李文娟 宋艷艷 王志玉
(1濟寧醫學院法醫學與醫學檢驗學院,山東 濟寧 272067;2山東大學公共衛生學院,山東 濟南 250012)
麻疹是由麻疹病毒(measles virus,MV)引起的人類急性全身性呼吸道傳染病,是世界性高傳染性的病毒性疾病之一[1]。雖然減毒活疫苗的應用使麻疹發病率明顯降低,但麻疹仍是發展中國家小兒死亡的重要原因[2-3]。對于麻疹的治療,化學合成藥物的抗病毒效果并不顯著[4]。因此尋找有效抗麻疹病毒藥物仍然是亟待解決的問題。研究顯示,大黃對多種病毒具有抑制和殺滅作用[5-7],但是對麻疹病毒的功效還有待研究。為探討大黃是否具有抗麻疹病毒的作用及其作用機制,本文通過抗病毒生物合成組、直接殺滅組、預防作用組3種加藥方式,使用麻疹病毒野毒株、標準株和疫苗株,根據細胞病變效應(cytopathic effect,CPE),觀察大黃乙醇提取物在Vero-SLAM細胞上的抗麻疹病毒的效果。
MV野毒株(MV1)由山東省疾病預防控制中心提供,2004年分離自山東濟寧麻疹暴發的病人,MV標準株(MV2)、S191疫苗株(MV3) 由山東省疾病預防控制中心提供,于敏感細胞上穩定傳代3次后保存備用,實驗時稀釋至100 TCID50/50μl使用。
Vero-SLAM細胞由山東省疾病預防控制中心提供,常規傳代后使用。
大黃乙醇提取物由山東省醫學科學院藥物所提供,用前將乙醇揮發后,以Hanks緩沖液稀釋,生藥含量為10g/L,置于4℃備用。病毒唑由山東魯抗制藥集團有限公司生產,規格為50g/L,以Hanks緩沖液稀釋,置于4℃備用。
用Hanks緩沖液將待……