星形膠質(zhì)瘤患者癌組織中S100、Survivin和Ki-67表達(dá)及其臨床意義

劉玲麗 (海南省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570311)

星形膠質(zhì)瘤依據(jù)細(xì)胞分化和異型性的不同可分為Ⅰ～Ⅳ級，隨級別升高，膠質(zhì)瘤呈逐漸惡性進(jìn)展的趨勢〔1〕。正確判斷其病理分級，是合理治療的前提。某些蛋白的表達(dá)情況可反映腫瘤的良惡程度及預(yù)后。S100蛋白是一種主要表達(dá)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)星形膠質(zhì)細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的酸性鈣結(jié)合蛋白〔2〕。Survivin屬于凋亡抑制蛋白，具有抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞分裂的功能〔3〕。Ki-67是與細(xì)胞增殖關(guān)系密切的核蛋白，可準(zhǔn)確反映腫瘤細(xì)胞增殖活性狀態(tài)，預(yù)測患者的預(yù)后〔4〕。本文探討S100、Survivin和 Ki-67在星形膠質(zhì)瘤腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況及在判斷星形膠質(zhì)瘤臨床病理級別中的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 我院收治的星形膠質(zhì)瘤患者68例，其中男37例，女31例，年齡60～66〔平均(64.1±1.2)〕歲。均接受手術(shù)治療，手術(shù)后標(biāo)本病理檢查結(jié)果依據(jù)世界衛(wèi)生組織腫瘤臨床病例分級標(biāo)準(zhǔn)，低級別星形膠質(zhì)瘤(Ⅰ～Ⅱ級)30例，高級別(Ⅲ～Ⅳ級)38例。另選取20例正常腦組織標(biāo)本作為對照組，男11例，女9例，年齡60～65〔平均(62.1±1.1)〕歲。兩組性別、年齡等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2檢測方法 手術(shù)標(biāo)本經(jīng)10%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋切片，進(jìn)行HE染色和SP法免疫組化染色，免疫組化操作步驟參考說明書執(zhí)行，經(jīng)脫蠟后，抗原修復(fù)，加一抗孵育過夜后沖洗，滴加二抗，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，脫水透明，封片。每批染色均設(shè)立陽性和陰性對照。鼠抗人S100單克隆抗體，型號:ES-SM-003，規(guī)格:0.2 ml濃縮液，購自上海億欣生物科技有限公司。兔抗人Survivin多克隆抗體，型號SC-10811，工作濃度為1∶175，購自 Santa Cruz Biochemology，Inc。鼠 Ki-67 單克隆抗體，型號SC-23900，規(guī)格:200 μg/ml，購自上海優(yōu)寧維生物科技有限公司。

1.3免疫組化結(jié)果判斷 S100免疫組化結(jié)果以腫瘤細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中出現(xiàn)棕色顆粒為陽性。Survivin染色陽性以胞核和胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒為陽性;Ki-67免疫組化陽性染色定位于腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。依照參照文獻(xiàn)〔5〕報道的方法，綜合染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比的得分結(jié)果進(jìn)行綜合評分。(1)染色強(qiáng)度:無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色者為3分。(2)陽性細(xì)胞百分比:隨機(jī)選取10個高倍視野(×200)，每個視野計(jì)數(shù)1 000個細(xì)胞，無陽性細(xì)胞為0分，陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分，11% ～50%為2分，51% ～75%為3分，＞75%為4分。將兩項(xiàng)得分相乘，0分為-，1～2分為+，3～6分為?，8～12分為?，其中?和?判為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1各組S100表達(dá)情況 隨腫瘤惡性程度增高，S100陽性率明顯降低(χ2=12.79，P＜0.05)。正常腦組織中S100陽性率高于低級別星形膠質(zhì)瘤組織，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.40，P＞0.05);也明顯高于高級別星形膠質(zhì)瘤組織(χ2=11.59，P＜0.05)。低級別星形膠質(zhì)瘤中S100陽性率明顯高于高級別(χ2=8.88，P＜0.05)。見表1。

2.2各組Survivin表達(dá)情況 隨腫瘤惡性程度增高，Survivin陽性率明顯升高(χ2=14.41，P＜0.05)。高級別膠質(zhì)瘤組織中Survivin陽性率高于低級別和正常腦組織(χ2=4.02、χ2=12.58，均P＜0.05);低級別星形膠質(zhì)瘤中Survivin陽性率明顯高于正常腦組織(χ2=5.45，P＜0.05)。見表2。

2.3各組Ki-67表達(dá)情況 隨腫瘤惡性程度增高，Ki-67陽性率明顯升高(χ2=12.69，P＜0.05)。高級別膠質(zhì)瘤組織中Ki-67陽性率高于低級別和正常腦組織(χ2=3.95、χ2=10.95，均P＜0.05);低級別星形膠質(zhì)瘤中Ki-67陽性率明顯高于正常腦組織(χ2=4.01，P＜0.05)。見表3。

2.4星形膠質(zhì)瘤中Survivin和Ki-67的相關(guān)性 Survivin表達(dá)與 Ki-67呈高度正相關(guān)關(guān)系(r=0.31，P＜0.05)。見表4。

表1 各組S100表達(dá)情況(n)

表2 各組Survivin表達(dá)情況(n)

表3 各組Ki-67表達(dá)情況(n)

表4 星形膠質(zhì)瘤中Survivin和Ki-67的相關(guān)性(n)

3 討論

文獻(xiàn)報道〔6〕，星形膠質(zhì)瘤占顱內(nèi)腫瘤的13% ～26%，占膠質(zhì)瘤21.2%～51.6%?？蓱?yīng)用于星形膠質(zhì)瘤腫瘤特性的免疫組化標(biāo)記物較多〔7〕。S100蛋白是一種在正常腦組織細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞，參與正常細(xì)胞的周期調(diào)控和增殖分化等多種生理過程。S100蛋白與腫瘤增殖呈負(fù)相關(guān)，有研究報道〔8〕，S100在低級別膠質(zhì)瘤組織中高表達(dá)，隨著惡性程度提高，S100表達(dá)水平降低，在高級別膠質(zhì)瘤組織中呈低表達(dá)狀態(tài)。本研究結(jié)果提示，星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞形成和惡性程度增高與S100表達(dá)下調(diào)或缺失有關(guān)，S100可作為診斷星形膠質(zhì)瘤異常增生的一種特異性蛋白標(biāo)記。

Survivin屬于凋亡抑制蛋白中的一種，在腫瘤組織中表達(dá)但在正常組織中不表達(dá)。Survivin的這一特點(diǎn)提示其與腫瘤的病程進(jìn)展有密切相關(guān)。有文獻(xiàn)報道〔9〕，Survivin可能通過干擾腫瘤細(xì)胞的凋亡和增殖平衡促進(jìn)腫瘤發(fā)生和發(fā)展。本研究結(jié)果提示，Survivin蛋白的表達(dá)水平隨星形膠質(zhì)瘤惡性程度的升高而增高，Survivin表達(dá)上調(diào)抑制了膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡。

Ki-67是與細(xì)胞增殖關(guān)系密切的核蛋白，在正常組織中表達(dá)水平極低，可準(zhǔn)確反映腫瘤細(xì)胞增殖活性狀態(tài)〔10〕，預(yù)測患者的預(yù)后，是腫瘤增殖的標(biāo)志物之一。本研究結(jié)果提示Ki-67蛋白的表達(dá)與星形膠質(zhì)瘤惡性程度呈正相關(guān)，Ki-67表達(dá)升高反映星形膠質(zhì)瘤呈高度增殖狀態(tài)。Survivin蛋白在抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，可促進(jìn)轉(zhuǎn)化細(xì)胞的異常增殖。

綜上，S100低表達(dá)、Survivin和Ki-67高表達(dá)提示星形膠質(zhì)瘤的惡性程度較高。三者可反映星形膠質(zhì)瘤的增殖狀態(tài)，有助于鑒別腫瘤的惡性程度。

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