冠心寧、葛根素和燈盞花素注射液對大鼠心電活動的影響

王桂華 施 真 孫秀梅 王月華 孫 輝 杜冠華 馬春蕾

(濱州醫學院基礎學院生理學教研室，山東 煙臺 264003)

中藥注射液藥效迅速，適用搶救危重病癥，可皮內，肌肉，靜脈等給藥，是中醫治療急癥也是中藥劑型發展的一個方向。但在中藥不良反應統計中，注射液引起的不良反應個案最多。中藥注射液的不良反應常累及多系統、多器官，中藥注射液不良反應的不可預知性，差異性以及中藥注射液成分復雜，其有效成分和結構不完全明確給臨床中藥注射液安全合理的應用帶來困難。在臨床實踐中，由于種種原因，中藥中毒的事件時有發生，為能更好地防止中藥中毒事件的發生，加強中藥注射液不良反應的中藥基礎研究是十分重要和必要的〔1，2〕。本實驗對臨床廣泛應用的42種中藥注射液的心臟毒性作用進行了初步的篩查，本文旨在觀察臨床中常用于心腦血管疾病治療的3種活血化淤類中藥注射液(冠心寧注射液、葛根素注射液、燈盞花素注射液)對麻醉大鼠心臟的影響，以了解其是否存在心臟的毒性作用及其作用的規律。

1 材料與方法

1.1實驗動物 SPF級健康Wistar大鼠雄性64只，體質量280～350 g，購于山東大學實驗動物中心提供〔許可證號SCXK(魯20090001)〕。

1.2實驗儀器和試劑 BL-420F生物信號采集系統和分析軟件，由成都泰盟科技有限公司提供。冠心寧注射液，河北神威藥業有限公司提供，規格：(國藥準字Z13020779)；葛根素注射液由山東華信制藥集團股份有限公司提供，規格：100 mg/2 ml,人臨床用藥劑量：200～400 mg/次(國藥準字H20055928)；燈盞花素注射液，由山西銀湖制藥有限公司提供，規格：20 mg/5 ml，人臨床用量：10～20 mg/次(國藥準字Z14021942)；戊巴比妥鈉，由上海新亞藥業有限公司提供(國藥準字H31021724)，分析純。

1.3實驗方案 每種中藥注射液設2個處理組(給藥劑量是參照3種藥物臨床用藥量，正常劑量為臨床常用劑量的6倍，10倍正常劑量為臨床用藥量的60倍)，分別為相當于正常劑量組、10倍正常劑量組。中藥注射液均經腹腔注射給予，給藥容量均調整到正常劑量組為0.2 ml/100 g，10倍正常劑量組2 ml/100 g。生理鹽水組處理過程同給藥組，腹腔注射等量的生理鹽水。64只大鼠隨機分為4組，每組16只，分別為生理鹽水組、冠心寧組、葛根素組和燈盞花素組(每組分為兩個劑量組即正常劑量組、10倍正常劑量組，每組8只)。大鼠稱重后，2%戊巴比妥鈉麻醉大鼠，仰臥固定，將5號金屬注射器針頭刺入左右前肢及左后肢皮下，BL-420F生物信號采集系統專用心電圖(ECG)導聯線的鱷魚夾與注射器針頭連接并作屏蔽處理，測量標準肢體Ⅱ導聯ECG，記錄5 min后，腹腔注射給藥，同時連續記錄30 min的ECG變化。觀察比較給藥前后心率及ECG參數的變化。

1.4觀察指標 分別計算第5、10、15、20、25、30 min各時間段平均心率，觀察給藥前后不同時相心率的變化；觀察并計算給藥后第10～20 min R波、ST段、T波幅度(mV)改變及室早發生有無，并比較ECG變化的差異。

1.5統計學方法 運用SPSS11.0軟件進行T檢驗。

2 結 果

2.1各組大鼠給藥前后心率變化趨勢比較 如圖1(A、C、E、G)所示：正常劑量各組心率隨著時間進程呈逐漸減慢的趨勢，其中生理鹽水組、冠心寧組和燈盞花素組各時間點的心率與給藥前比較無顯著差異(P>0.05)；葛根素組于給藥后第25、30分鐘心率較給藥前降低明顯，差異顯著(P值分別為0.019、0.025)。如圖 1(B、D、F、H)所示：10倍正常劑量各組心率變化較正常劑量組更加明顯，尤其于給藥后第10～25分鐘變化較明顯，其中生理鹽水10倍正常劑量組大鼠各時間點的心率于給藥后第10分鐘開始加快，第15分鐘明顯加快，與給藥前比較，差異顯著(P=0.001)，給藥后第20分鐘回降至近給藥前水平；冠心寧組大鼠各時間點的心率于給藥后第5分鐘開始下降，第10、15、20、25、30分鐘明顯下降，與給藥前比較，差異顯著(P值分別為0.042、0.008、0.000、0.001、0.004)；葛根素組大鼠各時間點的心率于給藥后第5 min開始略有下降，第10、15、20、25、30分鐘明顯下降，與給藥前比較，差異顯著(P值分別為0.001、0.001、0.002、0.002、0.003)；燈盞花素組大鼠各時間點的心率于給藥前后未見明顯變化。

2.2各組大鼠給藥后30 min內各時間點心率變化率的比較 表1、表2可見生理鹽水正常劑量組△HR%隨時間逐漸減小；生理鹽水10倍正常劑量組大鼠△HR%升高，與同時間點生理鹽水正常劑量組比較，給藥后第10、15分鐘明顯升高(P=0.009，P=0.000)。冠心寧正常劑量組大鼠各時間點△HR%于給藥后第10、15分鐘減小程度較同時間點生理鹽水正常劑量組小(P=0.005，P=0.000)；冠心寧10倍正常劑量組大鼠各時間點△HR%于給藥后第15、20、25、30分鐘減小明顯，與同時間點生理鹽水10倍正常劑量組比較(P值分別均為0.000)；冠心寧10倍正常劑量組大鼠各時間點△HR%與冠心寧正常劑量組同時間點△HR%比較，給藥后第15、20、30分鐘均明顯減小(P值分別為0.001、0.000、0.000)。葛根素正常劑量組大鼠各時間點△HR%于給藥后第5分鐘較生理鹽水正常劑量組增大(P=0.001)，第10分鐘減小的程度小于生理鹽水正常劑量組(P=0.034)，第25、30分鐘減小程度較同時間點生理鹽水正常劑量明顯增大(P=0.011，P=0.023)(圖2E)；葛根素10倍正常劑量組大鼠各時間點△HR%與生理鹽水10倍正常劑量組同時間點比較，給藥后第10、15、30分鐘均明顯減小(P值分別為0.031、0.006、0.005)；葛根素10倍正常劑量組大鼠各時間點△HR%與葛根素正常劑量組同時間點比較，給藥后第5、 10、15分鐘明顯降低(P值分別為0.000、0.002、0.033)。燈盞花素正常劑量組大鼠各時間點△HR%與生理鹽水正常劑量組同時間點比較，于給藥后第5、10分鐘升高明顯(P值均為0.000)；燈盞花素10倍正常劑量組各時間點△HR%與生理鹽水10倍正常劑量組同時間點比較，給藥后第5、10、15、20分鐘均明顯降低(P值分別為0.001、0.000、0.000、0.001)；燈盞花素10倍正常劑量組大鼠各時間點△HR%與燈盞花素正常劑量組同時間點比較，于給藥后第5、10分鐘減小明顯(P=0.002，P=0.000)。

2.3各組大鼠于給藥后第10～20分鐘心電圖R波及ST-T改變 給藥后，各組正常劑量心電圖R波及ST-T與給藥前比較，除葛根素組外(T波升高，P=0.017)，其余各組大鼠未見明顯的改變。各組大鼠10倍正常劑量均發生了不同程度R波及ST-T改變：與給藥前比較，冠心寧組心電圖R波升高、ST段上移和T波升高(P=0.013)；與給藥前比較，葛根素組心電圖ST段上移和T波升高(分別為P=0.047，P=0.017)，而R波無顯著變化(P=0.606)；與給藥前比較，燈盞花素組心電圖ST段上移(P=0.025)，而R波和T波無顯著變化(見表3、表4)。可見10倍正常劑量各組大鼠心電圖ST-T改變較正常劑量改變程度大，存在一定得劑量依賴關系。

2.4各組大鼠給藥后第10～20分鐘時R波、ST段和T波的變化率的比較 見表5。與等量生理鹽水組比較，各藥物組正常劑量△ST%均有不同程度的改變(冠心寧組和燈盞花素組降低，葛根素組升高)(P值分別為0.036、0.000、0.016)；冠心寧組和燈盞花素組△R%，較等量生理鹽水組升高明顯(P=0.018，P=0.013)，而葛根素組無明顯改變(P=0.033)；各藥物組正常劑量△T%與等量生理鹽水組比較，均無明顯變化(P值依次為0.38、0.065、0.157)。各組大鼠10倍正常劑量組△R%、△ST%和△T%比較結果如下：與等量生理鹽水組比較，各藥物組10倍正常劑量△ST%均有不同程度改變均升高)(P值依次為0.012、0.000、0.011)；冠心寧組和葛根素組△T%均明顯增大(P值依次為0.002、0.000)，而燈盞花素組△T%變化不大，與等量生理鹽水組比較，無顯著差異(P=0.577)；葛根素組和燈盞花素組△R%均無明顯變化，與等量生理鹽水組比較，無顯著差異(P值依次為0.898、0.371)，而冠心寧組△R%升高，與等量生理鹽水組比較，差異顯著(P=0.015)。各藥物組10倍正常劑量與正常劑量比較： 冠心寧10倍正常劑量組△ST%和△T%較正常劑量組升高明顯(P值分別為0.000、0.006)；葛根素10倍正常劑量組△R%、△ST%和△T%較正常劑量組均無明顯變化(P值分別為0.228、0.497、0.79)；燈盞花素10倍正常劑量組△ST%較正常劑量組升高明顯(P=0.000)，而△R%和△T%與正常劑量組比較，無顯著差異(P值分別為0.058、0.128)。

2.5各組大鼠正常劑量ECG異常變化 見圖2。生理鹽水組未見室早和異常P波，T波升高1例；冠心寧組偶發單個室早，于給藥后約8 min出現，未見異常P波，T波升高2例；葛根素組未見室早， P波倒置1例和P波減小1例，于給藥后約第9分鐘P波倒置，持續約2 min后恢復(圖2葛根素組A)， 反復多次出現，T波升高3例，多見給藥后第10～20分鐘升高明顯(圖2葛根素組A)；燈盞花素組未見室早,于給藥后約8 min出現ST段降低2例，持續約10 min后ECG恢復給藥前水平，T波明顯升高1例。

2.6各組大鼠10倍正常劑量ECG異常變化 見圖3。生理鹽水組未見室早和異常P波，T波升高1例；冠心寧組未見室早和P波異常， T波升高6例于給藥后約第15分鐘明顯升高，持續到記錄結束，心率明顯減慢；葛根素組偶發單個室早2例，均于給藥后約1 min左右出現，偶發，持續約30～40 s恢復， P波倒置3例和P波減小消失1例，間斷多發，于給藥后約第15分鐘出現，持續約2 min后恢復，T波明顯升高7例，多見給藥后約第10～20分鐘升高明顯；燈盞花素組偶發單個室早2例，均于給藥后約1 min左右出現，持續約30～40 s恢復，T波明顯升高1例。

圖1 各組大鼠給藥前后心率變化趨勢比較

生理鹽水組圖②顯示給藥后15 min ECG ；葛根素組A 圖②給藥后9 min ECG P波倒置；葛根素組B圖②給藥后14 min ECG T波升高；冠心寧組圖②給藥后8 min ECG偶發單個室早，T波升高 ；燈盞花素組圖②給藥后8 min ECG ST段降低，T波略有升高

生理鹽水組圖②給藥后12 min ECG ；葛根素組A 圖②給藥后9 min ECG P波倒置，ST段降低；葛根素組B圖②給藥后14 min ECG P波倒置，T波升高，心率明顯減慢；燈盞花素組圖②給藥后1 min ECG 頻發室早；冠心寧組圖②給藥后15 min ECG T波升高，心率明顯減慢

組別5 min10 min15 min20 min25 min30 min生理鹽水組-3.524±0.422-5.671±0.781-5.984±0.88-7.310±2.361-8.062±1.034-10.09±1.98冠心寧組0.891±0.056-0.536±0.0432)-2.526±0.8972)-5.032±2.037-5.786±1.726-6.763±2.743葛根素組4.29±1.592)-2.463±0.0651)-8.737±3.014-10.177±2.150-14.954±3.0451)-14.06±2.1911)燈盞花素組1.045±1.0102)1.895±0.7572)0.726±0.033-1.253±0.483-3.211±0.893-1.77±0.516

表2 各組大鼠10倍正常劑量給藥后不同時間點心率變化率的比較±s,n=8)

表3 正常劑量各組大鼠R波和心電圖ST-T改變±s,n=8)

表4 10倍正常劑量各組大鼠R波和心電圖ST-T改變±s,n=8，mV)

表5 各組大鼠給藥后第10～20分鐘時R波、ST段和T波變化率的比較±s,n=8)

3 討 論

活血化瘀中藥注射液在血液流變學、血液黏度、抗血小板聚集、抗血栓形成、改善血管內皮細胞功能、調節血脂等方面具有一定的作用，對治療心腦血管疾病，減少缺血性心腦血管疾病的發病率、病死率、致殘率方面具有獨特的優勢〔3，4〕。不合理的用藥或過量的應用是否存在毒性作用目前備受關注和研究。本實驗設計的給藥劑量是參照3種藥物臨床用藥量，正常劑量為臨床常用劑量的6倍，10倍劑量為臨床用藥量的60倍，每種藥物分別設置2個給藥劑量即正常劑量組和10倍正常劑量組，旨在比較小劑量和大劑量對心肌是否有損傷及損傷程度的差異。ECG是心臟興奮的產生、傳導和恢復過程中生物電變化的記錄，心臟功能變化與生物電變化有著密切的關系〔5〕。

近年來，中藥注射劑的不良反應報道越來越多〔6〕。本實驗結果顯示，不同活血化瘀中藥注射液所引起的ECG改變不同，同一藥物不同劑量所致ECG變化不完全一致。冠心寧注射液10倍正常劑量明顯減慢心率、R波和T波波幅升高及ST段抬高，正常劑量對ECG的影響較10倍正常劑量小，有報道冠心寧注射液致患者出現皮疹、瘙癢、頭痛、眩暈、惡心、嘔吐及心悸、心電圖異常改變等多器官系統的異常反應〔7，8〕。葛根素注射液10倍正常劑量明顯減慢心率、ST段抬高和T波波幅升高，10倍正常劑量較正常劑量對ECG的影響大，多篇文獻曾報道葛根素注射液引起全身多個系統和器官癥狀，表現發熱、皮疹頭暈、頭痛、惡心嘔吐、溶血、肝功能異常、心悸、胸悶、竇房阻滯、心率下降、血液三系減少等〔9，10〕。燈盞花素注射液對心率的影響較前兩種藥物影響的程度小，正常劑量給藥后的15 min內致心率升高，而10倍正常劑量給藥后的20 min內心率明顯減慢，燈盞花素注射液正常劑量和10倍正常劑量對R波、T波均無顯著影響，而對ST段，正常劑量使其下降明顯，10倍正常劑量使其升高明顯。有臨床報道燈盞花素注射液有致心血管系統反應臨床主要表現為胸悶，心慌，心悸，顏面潮紅，血壓下降等〔11〕。

實驗中對藥物致ECG異常改變的觀察發現，冠心寧注射液主要使T波升高，正常劑量于給藥后8 min偶發室早1例，而10倍正常劑量則未見明顯異常，其機制不清，可能與動物的個體差異有關；葛根素注射液所致ECG改變主要是P波出現倒置或減小消失和T波明顯升高，10倍正常劑量較正常劑量發生的例數多；燈盞花素注射液對T波無明顯異常影響，而對ST段，正常劑量使其下降明顯，10倍正常劑量則無明顯變化。另葛根素注射液和燈盞花素注射液10倍正常劑量于給藥后1 min左右均出現室早發生，偶發或多發，持續約1 min，ECG恢復能正常節律和波形，這可能與麻醉狀態及藥物注射時可能所致的疼痛反應有一定的關系。

綜合3種中藥注射液對ECG的影響觀察發現，不同藥物所致ECG變化不同，這可能與不同藥物對心臟的損害部位及損害程度不同所致，其機制尚需進一步研究。 從劑量-效應關系分析來看，不同藥物所致ECG的異常變化與給藥劑量在某些指標有一定程度相關性，有些指標未見明顯相關性。不同藥物所致ECG的異常變化與給藥時相的關系，3種活血化瘀中藥注射液的ECG的變化均有時相規律。冠心寧注射液于給藥后10～15 minECG變化明顯，葛根素注射液給藥后5 minECG變化明顯，燈盞花素注射液ECG改變多見給藥后約第3～5 min左右，2 min基本恢復正常ECG。如果只作1次斷面觀察，就不易發現這樣的規律，甚至會從不同時間的不同表現作出不同的判斷。臨床觀察時ECG變化的多樣性，缺乏規律，均可能與之有關。時相的變化可能與不同藥物的作用機制有關，藥物對心臟的作用存在不同的時期〔12〕，故可在ECG上表現出一系列的相應變化。此外，藥物所致ECG的變化可能還與個體差異有關，也常使藥物的作用復雜化。中藥注射液發生嚴重不良反應，原因是多方面的。隨著中藥制劑的不斷增多，中藥制劑的安全性評價基礎研究和臨床觀察成為中藥發展應用的關鍵。

因此，活血化瘀的心臟損害，及由此而致的ECG的改變，要根據藥物的種類、劑量的差異以及給藥過程中的時相變化來觀察分析，才有助于提供分析、討論、比較的基礎。但無論如何，在臨床處理中藥注射液應用時應給予心血管系統足夠的關注，減少和避免臨床副作用的發生。

4 參考文獻

1Shaw D,Graeme L,Pierre D,etal.Pharmacovigilance of herbal medicine〔J〕.J Ethnopharmacol，2012；140(3):513-8.

2Kim EJ,Chen Y,Huang JQ,etal.Evidence-based toxicity evaluation and scheduling of Chinese herbal medicines〔J〕.J Ethnopharmacol,2012；31(12):8861-86.

3中華醫學會神經病學分會.腦血管病學組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組.中國急性缺血性腦卒中診治指南〔J〕.中國臨床醫生,2011；39(3):67-73.

4Xiong F,Wang H,Geng KK,etal.optimized preparation,characterization and biodistribution in heart of breviscapine lipid emulsion〔J〕.Chem Pharm Bull,2010；58(11):1455-60.

5Anigbogu CN,Isichei CV,Ajuluchukwu JN.Blood pressure,heart rate,cardiovascular reflexes and electrocardiographic changes in some hypertensive nigerians〔J〕.Niger J Physiol Sci,2012；27(1):23-7.

6王玉榮,劉 靜,黃 祥.100例中藥注射劑不良反應分析〔J〕.藥物不良反應雜志,2004；6(1):50-1.

7吳 文,李 磊,尹克鑫.冠心寧注射液不良反應報告分析〔J〕.安徽醫藥,2012；16(4):552-3.

8梁秀群,陳 通.冠心寧注射液引起群體性不良事件〔J〕.中南藥學,2008；6(3):510-2.

9羅菊香,薛世萍,楊麗霞,等.葛根素注射劑不良反應的循證醫學研究〔J〕.中國中醫藥信息雜志,2012；19(3):27-30.

10柳 琳,饒躍峰,馬葵芬,等.295例葛根素注射液不良反應分析〔J〕.藥物警戒，2010；7(24):56-8.

11張樹平,王桂花,許 勇,等.燈盞花素注射液的不良反應及防治措施〔J〕.中國現代藥物應用,2012；6(7):12-3.

12Liu HX,Wang SR,Lei Y,etal.Characteristics and advantages of traditional Chinese medicine in the treatment of acute myocardial infarction〔J〕.J Tradit Chin Med,2011；31(4):269-72.