分析基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值游泳

杜瑩瑩等

[摘要] 目的 分析聯(lián)合檢測基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子聯(lián)預(yù)測宮頸癌復(fù)發(fā)的價(jià)值。方法 選取宮頸癌首次術(shù)后的標(biāo)本118份，分為復(fù)發(fā)組48例和未復(fù)發(fā)組70例。采用SABC法行免疫組化檢測標(biāo)本MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2因子陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度。同時(shí)，選取同期正常宮頸組織標(biāo)本30例為對(duì)照組。比較各組相關(guān)因子表達(dá)情況差異。結(jié)果 復(fù)發(fā)組中MMP-2和MMP-9的陽性率（81.3%和79.2%）和表達(dá)強(qiáng)度（99.86±23.67和97.53±23.14）顯著高于未復(fù)發(fā)組（48.6%和51.4%，69.75±15.86和72.16±16.01）和對(duì)照組（10.0%和6.7%，28.12±9.48和33.97±11.14），TIMP-1和TIMP-2的陽性率（39.6%和43.8%）和表達(dá)強(qiáng)度（60.48±14.03和62.75±14.63）顯著低于為未復(fù)發(fā)組（68.6%和71.4%，84.93±19.86和88.86±20.15）和對(duì)照組（90.0%和93.3%，105.62±24.24和108.74±24.87） （P<0.05）。未復(fù)發(fā)組中MMP-2和MMP-9的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組，TIMP-1和TIMP-2的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)論 MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2聯(lián)合檢測可作為評(píng)估宮頸癌復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 宮頸癌；基質(zhì)金屬蛋白酶；復(fù)發(fā)；基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物

[中圖分類號(hào)] R737 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）07（c）-0021-03

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤之一。目前，以手術(shù)、放療和化療為主的多種手段用于宮頸癌的額治療和預(yù)防其復(fù)發(fā)，但其復(fù)發(fā)率仍較高[1]。目前，如何有效預(yù)測宮頸癌復(fù)發(fā)為女性惡性腫瘤研究丞待解決的課題。基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase， MMPs）是一種蛋白水解酶，其主要作用為降解細(xì)胞外基質(zhì)，在腫瘤的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，其抑制物（tissu inhibitor of matrix metalloproteinase， TIMPs）與MMPs結(jié)合，特異性抑制MMPs活性[2]。目前，已有文獻(xiàn)對(duì)MMPs/TIMPs在宮頸癌中的表達(dá)情況進(jìn)行報(bào)道[3]，但有關(guān)MMPs和TIMPs聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值的研究較少。該研究選取2005年3月—2011年2月間該院收治的宮頸癌患者118例，分析了復(fù)發(fā)宮頸癌患者M(jìn)MP-2、MMP-9及其抑制劑TIMP-2、TIMP-1表達(dá)情況，旨在探討MMPs和TIMPs聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院診治的宮頸癌患者首次術(shù)后病理標(biāo)本118份。根據(jù)術(shù)后隨訪情況（3年內(nèi)疾病是否復(fù)發(fā)），將患者分為復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組。復(fù)發(fā)組48例：年齡35～75（61.5±6.06）歲；腫瘤大小0.5～7.6（3.4±1.4）cm；組織學(xué)分級(jí)：G1 7例、G2 13例、G3 28例；FIGO標(biāo)準(zhǔn)分期：Ⅰ期13例、Ⅱ期35例；組織學(xué)類型：鱗癌41例、腺癌7例。未復(fù)發(fā)組70例：年齡33～74（60.2±6.13）歲；腫瘤大小0.5～6.9（3.2±1.3）cm；組織學(xué)分級(jí)：G1 12例、G2 20例、G3 38例；FIGO標(biāo)準(zhǔn)分期：Ⅰ期21例、Ⅱ期49例；組織學(xué)類型：鱗癌57例、腺癌13例。同時(shí)，選取正常宮頸組織標(biāo)本30例為對(duì)照組，年齡32～65（53.5±5.1）歲。所有患者術(shù)前均未接受過化療、免疫、冷凍、放療和激光等治療，所有標(biāo)本均經(jīng)病理學(xué)確診。復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組患者在年齡、腫瘤大小、分期、分級(jí)和組織類型方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑 即用型鼠抗人TIMP-2和TIMP-1多克隆抗體（武漢博士德生物工程有限公司）；HIGH-SABC試劑盒；即用型鼠抗人MMP-2和MMP-9免疫組化試劑盒；DAB顯色試劑盒。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 各組患者組織標(biāo)本均采用SABC法進(jìn)行免疫組化檢測，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。取兩組患者病變組織標(biāo)本1份；對(duì)照組任取宮頸組織1份。經(jīng)甲醛固定、脫水、石蠟包埋處理。厚度4 μm連續(xù)定向切片，處理后用于免疫組化染色和HE染色。主要步驟[4]：①脫蠟、水化、PBS洗滌；②蒸餾水洗滌、抗原修復(fù)、PBS洗滌；③滴加山羊血清，室溫20 min；④滴加Ⅰ抗，室溫60 min，PBS洗滌；⑤滴加Ⅱ抗，25 ℃ 20 min，PBS洗滌；⑥滴加SABC試劑，25 ℃ 20 min，PBS洗滌；⑦DAB顯色，蒸餾水洗滌；⑧脫水、透明、封片。用已知的免疫組化染色陽性的宮頸切片作陽性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖鹽液代替一抗作陰性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果判定 由兩位醫(yī)師觀察切片后共同判斷；陽性表達(dá)：以細(xì)胞膜或細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒沉著為陽性。采用上海山富科學(xué)儀器有限公司提供的Biosens Digital Imaging System v1.6自動(dòng)分析系統(tǒng)，測量切片腫瘤細(xì)胞陽性成分的平均吸光度代表其表達(dá)強(qiáng)度。

1.2.4 參數(shù)記錄和比較 記錄每份組織免疫組化檢測結(jié)果，統(tǒng)計(jì)各個(gè)因子（MMP-2、MMP-9、TIMP-2和TIMP-1） 陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度。比較各組相關(guān)因子表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 13.0軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組MMP-2和MMP-9的表達(dá)情況

與未復(fù)發(fā)組和對(duì)照組相比，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著增高（P<0.05）；與對(duì)照組相比，未復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著增高（P<0.05）。見表1、表2。endprint

2.2 各組TIMP-2和TIMP-1的表達(dá)情況

與未復(fù)發(fā)組和對(duì)照組相比，復(fù)發(fā)組中TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）；與對(duì)照組相比，未復(fù)發(fā)組TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）。見表1、表2。

3 討論

宮頸癌是女性惡性腫瘤死亡的主要原因之一，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后較差。改善惡性腫瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵為早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)采取有效治療[5]；如何有效預(yù)測宮頸癌的復(fù)發(fā)對(duì)判斷預(yù)后具有重要的意義。目前，可有效預(yù)測宮頸癌復(fù)發(fā)的生物學(xué)指標(biāo)仍在探索之中。

MMPs是一種可降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的蛋白水解酶，其在誘導(dǎo)腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。MMP-2和MMP-9是MMPs家族成員中降解作用較強(qiáng)的兩種亞型。Huang等[6]報(bào)道稱，卵巢上皮細(xì)胞癌組織中的MMP-2和MMP-9蛋白的高表達(dá)與癌細(xì)胞的侵襲能力呈正相關(guān)。李嬋玉等[7]研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者M(jìn)MP-9陽性表達(dá)率顯著高于宮頸慢性炎癥患者，其認(rèn)為MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率（81.3%和79.2%）和表達(dá)強(qiáng)度[（99.86±23.67）和（97.53±23.14）]、未復(fù)發(fā)組MMP-2和MMP-9的陽性率（48.6%和51.4%）和表達(dá)強(qiáng)度（69.75±15.86和72.16±16.01）顯著高于對(duì)照組（10.0%和6.7%，28.12±9.48和33.97±11.14），與上述研究相似，提示MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫曉彤等[8]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)子宮頸癌患者M(jìn)MP-9蛋白陽性率顯著高于未復(fù)發(fā)患者，其認(rèn)為檢測MMP-9蛋白可能有利于預(yù)測宮頸癌患者術(shù)后的復(fù)發(fā)，但其并未對(duì)MMPs家族的其它亞型進(jìn)行檢測。本研究證實(shí)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能參與宮頸癌的復(fù)發(fā)。其原因可能為：MMPs降解細(xì)胞外基質(zhì)、破壞基底膜屏障及局部的組織結(jié)構(gòu)，使腫瘤細(xì)胞浸潤周圍組織，發(fā)生淋巴等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，為腫瘤復(fù)發(fā)提供可能；同時(shí)MMPs具有促進(jìn)新生血管形成的作用，為腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)提供條件。

TIMPs是體內(nèi)MMPs的天然抑制物，與MMPs特異性結(jié)合抑制其活性，二者共同參與機(jī)體多種生理病理變化。黃靜儀等[9]報(bào)道稱，TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切有關(guān)。李芳等[10]研究顯示，TIMP-1和TIMP-2在宮頸鱗癌中的表達(dá)明顯低于慢性宮頸炎。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（39.6%和43.8%）和表達(dá)強(qiáng)度[（60.48±14.03）和（62.75±14.63）]、未復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（68.6%和71.4%）和表達(dá)強(qiáng)度[（84.93±19.86）和（88.86±20.15）]顯著低于對(duì)照組（90.0%和93.3%，[（105.62±24.24）和（108.74±24.87）]，提示TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫其愷等[11]報(bào)道稱，TIMP-2在肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過程中起重要作用，其可作為肝癌術(shù)后預(yù)后預(yù)測的指標(biāo)。而彭挺生等[12]報(bào)道稱，骨肉瘤術(shù)后是否復(fù)發(fā)與TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況無關(guān)。TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況與腫瘤復(fù)發(fā)關(guān)系目前仍有爭議，而有關(guān)TIMP-1和TIMP-2表達(dá)情況與宮頸癌復(fù)發(fā)關(guān)系鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究對(duì)此進(jìn)行了初步的分析，發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著低于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的復(fù)發(fā)有關(guān)。其原因可能為：TIMPs在組織中表達(dá)降低，其對(duì)MMPs的抑制作用減弱，MMPs對(duì)ECM的降解作用得到增加，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，為腫瘤的復(fù)發(fā)提供可能。

綜上，MMP-2、MMP-9及其抑制劑TIMP-2、TIMP-1表達(dá)情況可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，其可作為評(píng)估宮頸癌復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。有關(guān)MMPs和TIMPs在宮頸癌復(fù)發(fā)中的作用及其機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 杜文升.Annexin A2、MMP-9在宮頸浸潤癌組織中的表達(dá)及意義[J].南通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，31（4）： 270-275.

[2] 付曉瑞， 張辰， 陳長英，等.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中華腫瘤雜志，2012，34（5）：369-373.

[3] Roomi MW，Kalinovsky T，Rath M， et al. Modulation of u-PA，MMPs and their inhibitors by a novel nutrient mixture in human female cancer cell lines[J].Oncol Rep，2012，28（3）：768-776.

[4] Feng YH，Wu LS，Su J， et al.Expression and significance of MMP-26， TIMP-4 and MMP-9 in diffuse large B-cell lymphoma cells[J].Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi， 2013，21（5）：1167-1172.

[5] Hou T，Liang D，Yang D， et al. High expression of CRAM correlates with poor prognosis in patients with cervical carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol， 2014， 7（3）： 1060-1068.

[6] Huang LW， Garsett AP， Bell DA， et a1. Differential expression of matrix metallopmteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-l protein and mRNA in epithelial ovarian tumors[J].Gynecol Onon， 2000，77（16）： 369-376.

[7] 李嬋玉，李力.MMP-9及其相關(guān)因子與宮頸癌[J].重慶醫(yī)學(xué)， 2012，41（33）：3545-3547.

[8] 孫曉彤，楊毓琴，李耘，等. Shrew-1與MMP-9蛋白的表達(dá)及其聯(lián)合檢測對(duì)早期子宮頸鱗癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（5）：379-381.

[9] 黃靜儀，劉林嵋，張建文.MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及其意義[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2011， 20（12）：1912-1915.

[10] 李芳， 張淑蘭， 邱榮蘭. MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在宮頸鱗癌中的表達(dá)及其意義[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志， 2006，11（6）：450-456.

[11] 孫其愷，王偉，呂陽，等.ECM-1和TIMP-2在肝細(xì)胞癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 肝膽外科雜志，2013，12（1）： 29-31.

[12] 彭挺生， 丘鉅世， 吳惠茜，等.基質(zhì)金屬蛋白酶-2，9及其抑制劑在骨肉瘤中表達(dá)的意義[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2003，24（2）：132-135.

（收稿日期：2014-04-24）endprint

2.2 各組TIMP-2和TIMP-1的表達(dá)情況

與未復(fù)發(fā)組和對(duì)照組相比，復(fù)發(fā)組中TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）；與對(duì)照組相比，未復(fù)發(fā)組TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）。見表1、表2。

3 討論

宮頸癌是女性惡性腫瘤死亡的主要原因之一，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后較差。改善惡性腫瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵為早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)采取有效治療[5]；如何有效預(yù)測宮頸癌的復(fù)發(fā)對(duì)判斷預(yù)后具有重要的意義。目前，可有效預(yù)測宮頸癌復(fù)發(fā)的生物學(xué)指標(biāo)仍在探索之中。

MMPs是一種可降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的蛋白水解酶，其在誘導(dǎo)腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。MMP-2和MMP-9是MMPs家族成員中降解作用較強(qiáng)的兩種亞型。Huang等[6]報(bào)道稱，卵巢上皮細(xì)胞癌組織中的MMP-2和MMP-9蛋白的高表達(dá)與癌細(xì)胞的侵襲能力呈正相關(guān)。李嬋玉等[7]研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者M(jìn)MP-9陽性表達(dá)率顯著高于宮頸慢性炎癥患者，其認(rèn)為MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率（81.3%和79.2%）和表達(dá)強(qiáng)度[（99.86±23.67）和（97.53±23.14）]、未復(fù)發(fā)組MMP-2和MMP-9的陽性率（48.6%和51.4%）和表達(dá)強(qiáng)度（69.75±15.86和72.16±16.01）顯著高于對(duì)照組（10.0%和6.7%，28.12±9.48和33.97±11.14），與上述研究相似，提示MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫曉彤等[8]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)子宮頸癌患者M(jìn)MP-9蛋白陽性率顯著高于未復(fù)發(fā)患者，其認(rèn)為檢測MMP-9蛋白可能有利于預(yù)測宮頸癌患者術(shù)后的復(fù)發(fā)，但其并未對(duì)MMPs家族的其它亞型進(jìn)行檢測。本研究證實(shí)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能參與宮頸癌的復(fù)發(fā)。其原因可能為：MMPs降解細(xì)胞外基質(zhì)、破壞基底膜屏障及局部的組織結(jié)構(gòu)，使腫瘤細(xì)胞浸潤周圍組織，發(fā)生淋巴等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，為腫瘤復(fù)發(fā)提供可能；同時(shí)MMPs具有促進(jìn)新生血管形成的作用，為腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)提供條件。

TIMPs是體內(nèi)MMPs的天然抑制物，與MMPs特異性結(jié)合抑制其活性，二者共同參與機(jī)體多種生理病理變化。黃靜儀等[9]報(bào)道稱，TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切有關(guān)。李芳等[10]研究顯示，TIMP-1和TIMP-2在宮頸鱗癌中的表達(dá)明顯低于慢性宮頸炎。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（39.6%和43.8%）和表達(dá)強(qiáng)度[（60.48±14.03）和（62.75±14.63）]、未復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（68.6%和71.4%）和表達(dá)強(qiáng)度[（84.93±19.86）和（88.86±20.15）]顯著低于對(duì)照組（90.0%和93.3%，[（105.62±24.24）和（108.74±24.87）]，提示TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫其愷等[11]報(bào)道稱，TIMP-2在肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過程中起重要作用，其可作為肝癌術(shù)后預(yù)后預(yù)測的指標(biāo)。而彭挺生等[12]報(bào)道稱，骨肉瘤術(shù)后是否復(fù)發(fā)與TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況無關(guān)。TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況與腫瘤復(fù)發(fā)關(guān)系目前仍有爭議，而有關(guān)TIMP-1和TIMP-2表達(dá)情況與宮頸癌復(fù)發(fā)關(guān)系鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究對(duì)此進(jìn)行了初步的分析，發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著低于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的復(fù)發(fā)有關(guān)。其原因可能為：TIMPs在組織中表達(dá)降低，其對(duì)MMPs的抑制作用減弱，MMPs對(duì)ECM的降解作用得到增加，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，為腫瘤的復(fù)發(fā)提供可能。

綜上，MMP-2、MMP-9及其抑制劑TIMP-2、TIMP-1表達(dá)情況可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，其可作為評(píng)估宮頸癌復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。有關(guān)MMPs和TIMPs在宮頸癌復(fù)發(fā)中的作用及其機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 杜文升.Annexin A2、MMP-9在宮頸浸潤癌組織中的表達(dá)及意義[J].南通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，31（4）： 270-275.

[2] 付曉瑞， 張辰， 陳長英，等.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中華腫瘤雜志，2012，34（5）：369-373.

[3] Roomi MW，Kalinovsky T，Rath M， et al. Modulation of u-PA，MMPs and their inhibitors by a novel nutrient mixture in human female cancer cell lines[J].Oncol Rep，2012，28（3）：768-776.

[4] Feng YH，Wu LS，Su J， et al.Expression and significance of MMP-26， TIMP-4 and MMP-9 in diffuse large B-cell lymphoma cells[J].Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi， 2013，21（5）：1167-1172.

[5] Hou T，Liang D，Yang D， et al. High expression of CRAM correlates with poor prognosis in patients with cervical carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol， 2014， 7（3）： 1060-1068.

[6] Huang LW， Garsett AP， Bell DA， et a1. Differential expression of matrix metallopmteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-l protein and mRNA in epithelial ovarian tumors[J].Gynecol Onon， 2000，77（16）： 369-376.

[7] 李嬋玉，李力.MMP-9及其相關(guān)因子與宮頸癌[J].重慶醫(yī)學(xué)， 2012，41（33）：3545-3547.

[8] 孫曉彤，楊毓琴，李耘，等. Shrew-1與MMP-9蛋白的表達(dá)及其聯(lián)合檢測對(duì)早期子宮頸鱗癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（5）：379-381.

[9] 黃靜儀，劉林嵋，張建文.MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及其意義[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2011， 20（12）：1912-1915.

[10] 李芳， 張淑蘭， 邱榮蘭. MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在宮頸鱗癌中的表達(dá)及其意義[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志， 2006，11（6）：450-456.

[11] 孫其愷，王偉，呂陽，等.ECM-1和TIMP-2在肝細(xì)胞癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 肝膽外科雜志，2013，12（1）： 29-31.

[12] 彭挺生， 丘鉅世， 吳惠茜，等.基質(zhì)金屬蛋白酶-2，9及其抑制劑在骨肉瘤中表達(dá)的意義[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2003，24（2）：132-135.

（收稿日期：2014-04-24）endprint

2.2 各組TIMP-2和TIMP-1的表達(dá)情況

與未復(fù)發(fā)組和對(duì)照組相比，復(fù)發(fā)組中TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）；與對(duì)照組相比，未復(fù)發(fā)組TIMP-2和TIMP-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度顯著降低（P<0.05）。見表1、表2。

3 討論

宮頸癌是女性惡性腫瘤死亡的主要原因之一，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后較差。改善惡性腫瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵為早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)采取有效治療[5]；如何有效預(yù)測宮頸癌的復(fù)發(fā)對(duì)判斷預(yù)后具有重要的意義。目前，可有效預(yù)測宮頸癌復(fù)發(fā)的生物學(xué)指標(biāo)仍在探索之中。

MMPs是一種可降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的蛋白水解酶，其在誘導(dǎo)腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。MMP-2和MMP-9是MMPs家族成員中降解作用較強(qiáng)的兩種亞型。Huang等[6]報(bào)道稱，卵巢上皮細(xì)胞癌組織中的MMP-2和MMP-9蛋白的高表達(dá)與癌細(xì)胞的侵襲能力呈正相關(guān)。李嬋玉等[7]研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者M(jìn)MP-9陽性表達(dá)率顯著高于宮頸慢性炎癥患者，其認(rèn)為MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率（81.3%和79.2%）和表達(dá)強(qiáng)度[（99.86±23.67）和（97.53±23.14）]、未復(fù)發(fā)組MMP-2和MMP-9的陽性率（48.6%和51.4%）和表達(dá)強(qiáng)度（69.75±15.86和72.16±16.01）顯著高于對(duì)照組（10.0%和6.7%，28.12±9.48和33.97±11.14），與上述研究相似，提示MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫曉彤等[8]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)子宮頸癌患者M(jìn)MP-9蛋白陽性率顯著高于未復(fù)發(fā)患者，其認(rèn)為檢測MMP-9蛋白可能有利于預(yù)測宮頸癌患者術(shù)后的復(fù)發(fā)，但其并未對(duì)MMPs家族的其它亞型進(jìn)行檢測。本研究證實(shí)，復(fù)發(fā)組患者M(jìn)MP-2和MMP-9的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明MMP-2和MMP-9高表達(dá)可能參與宮頸癌的復(fù)發(fā)。其原因可能為：MMPs降解細(xì)胞外基質(zhì)、破壞基底膜屏障及局部的組織結(jié)構(gòu)，使腫瘤細(xì)胞浸潤周圍組織，發(fā)生淋巴等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，為腫瘤復(fù)發(fā)提供可能；同時(shí)MMPs具有促進(jìn)新生血管形成的作用，為腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)提供條件。

TIMPs是體內(nèi)MMPs的天然抑制物，與MMPs特異性結(jié)合抑制其活性，二者共同參與機(jī)體多種生理病理變化。黃靜儀等[9]報(bào)道稱，TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切有關(guān)。李芳等[10]研究顯示，TIMP-1和TIMP-2在宮頸鱗癌中的表達(dá)明顯低于慢性宮頸炎。該研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（39.6%和43.8%）和表達(dá)強(qiáng)度[（60.48±14.03）和（62.75±14.63）]、未復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率（68.6%和71.4%）和表達(dá)強(qiáng)度[（84.93±19.86）和（88.86±20.15）]顯著低于對(duì)照組（90.0%和93.3%，[（105.62±24.24）和（108.74±24.87）]，提示TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。孫其愷等[11]報(bào)道稱，TIMP-2在肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過程中起重要作用，其可作為肝癌術(shù)后預(yù)后預(yù)測的指標(biāo)。而彭挺生等[12]報(bào)道稱，骨肉瘤術(shù)后是否復(fù)發(fā)與TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況無關(guān)。TIMP-1、TIMP-2表達(dá)情況與腫瘤復(fù)發(fā)關(guān)系目前仍有爭議，而有關(guān)TIMP-1和TIMP-2表達(dá)情況與宮頸癌復(fù)發(fā)關(guān)系鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究對(duì)此進(jìn)行了初步的分析，發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)組患者TIMP-1和TIMP-2的陽性率和表達(dá)強(qiáng)度顯著低于對(duì)照組和未復(fù)發(fā)組，說明TIMP-1和TIMP-2低表達(dá)可能與宮頸癌的復(fù)發(fā)有關(guān)。其原因可能為：TIMPs在組織中表達(dá)降低，其對(duì)MMPs的抑制作用減弱，MMPs對(duì)ECM的降解作用得到增加，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，為腫瘤的復(fù)發(fā)提供可能。

綜上，MMP-2、MMP-9及其抑制劑TIMP-2、TIMP-1表達(dá)情況可能與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，其可作為評(píng)估宮頸癌復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。有關(guān)MMPs和TIMPs在宮頸癌復(fù)發(fā)中的作用及其機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 杜文升.Annexin A2、MMP-9在宮頸浸潤癌組織中的表達(dá)及意義[J].南通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，31（4）： 270-275.

[2] 付曉瑞， 張辰， 陳長英，等.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制因子在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中華腫瘤雜志，2012，34（5）：369-373.

[3] Roomi MW，Kalinovsky T，Rath M， et al. Modulation of u-PA，MMPs and their inhibitors by a novel nutrient mixture in human female cancer cell lines[J].Oncol Rep，2012，28（3）：768-776.

[4] Feng YH，Wu LS，Su J， et al.Expression and significance of MMP-26， TIMP-4 and MMP-9 in diffuse large B-cell lymphoma cells[J].Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi， 2013，21（5）：1167-1172.

[5] Hou T，Liang D，Yang D， et al. High expression of CRAM correlates with poor prognosis in patients with cervical carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol， 2014， 7（3）： 1060-1068.

[6] Huang LW， Garsett AP， Bell DA， et a1. Differential expression of matrix metallopmteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-l protein and mRNA in epithelial ovarian tumors[J].Gynecol Onon， 2000，77（16）： 369-376.

[7] 李嬋玉，李力.MMP-9及其相關(guān)因子與宮頸癌[J].重慶醫(yī)學(xué)， 2012，41（33）：3545-3547.

[8] 孫曉彤，楊毓琴，李耘，等. Shrew-1與MMP-9蛋白的表達(dá)及其聯(lián)合檢測對(duì)早期子宮頸鱗癌復(fù)發(fā)的預(yù)測價(jià)值[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（5）：379-381.

[9] 黃靜儀，劉林嵋，張建文.MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮膚癌中的表達(dá)及其意義[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2011， 20（12）：1912-1915.

[10] 李芳， 張淑蘭， 邱榮蘭. MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在宮頸鱗癌中的表達(dá)及其意義[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志， 2006，11（6）：450-456.

[11] 孫其愷，王偉，呂陽，等.ECM-1和TIMP-2在肝細(xì)胞癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 肝膽外科雜志，2013，12（1）： 29-31.

[12] 彭挺生， 丘鉅世， 吳惠茜，等.基質(zhì)金屬蛋白酶-2，9及其抑制劑在骨肉瘤中表達(dá)的意義[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2003，24（2）：132-135.

（收稿日期：2014-04-24）endprint