯著性(P>0.05)。

2.2電鏡結果 缺血再灌注組可見肌絲排列疏松，部分肌絲溶解、斷裂，線粒體排列不規則、紊亂，一部分線粒體輕度腫脹，線粒體內部分脊斷裂，一部分線粒體固縮變小、顏色加深。局部心肌細胞基膜破損，閏盤解離，心肌細胞輕度空化。兩給藥組可見肌絲排列規整但仍有斷裂，線粒體排列規則，個別線粒體局部空化，心肌細胞基膜較完整，局部閏盤輕度解離，心肌細胞未見空化。見圖1。

模型組 小劑量組 大劑量組

3 討 論

穩心顆粒是一種中成藥制劑，不良反應少，廣泛應用于臨床。現代醫學表明，黨參具有增強心肌收縮力，增加心排血量的作用，黃精能增加冠狀動脈血流量，降低血脂、血糖，并有防止動脈粥樣硬化的作用，三七能活血，還有抗心律失常的作用，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血狀態，對中樞神經有鎮靜鎮痛作用，甘松中纈草酮有抗心律失常作用。穩心顆粒能減輕心肌細胞損傷。其作用機制可能是減少氧自由基的產生，增強機體清除自由基和抵抗自由基損傷的能力，防止鈣超載，保持內皮細胞的完整性，促進一氧化氮(NO)的分泌，抑制中性粒細胞的浸潤，減輕無復流現象。并且當穩心顆粒達到一定的劑量后，其保護效應將不再增強。具體機制有待于進一步探討。

4 參考文獻

1麻興利, 徐啟明, 劉鐘淑. 中藥提取成分對腦缺血再灌注損傷的防治作用〔J〕. 中國中西醫結合雜志, 1993;13(11):699.

2梁 巖, 陳 聰, 徐國帆, 等. 穩心顆粒對急性心肌梗死直接經皮冠狀動脈介入治療術中再灌注心律失常的影響〔J〕. 臨床心血管病雜志,2005;21(10):601-2.