抗病毒治療對HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群狀態的影響

劉小琴（重慶市墊江縣人民醫院感染科 408300）

近年來乙型肝炎病毒（HBV）感染成為全球一個較為嚴重的公共衛生問題，由于HBV免疫疫苗的廣泛使用及各種抗病毒藥物的臨床應用，導致HBV變異株的出現，HBV e抗原（HBeAg）陰性的慢性乙型肝炎（CHB）患者比例逐漸增多［1－2］。CHB的發病機制相對復雜，越來越多的研究證實，機體免疫功能紊亂，尤其是T淋巴細胞亞群功能失調與慢性肝病的發生、發展密切相關。HBV的發病與宿主免疫應答和調控紊亂有著十分密切的關系。各種免疫細胞特別是T淋巴細胞亞群之間的調節與病毒的清除、復制密切相關［3］。因此T淋巴細胞在HBV感染中對病毒的清除、控制以及疾病的轉歸都有重要的影響。本文針對HBeAg陰性CHB患者中T淋巴細胞的這一特點，深入研究其在CHB抗病毒治療中的作用。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取2012年1月至2013年1月本院門診就診或住院的HBeAg陰性的CHB患者70例為試驗組，其中男44例，女26例，平均年齡（44．1±10．1）歲。根據CHB防治指南（2010年版）診斷標準，所選患者診斷均符合HBeAg陰性HBV。將HBeAg陰性患者依據肝功能情況分為輕、中、重度三組。對照組為門診正常體檢健康者35例，其中男20例，女15例，平均年齡（43．5±11．4）歲。所有患者排除其他肝炎病毒的感染，未進行過抗病毒治療，無心腦血管疾病、糖尿病及其他代謝性疾病。試驗組與對照組的性別、年齡等一般情況比較，差異無統計學意義（P＞0．05），組間具有可比性。

1．2 方法 根據患者具體情況，予以拉米夫定0．1g／d進行治療，分別于治療12、24周后測定HBV－DNA，HBV標志物五項和肝功能。流式細胞分析儀分析、檢測外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD16＋、CD19＋、CD56＋T淋巴細胞；采用熒光定量PCR法檢測HBV病毒載量；丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）等肝臟功能檢測則由本院檢驗科完成，所有指標及操作均嚴格按照儀器操作規程和試劑盒說明書進行。

1．3 統計學處理 采用SPSS13．0統計軟件，對所獲取資料進行數據處理，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，以P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 兩組患者治療12周后外周血淋巴細胞各亞群的比較與對照組相比，HBeAg陰性患者除CD16＋、CD56＋細胞外，其他各指標差異有統計學意義（P＜0．05），見表1。

2．2 HBeAg陰性組患者經抗病毒治療24周后各項指標的變化情況 經拉米夫定治療24周后，患者HBeAg未有陽性轉變；患者的ALT、AST等指標明顯降低，且臨床癥狀亦有明顯好轉；與之相對應的CD4＋T淋巴細胞的表達明顯提高（P＜0．05），而CD8＋T淋巴細胞的表達略有降低趨勢，但差異無統計學意義（P＞0．05），CD4＋／CD8＋比例變化比較，差異有統計學意義（P＜0．05）。見表2。

表1 兩組患者治療12周后外周血淋巴細胞各亞群間的比較（x±s）

表2 HBeAg陰性組患者經拉米夫定治療24周后相應檢測指標的變化情況（x±s）

3 討 論

病毒性肝炎治療的關鍵是病毒的清除與否，通常以HBeAg、HBV－DNA作為 HBV 復制的標志［4］。CHB的發病機制一直困擾廣大醫務工作者及科學研究人員，宿主免疫調控紊亂在慢性肝損傷中起到的作用在國內外學者中達成廣泛共識［5－6］。CHB感染的外周血及肝組織內T淋巴細胞亞群組發生數量和質量上的改變，導致了細胞免疫功能損傷，感染慢性化。HBeAg陰性HBV患者為病毒變異株感染所致，由于HBeAg陰性患者HBV－DNA水平低于HBeAg陽性患者，所以在抗病毒治療的效果較HBeAg陽性患者好。因此，臨床對于HBeAg陰性HBV患者多采用抗病毒治療，其主要目的是為減慢或阻止乙型肝炎患者肝纖維化的進展［7－8］。深入了解HBeAg陰性CHB患者外周血T淋巴細胞亞群的變化情況，為臨床上HBV的治療提供更好的參考依據。

外周成熟的T淋巴細胞無論在表型上還是在功能上都是異質性群體，按其表型不同分為CD4＋T淋巴細胞和CD8＋T淋巴細胞。目前認為，幼稚CD4＋T淋巴細胞可以分化為Th1、Th2、Th17和調節性T淋巴細胞4個主要的功能成熟亞群，分別通過不同的轉錄途徑和特征性的細胞因子執行不同的生物學功能，同時各亞群之間并不是截然獨立的，而是相互制約且在一定條件下可以相互轉化［9－10］。CD4＋T淋巴細胞為輔助性T淋巴細胞，其主要功能為調節體液免疫和細胞免疫。CD8＋T淋巴細胞按其功能分為抑制性T淋巴細胞（Ts）和殺傷性T淋巴細胞（Tc）。Tc細胞與抗病毒免疫、抗腫瘤免疫和移植排斥反應有關。本研究結果顯示HBeAg陰性患者的外周血CD4＋T淋巴細胞與對照組比較差異有統計學意義（P＜0．05），經拉米夫定抗病毒治療后表達比例均有明顯升高，且與治療前比較差異亦有統計學意義（P＜0．05）。以上結果說明，在HBeAg陰性的CHB患者發病和疾病轉歸過程中均有CD4＋T淋巴細胞的參與。由此可推測CD4＋T淋巴細胞的低表達或許與降低殺傷性T淋巴細胞和其他免疫細胞增殖及分化的能力有關，從而引起HBV－DNA的不斷復制，引起疾病的慢性化發展和病原體的清除。

HBeAg陰性CHB患者中CD8＋T淋巴細胞的表達相對較高，較對照組差異有統計學意義（P＜0．05）。患者經過拉米夫定抗病毒治療24周后，肝功能檢查等乙肝相應檢測指標和臨床癥狀均得到明顯改善。本研究結果說明，CD8＋T淋巴細胞或許參與了HBV的清除，同時在治療過程中，拉米夫定起到了一定的協同作用，增強了患者CD8＋T淋巴細胞的清除作用，從而使HBV－DNA的復制控制在低載量狀態中。有報道顯示，T淋巴細胞亞群的改善在抗病毒治療6個月時，隨著抗病毒時間的延長，對于T淋巴細胞的改善會更加顯著［11］。核苷酸類似物更能顯著抑制HBV的復制，從而改善患者的細胞免疫功能［12］。治療24周后，CD4＋／CD8＋的比值升高，顯示抗病毒治療24周對T淋巴細胞亞群影響較為明顯，淋巴細胞亞群功能逐漸恢復。

綜上所述，抗病毒治療CHB方案目前已成為治療的首選，但其作用機制尚待研究明確。應用拉米夫定抗病毒治療HBeAg陰性患者后，其肝功能明顯改善，抑制了病毒的復制，同時有研究發現抗病毒藥物治療時，機體對HBV的特異性免疫功能會顯著增強，使患者的免疫功能恢復，有利于病毒的清除。本研究結果提示T淋巴細胞在HBeAg陰性的CHB的發病及轉歸中均起到非常重要的作用，能夠提高患者機體免疫力，因此抗病毒治療對HBeAg陰性患者外周血T淋巴細胞亞群的調節起到了重要的作用。

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