五行音樂配合針刺干預抑郁模型SD大鼠行為學影響的研究

北京中醫藥大學（100029）景泉凱 蘇靖 陳天帷 王斐 梁田

抑郁癥是情感性精神障礙的主要類型，是一種以顯著而持久的心境低落、思維遲鈍、語言行動減少為主要特征的綜合征。抑郁癥是危害人類身心健康的常見病、多發病，是一個全球性的主要精神問題[1]，但流行病學資料顯示，其具有知曉率低、治療率低等特點。

隨著現代醫學逐步向生物—心理—社會醫學模式轉變，在天人相應、整體觀念指導下的中醫療法的治療優勢正越來越多的得到重視。抑郁癥是一種典型的生物、心理、社會等多種因素作用而致的疾病，因此單一作用、靶點明確的藥物治療不可避免的具有某些局限性。本實驗觀察了在多靶點作用下的中醫五行音樂療法結合針刺治療對大鼠抑郁模型的行為學影響。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 成年雄性SD大鼠，重170～200g，由北京中醫藥大學動物實驗中心提供，清潔級，40只。置于安靜、7：00～19：00光照、19：00～7：00黑暗的實驗室中馴養1周，使其適應環境后再進行實驗。

1.2 分組 隨機分組，分別為空白對照組、抑郁模型組、針刺組、音樂組、針刺結合音樂組共5組，每組8只。

1.3 模型制備 抑郁模型的建立：建立慢性輕度不可預見性應激抑郁模型。行為限制2h、4℃冰水游泳5min，禁食24h，禁水24h，夾尾1min，明暗顛倒24h，鼠籠傾斜45°24h，潮濕墊料10h，空瓶放置1h及45℃高溫5min等。將上述10種刺激隨機安排到21天內，每日1種刺激，每種刺激平均出現2次。同種刺激不連續出現，以使動物不能預料刺激的發生。

1.4 操作方法 抑郁模型組停止刺激也不治療。其他各組進行五行音樂配合針刺干預。針刺組每日針刺治療1次；音樂組每日聽宮調式音樂“春之聲圓舞曲”、“藍色多瑙河”、“江南絲竹樂”各一遍；針刺結合音樂組，每日針刺與音樂治療一次。音樂治療時，保證與其他組小鼠隔音的條件下進行。治療階段共21天。

1.5 穴位選取與針刺方法 參照全國針灸學會實驗針灸研究會制定的《實驗動物針灸穴位圖譜》取穴。針刺取百會、神庭、內關、三陰交。穴位常規消毒，選用1寸32號無菌一次性針灸針。百會向尾部斜刺，神庭向尾部斜刺，進針深度約為2mm，內關直刺1mm，三陰交直刺5mm，每穴行均勻捻轉刺激30s，留針10min。

1.6 主要儀器 自制敞箱：本實驗所用敞箱為立方形，高40cm，長寬均為80cm，周壁底面為黑色，底面分成面積相等的25塊，由白線劃分：曠場實驗攝像記錄設備；自制大鼠針刺固定板。

1.7 觀察指標及檢測方法

1.7.1 觀察各組大鼠一般狀態 每只動物于造模前5h（時間A）、造模階段結束后5h（時間B）和治療階段結束后后5h（時間C）分別稱量體重，記錄進食，精神狀況及進行行為測定。

1.7.2 open-field法測定行為 室內隔音，記錄動物行為，以動物穿越底面塊數為水平運動得分，每塊計1分；大鼠后腿直立次數，無論動物站立多長時間直至動物雙足放下為1次活動，每次計1分，為垂直運動得分。每只動物測定3次，每次測定3min。分別在時間A、時間B、時間C測定。

附表1 各組大鼠造模及治療前后比較（ ，單位：格，n=8/group）

附表1 各組大鼠造模及治療前后比較（ ，單位：格，n=8/group）

注：與空白組比較★P＜0.05，★★P＜0.01；與抑郁組比較▲＜0.05，▲▲P＜0.01；與同組造模后比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

項目 組別 時間A 時間B 時間C爬行格數空白對照組 48.4±6.34 43.5±3.23 47.7±5.76抑郁模型組 49.2±7.51 15.1±4.82★★◆◆ 17.25±3.96★◆◆音樂治療組 48.0±11.12 13.7±2.64★★◆◆ 26.1±8.87★◆◆針灸治療組 50.8±8.22 13.7±2.62★★◆◆ 31.3±9.98▲◆◆音樂針灸治療組 50.6±8.43 14.2±2.05★★◆◆ 50.3±13.1▲▲◆◆直立次數空白對照組 13.7±2.2 11.4±1.74 12.3±2.11抑郁模型組 12.1±3.03 3.0±1.85★★◆◆ 5.2±2.96★◆音樂治療組 11.3±3.1 2.6±1.43★★◆◆ 6.4±3.01★◆◆針灸治療組 14.3±2.6 2.8±1.81★★◆◆ 9.1±2.51▲◆◆音樂針灸治療組 13.3±2.11 2.9±1.91★★◆◆ 13.4±3.14▲▲◆◆

附表2 各組大鼠24h糖水消耗量比較（ ，單位：ml，n=8/group）

附表2 各組大鼠24h糖水消耗量比較（ ，單位：ml，n=8/group）

注：與空白對照組比較★P＜0.05，★★P＜0.01；與抑郁組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與同組造模后比較◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

組別 時間A 時間B 時間C空白對照組 43.25±6.22 42.56±7.48 46.57±5.43抑郁模型組 45.70±5.67 13.13±3.46★★◆◆ 13.66±1.91★★◆◆音樂治療組 50.08±11.17 14.10±3.89★★◆◆ 24.30±3.05◆針灸治療組 49.21±9.23 11.12±1.27★★◆◆ 32.90±3.79▲◆音樂針灸治療組 41.45±10.76 13.96±2.89★★◆◆ 45.41±3.34▲▲◆◆

1.7.3 糖水消耗實驗 所有動物均單籠飼養，每只動物提供1%蔗糖溶液130ml，同時所有動物禁食，計算動物24h飲用1%蔗糖溶液的量。分別在造模前、造模后和治療后測定大鼠糖水消耗量。

1.8 統計學處理 數據用SPSS20.0軟件統計包處理，以均數加減標準差表示，組間差異采用單因素方差分析，P＜0.05為顯著性差異的標準。

2 結果

2.1 open-field實驗分析（見附表1）

2.1.1 造模前組間行為學差異比較 A時間點時，造模前大鼠曠場實驗得出的數據顯示各組爬行格數、直立次數均無明顯差異，說明各組間大鼠活動性及探究性行為表現均衡穩定，來自同一整體，具有可比性。

2.1.2 同組造模前/造模后行為學差異比較 B時間點時，通過造模可見音樂治療組、針刺治療組、針刺結合音樂治療組小鼠與空白對照組相比均出現了顯著的水平運動與垂直運動下降，有統計學意義（P＜0.01），說明造模成功。

2.1.3 治療后組間行為學差異比較 C時間點時，音樂治療組水平運動與垂直運動水平與抑郁組相比差異不明顯，無統計學意義（P＞0.05）。針刺組水平運動與垂直運動水平與抑郁組相比均有升高，無統計學意義（P＜0.05）。針刺結合音樂組在水平運動與垂直運動各水平上均與抑郁組存在明顯差異，有統計學意義（P＜0.01）。

2.1.4 同組造模后/治療后行為學比較 C時間點時，空白對照組情況一直穩定，抑郁組水平運動與垂直運動水平均與造模后差異不大，音樂組水平運動與垂直運動水平均較造模后上升（P＜0.05），數值高于抑郁組。針刺治療組水平運動與垂直運動水平均較造模后上升，差異有統計學意義（P＜0.01）。針刺結合治療組水平運動與垂直運動水平均較造模后有顯著回升，差異有統計學意義（P＜0.01）。

2.2 大鼠糖水消耗實驗分析（見附表2）

2.2.1 造模前各組間差異比較 A時間點，造模前各組大鼠24h糖水消耗量無明顯差異，說明來自同一整體，存在可比性。

2.2.2 造模后/造模前大鼠24h糖水消耗比較 B時間點，造模后各組大鼠與空白組大鼠比較糖水消耗量明顯下降（P＜0.01），有統計學差異，說明造模成功。

2.2.3 治療后組間行為學差異 音樂治療組糖水消耗量與抑郁組相比有所上升，但差異不明顯。針刺組糖水消耗量與抑郁組相比上升明顯，差異有統計學意義（P＜0.05）。針刺結合音樂組糖水消耗量與抑郁組相比上升明顯，差異有統計學意義（P＜0.01）。

2.2.4 同組治療后/造模后差異比較 C時間點，空白組實驗全程糖水消耗量穩定。抑郁組糖水消耗量較造模后無明顯差異（P＞0.05），音樂治療組與造模后相比，糖水消耗上升，差異有統計學意義（P＜0.05），針刺治療組糖水消耗量較造模后上升明顯，差異有統計學意義（P＜0.01），針刺結合音樂治療組糖水消耗量較造模后上升，差異有統計學意義（P＜0.01）。

3 討論

抑郁行為是由不可控制的負性事件所產生的。目前，抑郁動物模型的建立方法主要分為三類：行為絕望、習得性無助和慢性溫和的不可預知性應激[2]。慢性溫和應激的抑郁動物模型主要是將動物長時間的暴露在多種不可預知的應激源下，由此引起動物對獎勵刺激的缺乏（主要是對可口的甜味溶液的消耗量降低，通常用糖精水）是抑郁的重要表現。慢性溫和應激更真實的模擬了人們在現實生活中遭遇的“困難”，動物對甜溶液的飲用量降低反映了抑郁的核心癥狀，即快感缺乏，可認為此應激模型是一種有效的抑郁動物模型。

造模采用慢性應激方法，造成動物的抑郁狀態，建立慢性輕度不可預見性應激抑郁模型。實驗觀察到，在造模過程中，模型大鼠處于明顯的抑郁狀態，可見精神萎靡、毛色晦滯、各種活動減少，在規定的時間內水平活動和垂直活動次數明顯減少，糖水消耗量降低。

在造模結束（造模21d）時，各組大鼠的行為學表現，規定時間內的水平運動和垂直運動得分明顯降低，體重增加減輕，糖水消耗量降低。與造模前相比，差異有非常顯著性意義（P＜0.01），標志模型復制成功。各治療組大鼠的體重、水平運動和垂直運動、糖水消耗與對照組大鼠間的差異無顯著性意義（P＞0.05），符合實驗進入治療階段的分組要求。

研究表明，特定的針對個體需求的針對性音樂療法可達到較好的治療效果[3]。五行音樂療法恰恰具備這樣的特點。五聲音階與臟腑相應是中國傳統音樂療法理論的核心思想。《黃帝內經》中把五聲音階（宮、商、角、徵、羽）與人體的五臟（脾、肺、肝、心、腎）和五志（思、憂、怒、喜、恐）運用陰陽五行學說有機地結合起來。用現代科學的語言來描述，就是說五臟均具有一定的振動頻率，而且這些頻率相應于五聲音階的頻率[4]。 抑郁多與壓抑、挫折有關，在五行中應屬“土”[5]。宮調式樂曲悠揚沉靜，能抒發情感，可使其從抑郁中解脫。

針刺治療抑郁癥存在一定優勢。相關研究表明，針刺穴位選取百會、神庭與四肢部腧穴內關、三陰交結合，在改善抑郁癥行為學方面存在一定優勢，尤其是在治療的早中期[6]。實驗結果表明，針刺組、音樂組、針刺結合音樂組在治療后抑郁狀態均有改善。針刺結合音樂組治療后基本恢復到造模前的狀態，抑郁狀態改善明顯。曠場實驗治療后針刺結合音樂治療組水平運動與垂直運動水平均較造模后有顯著回升，差異有統計學意義（P＜0.01）且數值高于針刺組。針刺組、音樂組治療后與造模后存在差異（P＜0.05）。表明音樂、針刺均對小鼠抑郁有療效，且針刺音樂雙靶點刺激療效優于針刺或音樂單靶點刺激療效。針刺結合音樂治療組糖水消耗量較造模后上升，差異有統計學意義（P＜0.01）。表明治療對抑郁的核心癥狀改善有良好的效果。

本研究結果顯示，五行音樂配合針刺對早期抑郁癥的治療有顯著效果，明顯優于單一的針刺治療，有良好的應用前景。