BC－6600型全自動血細(xì)胞分析儀性能評價＊

李春碧，伏 攀（四川省廣元市中心醫(yī)院檢驗科 628000）

血細(xì)胞分析儀已廣泛應(yīng)用于各級臨床實驗室，但如果未對分析儀進行嚴(yán)格的性能評價、不了解儀器性能而盲目操作，將產(chǎn)生明顯的檢驗誤差，影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性［1］。對分析儀進行全面性能評價，有助于掌握儀器的性能。本研究以國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會（ICSH）和美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）制定的評價標(biāo)準(zhǔn)對BC－6600型全自動血細(xì)胞分析儀（簡稱 BC－6600型分析儀）進行了性能評價［2－3］，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 乙二胺四乙酸二鉀抗凝靜脈血標(biāo)本采集自本院門診患者。

1.2 儀器與試劑 BC－6600型分析儀、BC－5800型全自動血細(xì)胞分析儀（簡稱BC－5800型分析儀）及配套檢測試劑、全血細(xì)胞質(zhì)控物（批號BC309AN）、網(wǎng)織紅細(xì)胞質(zhì)控物（批號 ME073）均購自邁瑞公司。

1.3 方法 按照ICSH和NCCLS制定的血細(xì)胞分析儀性能評價指標(biāo)，對白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、血小板計數(shù)（PLT）、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)（RET）檢測精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍和可比性進行性能評價。

1.3.1 精密度 （1）批內(nèi)精密度測定：取高、中、低值新鮮抗凝靜脈血，分別使用手動進樣模式和自動進樣模式，連續(xù)重復(fù)測定10次，計算變異系數(shù)（CV）。要求CV在廠家標(biāo)示范圍內(nèi)，未達(dá)到要求者，不能進行余下相關(guān)試驗。廠家標(biāo)示的BC－6600型分析儀各指標(biāo)CV要求如下：WBC＜2.5%、RBC＜1%、Hb＜1%、PLT＜4%、RET＜15%。（2）批間精密度測定：采用高、中、低值質(zhì)控品，連續(xù)測定20d，計算CV。

1.3.2 準(zhǔn)確度 選擇開放全血模式，完成BC－6600型分析儀校準(zhǔn)后，重復(fù)10次測定校準(zhǔn)品，計算實測值均值、相對偏差（Bias），Bias＝（實測值均值－靶值）／靶值×100%。要求Bias小于美國國會頒布的臨床實驗室修正案（CLIA′88）標(biāo)準(zhǔn)的1／2。

1.3.3 攜帶污染率 取高值新鮮抗凝靜脈血，混合均勻后采用手動進樣模式連續(xù)測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低值新鮮抗凝靜脈血，混合均勻后采用手動進樣模式連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。攜帶污染率（%）＝（L1－L3）／（H3－L3）×100%。

1.3.4 可比性 采用校準(zhǔn)品對BC－5800型分析儀進行校準(zhǔn)，并以其為靶機；隨機選擇經(jīng)BC－5800型分析儀檢測的新鮮抗凝靜脈血50例，采用BC－6600型分析儀進行檢測。2臺分析儀均采用自動全血模式進行WBC、RBC、Hb、PLT檢測。對所得數(shù)據(jù)進行線性回歸分析，計算相關(guān)系數(shù)的平方值（r2）及線性回歸方程。

1.3.5 線性范圍 選擇 WBC、RBC、Hb、PLT、RET 高值標(biāo)本，按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例制備稀釋標(biāo)本，計算理論值，理論值＝實際值×稀釋倍數(shù)。開放全血模式下，采用BC－6600型分析儀對所有標(biāo)本分別連續(xù)測定3次，計算實測值。對各指標(biāo)實測值與理論值進行線性回歸分析。

1.3.6 WBC分類計數(shù)評價 隨機選擇20例經(jīng)BC－6600型分析儀檢測的標(biāo)本（排除采集自血液系統(tǒng)疾病患者的標(biāo)本），每例標(biāo)本制作血涂片2張，采用瑞氏－吉姆沙染液進行染色，由高年資、經(jīng)驗豐富的檢驗醫(yī)師進行WBC分類計數(shù)，Bias＝（儀器測定結(jié)果均值－手工測定結(jié)果均值）／手工測定結(jié)果均值×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS11.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以（）表示，組間比較采用t檢驗。回歸分析采用線性回歸分析。P＜0.05為比較差異或分析參數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 精密度分析結(jié)果 BC－6600型分析儀各指標(biāo)檢測精密度分析結(jié)果見表1。手動進樣模式及自動進樣模式各指標(biāo)檢測精密度均在廠家標(biāo)示范圍內(nèi)。采用相同進樣模式時，批內(nèi)精密度優(yōu)于批間精密度，手動進樣模式精密度優(yōu)于自動進樣模式精密度。

表1 BC－6600型分析儀精密度分析結(jié)果（CV，%）

2.2 準(zhǔn)確度分析結(jié)果 WBC、RBC、Hb、PLT、RET檢測Bias均小于CLIA′88要求標(biāo)準(zhǔn)的1／2，見表2。

表2 BC－6600型分析儀準(zhǔn)確度分析結(jié)果

2.3 攜帶污染率分析結(jié)果 WBC、RBC、Hb、PLT、RET檢測攜帶污染率分別為0.38%、0.48%、0.00%、0.98%、0.72%，均小于1%，符合ICSH規(guī)定的要求。

2.4 可比性分析結(jié)果 線性回歸分析結(jié)果顯示，BC－5800與BC－6600型分析儀 WBC、RBC、Hb、PLT檢測結(jié)果具有良好的相關(guān)性，見表3。t檢驗結(jié)果顯示，2臺儀器各指標(biāo)檢測結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 BC－5800與BC－6600型分析儀可比性分析結(jié)果

2.5 線性范圍分析結(jié)果 BC－6600型分析儀 WBC、RBC、Hb、RET、PLT檢測實測值與理論值的r2均大于或等于0.97，見表4。

表4 BC－6600型分析儀線性范圍分析結(jié)果

2.6 WBC分類計數(shù)評價結(jié)果 BC－6600型分析儀中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)結(jié)果與人工分類計數(shù)結(jié)果具有較高的相關(guān)性，單核細(xì)胞計數(shù)結(jié)果相關(guān)性稍差，嗜堿性粒細(xì)胞計數(shù)結(jié)果相關(guān)性最差，見表5。

表5 BC－6600型分析儀WBC分類計數(shù)評價結(jié)果

3 討 論

BC－6600型分析儀采用鞘流阻抗法、激光散射法以及熒光染色流式細(xì)胞技術(shù)進行血細(xì)胞檢測，Hb檢測則采用比色法，可進行包括RET、有核紅細(xì)胞在內(nèi)的多個外周血指標(biāo)檢測，最高檢測速度可達(dá)120例標(biāo)本／小時，能夠滿足臨床血液常規(guī)檢查的需要。

本研究結(jié)果顯示，BC－6600型分析儀性能良好，批內(nèi)、批間精密度較高，符合相關(guān)規(guī)定。WBC、RBC、Hb、PLT檢測Bias均低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WBC＜5%，RBC＜2%，Hb＜2%，PLT＜9%）［4］，也小于 CLIA′88要求標(biāo)準(zhǔn)的1／2，表明檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度較好。各項指標(biāo)檢測攜帶污染率均小于1%，說明高值標(biāo)本對低值標(biāo)本的檢測影響較小。雖然PLT檢測攜帶污染率為0.98%，但仍符合符合ICSH規(guī)定的要求。WBC、RBC、Hb、PLT、RET檢測線性范圍基本能覆蓋臨床標(biāo)本濃度范圍，WBC檢測高值可達(dá)100×109／L，低值則可達(dá)0.2×109／L；PLT檢測高值可達(dá)1 000 109／L。可比性分析結(jié)果表明，BC－5800、BC－6600型分析儀各指標(biāo)檢測結(jié)果的相關(guān)性較好（r2＞0.98），說明2臺儀器檢測結(jié)果具有一致性。在排除血液系統(tǒng)疾病患者標(biāo)本的情況下，BC－6600型分析儀WBC分類計數(shù)結(jié)果與手工分類計數(shù)結(jié)果具有較好的一致性，能夠足臨床診療的需要。BC－6600型分析儀淋巴細(xì)胞計數(shù)結(jié)果小于手工計數(shù)結(jié)果，與類似研究報道一致［5］，可能與分析儀無法識別異型淋巴細(xì)胞有關(guān)。

筆者在日常工作中發(fā)現(xiàn)，BC－6600型分析儀無法識別外周血中的幼稚細(xì)胞；對于溶血標(biāo)本，無法進行紅細(xì)胞各項參數(shù)檢測；嚴(yán)重溶血時，PLT檢測結(jié)果需進行手工檢測驗證；PLT檢測結(jié)果較易受紅細(xì)胞平均容積（MCV）的影響，當(dāng)MCV＜65fL時，PLT檢測結(jié)果假性增高，且 MCV越小，影響程度越大［6］。在出現(xiàn)上述情況時，分析儀可能出現(xiàn)相應(yīng)的報警信息，因此在臨床工作中應(yīng)注意并善于分析報警信息。手工檢測RET僅能提供百分比結(jié)果，無法提供絕對計數(shù)結(jié)果，而BC－6600型分析儀則可提供絕對計數(shù)，高熒光強度（HFR）、低熒光強度（LFR）、中熒光強度（MFR）RET百分比，未成熟RET百分比和RET成熟指數(shù)檢測結(jié)果，能夠為判斷RBC生成情況提供更敏感、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)資料，有利于貧血性疾病的診斷、療效評價、預(yù)后判斷，以及骨髓造血功能和器官移植效果評價［7］。手工檢測RET極易受操作人員主觀因素的影響，且血涂片紅細(xì)胞分布是否均勻、涂片厚薄、RNA染色效果等因素對檢測結(jié)果也有很大的影響。血細(xì)胞分析儀采用對RNA有很強親和力的染料對RET進行染色檢測，避免了上述因素的影響，但仍然存在其他干擾因素。有研究顯示，Howell－Jolly小體、瘧原蟲、冷凝集素等因素對血細(xì)胞分析儀檢測RET參數(shù)產(chǎn)生直接干擾［8］。

手工檢測作為直接觀察細(xì)胞形態(tài)的傳統(tǒng)方法，應(yīng)與血細(xì)胞分析儀聯(lián)合使用，從而彌補手工檢測的不足［9］。本研究結(jié)果顯示，BC－6600型分析儀中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞計數(shù)結(jié)果與手工計數(shù)結(jié)果相關(guān)性良好；單核細(xì)胞計數(shù)結(jié)果相關(guān)性一般，嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)結(jié)果相關(guān)性較差，可能與其在 WBC中所占比例較少有關(guān)［10］。目前，WBC分類計數(shù)的參考方法仍為人工顯微鏡分類計數(shù)法。因此，對于存在血細(xì)胞分析儀檢測報警信息的標(biāo)本，以及血液系統(tǒng)疾病患者和疑似瘧原蟲感染患者的標(biāo)本，均需進行涂片檢查。

綜上所述，BC－6600型分析儀雖然在某些方面存在欠缺，但總體性能良好，能夠滿足臨床診療的需要。

［1］郭慶昕，李煥英，張振華，等.某型號五分類血細(xì)胞分析儀性能評價［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（5）：595－596.

［2］International Council for Standardization in Haematology.Guidelines for the evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte counting and cell marker applications［J］.Clin Lab Haematol，1994，16（2）：157－174.

［3］National Committee for Clinical Laboratory Standards.EP9－A Method comparison and bias estimation using patient sample；Aproved guidelines［S］.Wayne，PA，USA：NCCLS，1986.

［4］叢玉隆，岳家新，袁家穎.實用血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：14.

［5］李筱梅，楊玉寶，李承文，等.白細(xì)胞分類計數(shù)方法學(xué)比較［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2004，9（2）：100－102.

［6］周藝，陳春蘭，馮文安，等.血細(xì)胞分析儀中 MCV、RDW對PLT計數(shù)的影響的調(diào)查研究［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，7（21）：1735－1736.

［7］Bock A，Herkner KR.Reticulocyte maturity pattern analysis as a predictive marker of erythropoiesis in paediarics［J］.Clin Lab Haematol，1994，16（3）：343－348.

［8］Brown M，Wittwer C.Flow cytometry：principles and clinical applications in hematology ［J］.Clin Chem，2000，46（8）：1221－1229.

［9］陳梅，方偉禎，傅玉如.Sysmex XE－2100全自動血細(xì)胞分析儀分析網(wǎng)織紅細(xì)胞性能評價［J］.實用醫(yī)學(xué)雜志，2007，23（2）：268－269.

［10］蔣蕾，孫健，顧平.Beckman Coulter LH－750血細(xì)胞分析儀的性能評價［J］.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2010，38（5）：471－473.