UF－1000i全自動分析儀細(xì)胞數(shù)與顯微鏡檢結(jié)果的關(guān)系探討

陳 敏，譚 璇，郭桂玲（廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430070）

尿液中有形成分的檢測是診斷泌尿系統(tǒng)疾病，特別是腎臟疾病的重要實(shí)驗(yàn)指標(biāo)之一。UF－1000i全自動分析儀因其快速、操作方便以及敏感性好等特點(diǎn)，是目前用于檢測尿液有形成分最先進(jìn)的儀器之一［1］。但由于尿液有形成分的多樣性、復(fù)雜性、干擾因素多以及儀器本身的局限性，常導(dǎo)致紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）、管型檢測的假陽性或假陰性［2］。此時尿有形成分?jǐn)?shù)并非真實(shí)數(shù)值，給臨床診斷、用藥造成一定的困擾。加上臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)人員仍習(xí)慣于干化學(xué)加顯微鏡鏡檢的報告模式（即鏡檢細(xì)胞數(shù)以最低數(shù)～最高數(shù)／HP報告），對于干化學(xué)加顯微鏡鏡檢檢測結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果之間如何換算還存在著疑惑，有的甚至質(zhì)疑尿液分析儀結(jié)果的可靠性。為了提高尿液有形成分結(jié)果的準(zhǔn)確性和真實(shí)性，找到兩種方法之間的內(nèi)在聯(lián)系，為臨床醫(yī)生提供有力的科學(xué)依據(jù)。本研究收集干化學(xué)中RBC、WBC陽性尿標(biāo)本進(jìn)行初篩，顯微鏡鏡檢將標(biāo)本中無WBC干擾的標(biāo)本挑出來，離心取尿液有形成分進(jìn)行人工鏡檢，分析鏡檢細(xì)胞數(shù)與儀器測定細(xì)胞數(shù)之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料來源 2013年2月22日至4月23日門診及住院部干化學(xué)中RBC、WBC陽性標(biāo)本各560例，其中男300例，女260例。

1.2 儀器與試劑 選用日本Sysmex公司的UF－1000i全自動分析儀，AX－4280尿干化學(xué)儀、Olympus顯微鏡以及所有原裝試劑、質(zhì)控液。

1.3 方法

1.3.1 UF－1000i全自動分析儀檢測 儀器使用之前用 UF－1000i、AX－4280原裝質(zhì)控液進(jìn)行檢測，挑選門診及住院部干化學(xué)結(jié)果為RBC、WBC陽性尿標(biāo)本，按照操作說明對尿標(biāo)本進(jìn)行檢測。

1.3.2 離心尿液直接涂片法檢測 儀器檢測完后將挑選出來的尿液標(biāo)本10mL置于水平離心機(jī)中以1 500 r／min（離心半徑19cm）離心5min后，棄上清液留沉淀物0.2mL，混勻后取約20μL沉淀物于載玻片上，用18mm×18mm蓋玻片覆蓋后顯微鏡檢查。先用低倍鏡（×10）觀察全片，再用高倍鏡×40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分。檢查10個高倍視野細(xì)胞，結(jié)果報平均值／HP［3］，鏡檢結(jié)果均以平均值報告。若 UF－1000i全自動分析儀出現(xiàn)異常報告，而顯微鏡鏡檢呈現(xiàn)陰性，則重復(fù)充池進(jìn)行第2次顯微鏡鏡檢，最終確定檢測結(jié)果。為了減少不同鏡檢者的變異性，所有標(biāo)本的顯微鏡下檢測均由同一人完成，所有測試在2h之內(nèi)完成。

1.3.3 不同攜帶污染率計(jì)算 分別對RBC、WBC高值和低值尿標(biāo)本進(jìn)行試驗(yàn)，高值連續(xù)檢測3次，結(jié)果為H1、H2、H3；低值連續(xù)檢測3次，結(jié)果為L1、L2、L3，按公式（L1－L3）／（H3－L3）×100%求攜帶污染率［4］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用Excel 2003對UF－1000i全自動分析儀RBC、WBC尿有形成分、鏡檢結(jié)果進(jìn)行記錄，并使用SPSS17.0做相關(guān)分析、回歸方程計(jì)算。相關(guān)系數(shù)r＝1.0～0.8為相關(guān)性好，0.8～0.6為相關(guān)性一般。

2 結(jié) 果

2.1 攜帶污染率檢測 3個水平RBC、WBC的攜帶污染率均＜0.1%，符合本實(shí)驗(yàn)室要求。見表1，表2。

表1 UF－1000i全自動分析儀檢測RBC的攜帶污染率（%）

表2 UF－1000i全自動分析儀檢測WBC的攜帶污染率（%）

2.2 UF－1000i全自動分析儀檢測與人工鏡檢之間的相關(guān)性及倍數(shù)關(guān)系 以RBC、WBC UF－1000i全自動分析儀檢測值為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的鏡檢細(xì)胞數(shù)為橫坐標(biāo)，得出回歸方程為：Y＝10.3 X＋6.1，斜率為10.3，Y 軸上截距為6.1，即 UF－1000i全自動分析儀的檢測出的細(xì)胞數(shù)是離心鏡檢細(xì)胞數(shù)的10.3倍，其相關(guān)系數(shù)r＝0.849。見圖1。

圖1 UF－1000i全自動分析儀檢測與人工鏡檢之間的相關(guān)性

3 結(jié) 論

尿液有形成分檢查是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要方法之一，可分為顯微鏡檢查法和尿液有形成分分析儀法［5］。UF－1000i全自動分析儀利用流式細(xì)胞術(shù)、電阻抗、熒光染色以及雙檢測通道技術(shù)，采用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流標(biāo)本，通過對從各粒子產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號轉(zhuǎn)換成的光電信號進(jìn)行分析，對各種有形成分進(jìn)行識別，同時提供RBC、WBC、結(jié)晶等成分的定量檢測數(shù)據(jù)，快速篩選正常和異常的標(biāo)本。UF－1000i全自動分析儀可部分取代顯微鏡檢查的同時，也受其他因素的影響，如：（1）RBC僅細(xì)胞膜被染色，所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度弱，草酸鈣結(jié)晶、類酵母細(xì)胞及其他細(xì)菌、精子等染色后熒光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度與RBC類似，當(dāng)這些有型成分在尿中大量存在時，易被誤認(rèn)為尿RBC［6］；（2）只能對尿中完整細(xì)胞有形成分進(jìn)行檢測，對破損的細(xì)胞不能檢測，存在漏診的情況；（3）尿液中的上皮細(xì)胞會被誤認(rèn)為WBC。此時儀器所檢測出的RBC、WBC數(shù)并非真實(shí)值，直接報告會對臨床用藥或診斷造成一定的誤導(dǎo)，因此儀器得出的異常結(jié)果往往靠顯微鏡來驗(yàn)證、校準(zhǔn)和補(bǔ)充［7］。手工鏡檢依然是尿液分析的“金標(biāo)準(zhǔn)”［8］。

尿液有形成分分析儀單位為個／μL，屬于全定量方法；離心尿液直接涂片法單位為個／HP，屬于半定量方法。尿液有形成分定量對于任意一份標(biāo)本，所含RBC、WBC的實(shí)際數(shù)量都是固有的，不管用什么方法檢測，都應(yīng)該接近或等于這個固有值，而不應(yīng)有明顯的差別，使不同方法具有可比性［9］。尿液分析儀是定量的方法，離心尿液直接涂片法是半定量的方法，對于同一份尿液標(biāo)本而言，它們之間必然存在一定的內(nèi)在聯(lián)系。本研究對儀器測試RBC、WBC數(shù)的攜帶污染率進(jìn)行了驗(yàn)證，均符合本實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊的要求［10］。且UF－1000i全自動分析儀與離心后人工鏡檢的尿液有形成分?jǐn)?shù)值間的回歸方程為Y＝10.3 X＋6.1，斜率為10.3，Y 軸上截距為6.1，r＝0.849，即UF－1000i全自動分析儀檢測出的細(xì)胞數(shù)是離心鏡檢細(xì)胞數(shù)的10.3倍；當(dāng)鏡檢結(jié)果為0／HP時，UF－1000i全自動分析儀檢測結(jié)果應(yīng)在0.0～6.1／μL范圍內(nèi)。當(dāng)儀器有提示或干化學(xué)與尿液有形成分結(jié)果有出入時，需要標(biāo)本離心進(jìn)行人工鏡檢，得出的細(xì)胞數(shù)經(jīng)10.3的倍數(shù)關(guān)系進(jìn)行轉(zhuǎn)換，可以為臨床提供較為準(zhǔn)確的UF－1000i全自動分析儀尿有形成分結(jié)果，使臨床醫(yī)生對檢驗(yàn)結(jié)果有更直觀的了解。對于圖1出現(xiàn)的部分離散值，可能是因?yàn)殡x心因素影響了細(xì)胞數(shù)，這與其他報道一致［11］。不管哪一種方法，都必須依據(jù)各種檢驗(yàn)法的優(yōu)缺點(diǎn)來使用［12－13］，使之更好適應(yīng)檢驗(yàn)工作的需要。

綜上所述，有效地結(jié)合UF－1000i全自動分析儀與人工鏡檢尿液有型成分檢測，可提高檢測結(jié)果的有效性，對正確指導(dǎo)臨床治療有積極的作用。

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