葛根煮散工藝研究

文 謹 劉起華 孫玉雯 彭智平 仝小林

(中國中醫科學院廣安門醫院，北京，100053)

葛根為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根［1］，質韌，纖維性強，具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉的作用，其化學成分以異黃酮類物質為主［2］，飲片的質量控制主要為葛根素的含量測定。中藥煮散是將中藥粉碎成一定粒度與水共煎，去渣取汁制成的中藥液體制劑。通過將藥材粉碎，制成煮散，有利于提高藥材生物利用度，減少藥材使用量，具有省材省時之特點［3～6］。本試驗在傳統中藥煮散理論指導下，以葛根為研究對象，考察其制備工藝即最佳粉碎粒度及臨床使用煎煮工藝，旨在開發既符合中醫臨床用藥特點，又能節約藥材的新型中藥現代飲片。

1 儀器與試藥

島津LC－20A型高效液相色譜儀，LC－Solution工作站，Sartorius BP211D天平，FZ102微型植物試樣粉碎機(北京中興偉業儀器有限公司);HX－100型高速中藥粉碎機(浙江省永康市溪岸五金藥具廠)。

葛根為豆科植物野葛Pueraria lobata(Wild.)Ohwi的干燥根，購于北京市雙橋燕京中藥飲片廠，經鑒定符合《中華人民共和國藥典》2010年一部要求，葛根素對照品購于中國食品藥品檢定研究院(批號為752－200108)，甲醇為色譜純，水為娃哈哈高純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 葛根素含量測定［7］

2.1.1 色譜條件 色譜柱:Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動相:甲醇 －0.02% 磷酸(25∶75)，流速1.0 mL· min－1，柱溫 40 ℃，進樣量 10 μL，檢測波長250 nm，理論塔板數不低于3 000。

2.1.2 對照品溶液的制備 精密稱取葛根素對照品適量，加甲醇適量制成質量濃度分別為44.4 μg·mL－1的溶液，即得。

2.1.3 線性關系考察 精密稱取葛根素對照品適量，用甲醇配制成質量濃度為122.8 μg·mL－1的溶液，吸取2，4，6，8，10，12 μL，按 2.1.1 色譜條件注入液相色譜儀，以進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程 Y=3 819 716X+555.1，r=0.9 999。結果表明葛根素進樣量在0.2 456～1.474 μg之間與峰面積呈良好線性關系。

2.1.4 供試品溶液的制備 精密量取水煎備用液各1 mL，加甲醇稀釋定容至5 mL，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液。

2.1.5 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液10 μL，供試品溶液5～10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按上述色譜條件測定。色譜圖見圖1。

圖1 葛根素對照品(A)和葛根(B)的HPLC圖

2.2 干膏率的測定 分別精密量取以下水煎備用液10 mL，置已恒重的蒸發皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，計算干膏率。

2.3 數據處理與分析 葛根素含量及干膏收率的測定結果均采用SPSS 19.0統計軟件進行分析處理。

2.4 葛根煮散最佳粒度的優選

2.4.1 葛根煮散的制備 稱取葛根藥材適量，于高速或低速粉碎機中切割粉碎，經過多次反復的粉碎、篩選作業，直至藥材全部粉碎過篩，分別制成三種顆粒。顆粒Ⅰ:全部過1號篩(10目，內徑2 mm)，混有能通過3號篩(50目，內徑0.35 mm)的不超過20%;顆粒Ⅱ:全部過2號篩(24目，內徑0.85 mm)，混有能通過4號篩(65目，內徑0.25 mm)的不超過40%;顆粒Ⅲ:全部過4號篩(65目，內徑0.25 mm)，混有能通過5號篩(80目，內徑0.18 mm)的不超過60%。

2.4.2 煮散水煎液的制備 取上述三種煮散顆粒，各加20倍水，浸泡20 min后，武火加熱，沸后轉為文火，保持微沸狀態，煎煮20 min，100目濾布濾過，放冷，濾液定容至100 mL，作為備用液。

表1 樣品測定結果(n=3)

2.4.3 樣品的測定 按2.1.4項下制備供試品溶液，在上述色譜條件下測定，計算葛根素的煎出量，并測定干膏率，結果見表1。

對結果進行方差分析，三種顆粒葛根素煎出量及干膏率無統計學意義(P＞0.05)，從生產、包裝、煎煮多方面考慮，確定粒度范圍:小于10目(2 mm)大于80目(0.18 mm)的顆粒在總顆粒中所占比例不得小于80%，而大于10目小于80目的顆粒所占比例不得大于20%。

2.4.4 粒度分布 取100 g飲片用粉碎機(1400 r/min)直接粉碎成顆粒，使其通過不同篩孔直徑的標準篩，分別為10目(2 mm)，20 目(0.9 mm)，40 目(0.45 mm)，60目(0.3 mm)，80 目(0.18 mm)，100 目(0.15 mm)，分成若干各粒級，分別稱重，計算不同大小顆粒所占的百分比，結果見圖2。

圖2 葛根煮散粒徑分布

結果表明，10～40目之間的顆粒所占比例達到60%，80目以下顆粒占12%，累計損失率為1.2%。采用低速粉碎機對于葛根煮散的制備不僅快速，且符合粒度范圍的顆粒收粉率高，工業推廣容易。

2.5 葛根煮散煎煮工藝研究

2.5.1 煎煮時間考察 精密稱取所制煮散5 g，分別加入20 倍水，浸泡20 min，煎煮 10，20，30，40，50 min，煎煮1次，紗布濾過，濾液定容至100 mL，作為水煎備用液，測定葛根素含量。計算各個時間點葛根素的煎出量及干膏率，結果見圖3。

圖3 不同煎煮時間葛根素的煎出量及干膏率(n=3)

對結果進行方差分析，煎煮時間對葛根煮散中葛根素的煎出量及干膏率無明顯影響(P＞0.05)，直觀分析，在20 min時葛根素煎出量最高，故煎煮時間定為20 min。

2.5.2 加水量的考察 精密稱取所制煮散5 g，分別加入 6、8、10、12、14、16、18、20 倍水，浸泡 20 min，煎煮20 min，煎煮1次，紗布過濾，濾液定容至100 mL，作為水煎備用液，測定葛根素的含量。計算不同加水量時葛根素的煎出量及干膏率，結果見圖4。

圖4 不同加水量葛根素的煎出量及干膏率(n=3)

從圖中進行直觀分析，隨著加水量增多，葛根素的煎出量及干膏率均增大;通過方差分析，加水量對葛根煮散中葛根素的煎出量有極顯著影響(P＜0.01)，進而用多重比較方法LSD方法，進行兩兩比較，結果表明:加水量到20倍后，與其余倍數的加水量相比，葛根素煎出量及干膏率均有統計學意義(P＜0.05)，故葛根煮散煎煮1次需要加20倍水。

2.5.3 煎煮次數的考察 分別精密稱取所制煮散5 g，浸泡20 min，煎煮2 次，加入 6、8、10 倍水，共計加水量分別為12、16、20倍，各煎煮20 min，紗布過濾，濾液合并定容至100 mL，作為水煎備用液，測定葛根素的含量，計算葛根素的煎出量及干膏率，并分別與加水量為12、16、20倍水，煎煮1次，煎煮20 min的結果進行對比，見圖5。

圖5 不同煎煮次數葛根素的煎出量及干膏率(n=3)

結果表明，加水量6、8、10倍水分別煎煮2次，與在總加水量相同、煎煮1次時比較，葛根素的煎出量及干膏率均無統計學意義(P＞0.05)，故可優選葛根煮散的煎煮工藝為加20倍水，浸泡20 min，煎煮1次，煎煮20 min。

3 討論

煮散的粒度影響煎煮的效果［8～10］，最佳粒度使得中藥指標性成分能最大限度地溶出，提高其釋放速度和利用率，使其達到療效最佳。葛根纖維性強，流動性差，且富含淀粉，粉碎后細粉量增多，盡管在研究過程中考察顆粒Ⅲ號(中粉)煎出量與顆粒Ⅰ號(最粗粉)、顆粒Ⅱ號(粗粉)的煎出量結果無統計學意義，但粒徑太小煎煮時容易糊化、焦化，易產生更大的膠凍現象，給過濾帶來困難，所以在滿足有效成分煎出量達到較優的同時選擇較寬的粒度范圍，不僅有利于煮散制備生產時達到較高的收粉率，而且在臨床實際應用中也較方便。本試驗在考察煎煮次數時，僅選擇6、8、10倍的加水量，是考慮到加水量過多時，為達到臨床湯劑的服用量會相應增加濃縮時間，從而增加能耗。

本文的研究旨在優選葛根煮散的制備工藝及煎煮工藝，以單味藥的研究為出發點從而為復方的研究奠定一定基礎，對于其煎出效果與傳統飲片的對比關系、所節約的藥源劑量及量效關系將做進一步探討。

中藥飲片以煮散形式存在，對其規格可以實現量化及標準化，同時實現機械自動化包裝，與目前小包裝飲片相比，能降低人工成本，且有效成分煎出率高于傳統飲片［11～14］，能節約藥材、縮短煎煮時間，值得推廣。

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