紅參炮制工藝及質量研究

孫慕白，金 竺

（1.東北林業大學生命科學院，哈爾濱 150040;2.長春市中醫院，長春 130022）

紅參炮制工藝及質量研究

孫慕白1，金 竺2*

（1.東北林業大學生命科學院，哈爾濱 150040;2.長春市中醫院，長春 130022）

目的 細化紅參的炮制工藝參數，為紅參的炮制規范提出參考性建議，完善紅參的質量標準。方法 采用單因素考察的方法細化紅參的炮制時間和溫度，利用薄層色譜法建立紅參的特征指紋譜，采用紫外分光光度法測定紅參中總皂苷的含量。結果 確定紅參的炮制時間為3 h，炮制溫度為100℃;紅參特征指紋譜Rf值范圍為0.5～0.9;紅參中總皂苷含量不低于1.97%。結論 從外觀評價與薄層色譜細化了紅參的炮制工藝，完善了紅參的質量標準，為紅參的開發提供了依據。

紅參;炮制工藝;指紋圖譜;含量測定

通過人參與紅參藥理作用的比較可以看出［1-3］，人參經加工炮制后不但使成分發生變化，產生了新的成分，而且某些成分間的含量比例也隨之發生改變，從而直接造成了紅參的某些藥理作用的性質和強度和人參形成差別。紅參皂苷成分的研究晚于人參皂苷成分的研究。近年來，對其加工方法的探討很多，認為紅參較之人參有防蟲蛀、防腐、易于保存、保持藥效等優點。相反，目前市場上流通的紅參卻并沒有嚴格的炮制規范，產地、外觀、含量等均有不同程度的差異，這無疑對紅參的療效有著很大的影響。因此，本文從紅參的炮制方法研究入手，通過對時間、溫度等不同條件的摸索，細化紅參的炮制工藝參數，為紅參的炮制方法提出參考性建議，同時增加了紅參薄層色譜鑒別及總皂苷含量測定項，為控制紅參質量標準提供依據，填補了有關紅參質量研究的空白。

1 實驗材料

1.1 藥材 鮮參藥材，購于靖宇縣海源中藥材飲片有限公司，經長春中醫藥大學鑒定為五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey.（Panax schinseng Nees）的根，符合《中國藥典》（2005年一部）人參的質量標準。

1.2 儀器與試藥 蒸參箱（上海南陽儀器有限公司）;50探頭型紫外可見分光光度計（美國Varian公司）;DZF-6050K型真空干燥箱（上海橫科科技有限公司）。人參 Re、Rb1、Rg1、Rg2 對照品（批號:111846-201001，供含量測定用，規格:20 mg，購于中國藥品生物制品檢定所）;其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 炮制工藝考察 從檢索文獻［4-6］得出紅參的炮制過程可分為凈制、蒸制、烘干、晾曬、二次烘干5個過程，在此基礎上，實驗又針對不同因素影響紅參炮制工藝進行了考察，包括時間及溫度。

2.1.1 時間因素的考察 首先取3分人參放入帶有屜布的蒸參箱內，將溫度設置為100℃，分別蒸制1，3，5 h。將蒸制好的人參取出，放涼，切片，放入50℃真空干燥箱內至參片完全干燥，此過程約需要48 h。

2.1.2 溫度因素的考察 再取等量3分人參，分別放入帶有屜布的蒸參箱中，將蒸參箱分別設為80，100，120℃，蒸制3 h。將蒸制好的人參取出，放涼，切片，放入50℃真空干燥箱內至參片完全干燥，此過程約需要48 h。

2.2 紅參的質量研究

2.2.1 薄層色譜鑒別［6］

2.2.1.1 對照品溶液的制備 取人參皂苷Re對照品，加甲醇制成1 mL含2 mg的溶液作為對照品溶液。

2.2.1.2 供試品溶液的制備 取不同炮制條件下干燥后的紅參片，粉碎，過40目篩，分別取本品粉末1 g，置圓底燒瓶中，加入三氯甲烷40 mL，加熱回流1 h。棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加水0.5 mL攪拌濕潤，加水飽和正丁醇10 mL，超聲處理30 min，吸取上清液加三倍量氨試液（配制方法依藥典附錄:濃氨水400 mL加水至1 000 mL），搖勻，放置分層，取上層置蒸發皿中蒸干，殘渣加甲醇1 mL，使溶解，作為供試品溶液。

2.2.1.3 展開 以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。

2.2.1.4 檢視 噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光燈及紫外燈（365 nm）下檢視。

2.2.1.5 結果 100℃條件下蒸制1，3，5 h以及Re對照品。展開劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）下層溶液。由此薄層板可以看出，溫度不變的條件下，蒸制3 h與蒸制5 h斑點顏色較深，說明皂苷含量相對較多，且二者的皂苷種類也多于蒸制1 h的紅參。說明在溫度不變的情況下蒸制3 h與蒸制5 h為較優炮制工藝。

炮制3 h條件下，80，100，120℃以及Re對照品，展開劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）下層溶液。由此薄層板可以看出，在時間不變的條件下，溫度在100℃時人參皂苷Re的斑點較清晰，含量較多，其皂苷種類也多于80℃的炮制品。而在120℃相對于其他2種條件某些斑點顏色很淺而某些斑點顏色很深，說明某些成分發生了轉移。

2.2.2 紅參總皂苷含量測定原理及方法［7-8］分光光度法是通過測定被測物質在特定波長或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。常用的波長范圍為:1）200～400 nm的紫外光區;2）400～760 nm的可見光區;3）2.5～25 μm的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計。單色光輻射穿過被測的物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度成正比，其關系如下:A=ECL，式中A為吸收度，T為透光率，E為吸收系數，采用的表示方法是（E1%1 cm），即吸收度換算成溶液濃度為1%（g/mL），液層厚度為1 cm的數值;C為100 mL溶液中所含被測物質的重量，g按干燥品或無水物計算;L為液層厚度，單位為cm。

測定時應用標準品或對照品同時操作。

2.2.3 方法學考察［9］

2.2.3.1 對照品溶液的制備 取人參皂苷Re對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解制成濃度1.012 mg/mL的對照品溶液。

2.2.3.2 供試品溶液的制備 取樣品粉末（過4號篩）約0.5 g，精密稱定，置離心管中，加甲醇約20 mL，超聲（功率250 W，頻率20 kHz）提取3次，20 min/次，離心，分離甲醇并蒸干，殘渣加10 mL水超聲溶解，轉移至分液漏斗中，加水飽和正丁醇振搖提取3次，20 mL/次，合并正丁醇液，移至分液漏斗中，加入氨試液洗滌2次，每次20 mL，棄去氨試液，分取正丁醇提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉移至10 mL量瓶內，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

2.2.3.3 檢測波長的選擇 精密吸取人參皂苷Re對照品，供試品溶液適量，置10 mL具塞試管中，水浴揮干溶劑，精密加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL，再精密加入高氯酸溶液0.8 mL混勻，置60℃水浴中15 min取出，立即放入冰水浴中2 min，精密加入冰醋酸5 mL混勻，消除氣泡后置紫外掃描儀器上，結果表明，人參皂苷Re對照品溶液和供試品溶液在547 nm處有最大吸收，確定547 nm為紅參總皂苷的檢測波長。

2.2.3.4 標準曲線的建立 精密稱取干燥恒重的人參皂苷Re對照品5.0 mg，置25 mL容量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述對照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，分別置于 10 mL 容量瓶中，并各加乙醇1.0 mL，然后精密加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。同時取乙醇1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，作為空白對照。于547 nm波長處測定吸光度。以對照品溶液濃度C（mg/mL）為橫坐標（X），吸光度A為縱坐標（Y），進行線性回歸，繪制標準曲線，得回歸方程A=32.65C－0.000 2，r=0.998 9。結果顯示，人參皂苷 Re對照品在0.041 2～0.202 3 mg范圍內線性關系良好。

2.2.3.5 精密度試驗 依法精密稱取同一供試品按上述方法連續測定6次，計算供試品含量，以考察本方法的重現性。求得平均吸收度0.4186，RSD為1.17%。

2.2.3.6 重復性試驗 稱取6分紅參各0.5 g，精密稱定，按供試品項下操作，制得供試品溶液，進行測定。計算求得平均含量為2.46%，RSD為1.51%。

2.2.3.7 穩定性試驗 取紅參供試品溶液分別在0，0.5，1，1.5，2，2.5，3 h 進行測定，計算平均吸收度0.515 2，RSD為1.03%。結果表明樣品在3 h內穩定。

2.2.3.8 回收率試驗 采用加樣回收率試驗法，精密稱定已知含量的供試品置100 mL容量瓶中，按供試品溶液的制備方法制成供試品溶液，并依法測定，計算回收率。結果平均回收率為98.05%，RSD為2.07%。

2.2.4 樣品中總皂苷含量測定結果 分別將上述選定的2種炮制品分別制成供試品溶液，按上述方法進行測定。結果見表1。

表1 總皂苷含量測定結果（n=3）

3 小結

本文為紅參的炮制規范提供了數據支持，建議在今后的紅參炮制中可依據不同人群的不同需求采用不同的炮制方法，達到充分利用紅參或達到最大藥效發揮的目的。也可為紅參提供更廣闊的市場需求，使消費者更明確的購買到所需紅參品種。建議在今后的藥典中可加入紅參炮制規范的相關內容以及紅參薄層色譜的特殊鑒別，使紅參質量標準更加全面。

紅參炮制過程中蒸制時間對人參皂苷含量有顯著影響，而提溫時間對人參皂苷含量影響不大。但是提溫時間明顯決定著紅參的外觀。溫度過高，紅參失水過快而導致許多縱皺紋，而溫度過高容易使紅參顏色過暗。

通過對紅參不同炮制工藝的考察，對比了在不同炮制條件下紅參中總皂苷的含量差異，說明了在不同溫度，不同時間下紅參中總皂苷含量雖無明顯差異，但皂苷的種類仍然是有差異的，說明在《中國藥典》2005年版中紅參的薄層鑒別僅以人參為參考是不全面的。

:

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Processing technology and quality of red ginseng

SUN Mubai1，JIN Zhu2*
（1.Northeast University of Forestry，Biological Science，Haerbin 150040，China;2.Changchun Hospital of TCM，Changchun 130022，China）

ObjectiveThrough the refinement of processing technology parameters of red ginseng，referential suggestions are made for standards of red ginseng processing to improve its quality standard.MethodsThrough single factor investigation，researchers classify the time and temperature in red ginseng's processing.Thin layer chromatography is used to establish the dactylogram for red ginseng's characteristics;ultraviolet spectrophotometry is used to examine the amount of saponins in red ginseng.ResultsThe processing time of red ginseng is 3 hours and the processing temperature 100 ℃.In the dactylogram for red ginseng's characteristics，its Rf value was 0.5 ～0.9 and the volume of saponin in red ginseng is no less than 1.97%.ConclusionThrough the evaluation on its appearance and refinement of its processing technology，the research improved the quality standards for red ginsen and provided the basis for the development of red ginseng.

red ginseng;processing technology;dactylogram;quantity examination

R283.4

A

2095－6258（2014）04－0611－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.018

吉林省科技廳計劃項目（20110908）。

孫慕白（1992－），女，大學本科。研究方向:生物科學。

金 竺，女，碩士，電話:18743062321，電子信箱:584673587@qq.com。

2014－04－08）