bFGF和TGF-β對原發性骨關節炎軟骨間充質祖細胞增殖調控作用

劉 軍，王洪偉，陳 語，于海龍，王 琪，楊會峰，馬駿雄，項良碧 (沈陽軍區總醫院骨科，遼寧沈陽 110016)

原發性骨關節炎(osteoarthritis，OA)關節軟骨間充質祖細胞(mesenchymal progenitor cells，MPCs)數量僅占關節軟骨細胞數量的3% ～4%，雖然OA關節軟骨的MPCs比正常人增殖活躍，但其成軟骨、成骨分化能力均降低。如何利用相關生長因子進行刺激，調控原發性OA關節軟骨MPCs的增殖和成軟骨分化作用，恢復OA關節軟骨細胞調節和維持軟骨組織的損傷與修復的動態平衡，具有重要的臨床應用前景。bFGF和TGF-β均參與MPCs增殖的調控，生長因子對MPCs生物學行為的調控作用相當復雜，體外使用多種生長因子復合作用于MSCs才可能盡量模擬體內的生化環境，如何應用多種生長因子，單獨使用還是聯合使用生長因子等都有待進一步的實驗研究［1-3］。本實驗觀察了不同濃度、單獨或聯合應用bFGF和TGF-β1對OA關節軟骨MPCs增殖作用的影響，為臨床治療軟骨退變和軟骨損傷提供新的理論支持。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

人原發性骨關節炎關節軟骨間充質祖細胞通過免疫磁珠方法分選得到。生長因子相關試劑:TGF-β1(美國 R＆D system)、bFGF(美國 PeproTech公司)。

1.2 方法

將P2代OA關節軟骨MPCs以每孔1×104的濃度接種于96孔板中，用含10%FBS的基礎培養液分別配制含bFGF或/和TGF-β1的培養液。每一濃度設5個復孔，對照組加入無上述生長因子的含10%FBS的基礎培養液，隔日換液。生長因子促增殖培養第1～7天，每日進行MTT檢測。生長因子按照下列分組加入:A 組按終濃度 0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 ng/mL 加入TGF-β1;B 組按終濃度 1.0、5.0、10.0、50.0、100.0 ng/mL 加入bFGF;C 組按終濃度(0.1+1.0)、(0.5+5.0)、(1.0+10.0)、(5.0+50.0)、(10.0+100.0)ng/mL 加入 TGF-β1+bFGF。

1.3 統計學方法

使用SPSS 13.0統計軟件建立數據……