幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測的臨床應用評價

張 兵，郭運芬，劉孟涓

（1.南充市中心醫院檢驗科·川北醫學院第二臨床醫學院，四川 南充 637000；2.重慶醫科大學醫學檢驗系，重慶 400016）

幽門螺桿菌（helicobacter－pylori，Hp）是一種生活于人體胃和十二指腸的螺旋狀格蘭氏陰性桿菌，是慢性活動性胃炎的主要致病因子。我國幽門螺桿菌（Hp）感染率為40%～90%，平均為59%［1］。95%的十二指腸球部潰瘍患者伴Hp感染，而復發性十二指腸潰瘍患者幾乎100%與Hp感染有關。還有證據表明，Hp與胃潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤和胃癌的發生有密切關系［2］，幽門螺桿菌可能是IgA腎病的重要致病抗原［3］。目前確診HP病原體的方法主要有13C和14C呼吸試驗，由于操作繁瑣、耗時和具有一定的放射性，不適合做大規模的篩查。本文以14C－呼氣試驗作為HP診斷的金標準，評價幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）在檢測HP感染臨床應用價值。

1 材料和方法

1.1 對象 隨機選取臨床上有反復腹痛或伴有惡心、嘔吐等上消化道癥狀，4周內未經治療或已停服抗生素、鉍劑、H2受體拮抗劑和質子泵抑制劑等對Hp檢測有影響的藥物的門診、住院患者50例，均為2011年1～3月在本院接受檢查者，其中男性29例，年齡17～72歲，平均年齡46歲；女性21例，年齡19～68歲，平均年齡49歲。

1.2 儀器和試劑 幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法），由北京康美天鴻生物科技有限公司生產，批號： 010664。有關產品在應用前按相關說明書要求保存備用。

1.3 方法

1.3.114C－尿素呼氣試驗 患者空腹收集本底氣體，隨即飲服溶于100ml冷開水中的100mg14C－尿素，每10min收集一次呼氣標本，連續收集3小時。收集的氣體標本用質譜儀分析，計算14CO2含量。有Hp感染者在口服試液后20min即出現14CO2升高，在100min內持續升高，而無Hp感染者無14CO2呼出。

1.3.2 幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試驗 采集患者靜脈血，常規分離血清。血清標本應為無脂血、無黃疸和溶血。收集的血清貯存－20℃冰柜中冷凍備用。操作步驟：①測試前將待測樣本恢復至室溫（20℃～30℃）。②取出測試板置于干凈的水平臺上。③在測試板樣品孔中加入100ul（約4滴）待測血漿，室溫靜置10～15分鐘左右觀察結果，超過20分鐘結果無效。④結果判讀標準：陽性（＋）：兩條紅色線出現。一條是質控線（C），一條是測試線（T）。陰性（－）：僅質控線（C）出現一條紅色條帶，測試線（T）未出現。無效：質控線（C）未出現紅色條帶。

1.4 統計學方法 應用SPSS 11.5軟件將兩種方法陽性和陰性例數做配對χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

50例患者接受以14C－呼氣試驗和尿素酶抗體檢測試驗的陽性例數和陰性例數見表1。該試劑盒檢測Hp感染的靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，假陽性率為8.33%，假陰性率為15.38% ，約登指數為76.29%，觀察一致率為88%，機遇一致率為49.92%，kappa值為0.76，總符合率為88%。經配對四格表資料的χ2檢驗，該試劑盒（膠體金法）與14C－呼氣試驗相比較，差異無統計學意義（χ2＝0.67，P＞0.05），尚不能認為兩種方法檢測結果的陽性率不同。

表1 50例患者14C－呼氣試驗和尿素酶抗體檢測試驗結果比較（n）Table 1 Results of 14C－breath test and anti－urease antibody from 50patients

3 討論

Hp感染與上消化道疾病之間的關系越來越受到醫學界的重視。1994年世界衛生組織下屬的國際癌癥研究機構（IARC）已將其列為人類胃癌的Ⅰ類致癌物［4］。1997年Tomb等在世界上首次完成了Hp基因組的全序列測定分析工作，推動了Hp的基因功能、基因變異與疾病關系的研究，同時也為Hp感染相關疾病的研究奠定了堅實的基礎［5］。現已證實，幽門螺桿菌是慢性胃炎、消化性潰瘍的重要致病因子，亦與胃腺癌和淋巴瘤的發生有關系［6～8］。最近觀察到它也和缺鐵性貧血、身材矮小、慢性蕁麻疹等有關。許多感染是在青春期或兒童期獲得的，因而早期的正確診斷至關重要［9］。Hp在人群中的感染率與患者所居住國家或地區的社會經濟發達程度有關。如發達國家10歲內感染率僅有3.5%，而在發展中國家10歲即有一半或一半以上的人感染Hp。我國人群Hp感染率接近世界平均水平。國內不同地區Hp感染率從42%～84%不等，平均感染率為54.8%［10］。幽門螺桿菌是一種定植于胃粘膜并可引起胃十二指腸疾病的革蘭氏陰性細菌，自1983年通過胃鏡取活檢標本分離培養成功以來，對Hp感染的診斷已發展出了許多方法，包括有細菌學、病理學、血清學、同位素示蹤、分子生物學等方面。但總的講來，從標本采集的角度看，可以分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性方法主要指必需通過胃鏡取活檢標本檢查的方法，是目前消化病學科的常規方法。它包括細菌的分離培養和直接涂片、快速尿素酶試驗，藥敏試驗等。非侵入性方法主要指不通過胃鏡取活檢標本診斷幽門螺桿菌標本感染的方法。這類方法包括抗體檢測、抗原檢測、13C／14C－尿素呼氣試驗等。后者因具有無創、簡便、快速、可靠等特點，正逐漸被臨床采用。

與14C－尿素尿素呼氣試驗相比，幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）實驗表該試劑盒檢測Hp感染的靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，總符合率為88%，13C／14C－尿素尿素呼氣試驗為目前幽門螺桿菌現癥感染診斷的金標準之一，但需排除藥物影響因素，操作繁瑣。不適合做大規模的篩查，且13C／14C具有一定的放射性，不適于孕婦及兒童。幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）采用雙抗原夾心法免疫測定原理，結合膠體金免疫層析法即時檢驗技術，靈敏度高，特異性強。可同時檢查樣本中Hp尿素酶IgG、IgM、IgA抗體。操作更為簡便，無需專用儀器和設備。血清學檢查為微創傷檢查，且價格低廉，易于為大眾接受。我們的實驗表明：幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒檢測Hp，靈敏度為84.62%，特異度為91.67%，假陽性率為8.33%，假陰性率為15.38%，與14C－尿素尿素呼氣試驗相比，差異無統計學意義（χ2＝0.67，P＞0.05）。

4 結論

幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）是一種靈敏度和特異性都較高的幽門螺桿菌感染血清學抗體快速檢測法，可用于健康體檢、社區門診或醫院床旁檢驗等。

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