北京市房山區種植黃芩黃芩苷含量測定

北京市房山區藥品檢驗所（0200）吳艷蘋 劉德江 李靈

北京市房山區食品藥品監督管理局（102488）王明貴2

黃芩為唇形科植物黃芩的干燥根。具有清熱燥濕，瀉火解毒，止血，安胎功效。用于濕溫、暑溫，胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動不安。因野生資源不足，近年各地多有栽培。我區西部山區于2009年開始種植黃芩，但當地群眾只于6～8月采集嫩葉做黃芩茶，而一直未采收其根，致資源嚴重流失。黃芩苷是黃芩的主要有效成分之一[1]，我所檢驗員依據《中國藥典》，采用HPLC法測定了我區種植黃芩的黃芩苷含量，以供參考。

附表1 線性關系考察的測量結果

附表2 加樣回收試驗的測定結果

1 儀器與試藥

儀器：島津LC-20AT高效液相色譜儀、賽多利斯-CP225D電子天平、回流裝置、電熱恒溫水浴鍋、干燥箱等。試藥：甲醇（上海賽默飛世爾）為色譜純，水為上海康雷-HF Super NW超純水，乙醇、磷酸為分析純，黃芩苷對照品購于中國藥品生物制品檢定所，批號為110715-200815。藥材：黃芩采自房山區南窖鄉，3年生。

2 實驗方法與結果

2.1 色譜條件 Waters C18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流動相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；檢測波長280nm；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；理論塔板數按黃芩苷峰計算大于2500。

2.2 對照品溶液制備 精密稱定黃芩苷對照品12.44mg，加甲醇定容至200ml容量瓶中，即得。

2.3 供試品溶液制備 取藥材粉末約0.3g，精密稱定。至錐形瓶中，加入70%乙醇40ml，95℃回流3h，放冷，濾過，濾液至100ml容量瓶，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾至同一量瓶中，用70%乙醇定容，搖勻。精密量取1ml，至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得。

2.4 線性關系的考察 對照品溶液，分別設定進樣量為3μl、6μl、9μl、12μl、15μl，測定峰面積，每個進樣量測定3次。以黃芩苷對照品的進樣量（μg）為橫坐標X，峰面積積分值Y為縱坐標進行回歸，得回歸方程Y＝3377.3X+0.8，R2＝1，線性范圍0.1866μg～0.933μg，見附表1。

2.5 穩定性試驗 取1供試品溶液，分別在配制后0h、1h、2h、3h、6h、9h、12h、24h測定，平均峰面積依次為1554、1571、1553、1570、1557、1550、1582，RSD為0.722%，表明樣品溶液在24h內穩定性良好。

2.6 精密度試驗 取1供試品溶液，連續進樣5次，記錄峰面積依次為1558、1582、1570、1564、1559，RSD為0.643%，理論塔板數為3921。

2.7 加樣回收試驗

2.7.1 對照品溶液 精密稱定黃芩苷對照品8.04mg，置100ml容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，精密吸取15ml，置20ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得。

2.7.2 供試品溶液 精密稱定黃芩藥材粉末0.1879g，按2.3制備。

2.7.3 加樣 取與2.7.2同一黃芩藥材粉末約0.1g精密稱定3份，每份加入適量黃芩苷對照品，按2.3制備，每份測定3次，數據結果見附表2。

2.8 含量測定 供試品溶液5份，與對照品溶液進樣量均為10μl，以外標面積法計算，含量依次為16.0%，15.6%，16.4%，16.0%，16.2%，RSD為1.85%。

3 討論

黃芩苷是黃芩的主要有效成分，我區種植黃芩黃芩苷含量達16.0%，高于藥典規定。因此將與道地藥材黃芩進行比較，為開發其藥用價值提供科學依據。