特發性血小板減少性紫癜患者血小板相關抗體的表達及意義

李 杪

沈陽市兒童醫院內科，遼寧沈陽 110032

特發性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是血小板減少性紫癜中的一種，也是一種常見的自身免疫性疾病，年發病率40～60/100萬，主要以皮膚黏膜或內臟出血、血小板減少、骨髓巨噬細胞成熟障礙、血小板生存時間縮短及抗血小板自身抗體出現及自身抗體介導的破壞性血小板(platelet,PLT)減少為特征[1]。臨床研究發現部分ITP患者體內可檢測到特異性抗血小板相關抗體 (platelet associated immunoglobulin，PAIg)，提示PAIg與特發性血小板減少性紫癜之間具有密切相關[2,3]，為了解ITP患者患病時PAIg的表達及其臨床意義，該院對2012年1—6月期間該院及周邊醫院診治的ITP患者PAIg進行了測定，評價其在ITP中的臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院門診及住院ITP患兒40例，包括急性型及慢性型各20例，均為初診患者，在近期未接受過免疫抑制劑及糖皮質激素治療，其中男 14例，女 26例，年齡 4～18歲，平均（8.27±3.12）歲。ITP診斷標準依據中華醫學會兒科分會血液學組推薦的《特發性血小板減少性紫癜診療建議（修訂草案）》中的診斷標準進行診斷[4]。選取同期本院門診進行體檢性別及年齡相匹配體檢無異常兒童20例作為對照人群（對照組），其中男5例，女15例，年齡 5～18 歲，平均（9.01±2.76）歲。

1.1.1 儀器及試劑 所有儀器為TECAN酶標儀，533JZK139508全自動血液分析儀，上海太陽生物技術有限公司生產的血小板抗體檢測試劑盒。

1.1.2 方法 抽取空腹靜脈血1 mL,分離血清后置-70℃冰箱存儲備用。PAIg(PAIgA、PAIgG)采取酶聯免疫吸附法（ELTSA法）測定，測定方法按照試劑盒操作說明書進行操作，參考值PAIgA＜20ng/107PA，PAIgG＜108 ng/107PA。血小板特異性抗體抗血小板膜糖蛋白抗體（GPIIb/IIIa、GPIb/IX）采取單克隆抗體特異性俘獲血小板抗原（MAIPA法）測定，血小板計數使用全自動血液分析儀直接測定。

1.2 統計方法

全部資料經SPSS12.0軟件進行統計學分析，結果以均數±標準差（）表示，組間比較采用 t檢驗，方差分析，各臨床參數之間的相關性研究采用多元線性回歸分析法。

2 結果

2.1 血小板相關抗體、特異性抗體的表達及血小板計數

血小板相關抗體 PAIgA、PAIgG、特異性抗體 GPIIb/IIIa、GPIb/IX、血小板計數對照組分別為（4.22±0.78）ng/107PA、（23.17±3.46）ng/107PA、 （0.33±0.01）A 值 、 （0.31±0.01）A 值 、 （137.82±42.37）×109/L，ITP 組 分 別 為 （45.58±5.32）ng/107PA、 （243.34±12.21）ng/107PA、 （0.42±0.06）A 值 、 （0.41±0.05）A 值 、 （35.50±21.35）×109/L，兩組以上各項指標之間比較差異有統計學意義（P<0.05）。 見表 1。

表1 血小板相關抗體的表達及血小板計數（）

表1 血小板相關抗體的表達及血小板計數（）

組別PAIgA（ng/107PA）PAIgG（ng/107PA）GPIIb/IIIa（A值）GPIb/IX（A值）血小板計數（×109/L）對照組(n=20)ITP組(n=40)t值P值4.22±0.7845.58±5.3234.44<0.0523.17±3.46243.34±12.2178.77<0.050.33±0.010.42±0.066.63<0.050.31±0.010.41±0.058.82<0.05137.82±42.3735.50±21.3512.49<0.05

2.2 相關結果分析

ITP組血小板計數與特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX進行相關性分析，結果顯示血小板計數與特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX之間具有負相關，相關系數分別為-0.24（P<0.05）、-0.31（P<

0.05 ）。

3 討論

ITP作為免疫性疾病，其與自身血小板抗體的產生密切相關，在50年前Harrington就已經研究分析ITP患者存在抗血小板膜抗體的存在。血小板表明存在多種抗原，因此抗體也表現較為復雜，一般來說包括血小板相關抗原及特異性抗原兩大類，因此抗體也主要有相關性抗體及特異性抗體，其中相關性抗體主要為PAIgA、PAIgG、PAIgM，特異性抗體主要有GPIIb/IIIa、GPIb/IX、IV、V等，目前臨床上對ITP患者進行血小板抗體的檢測研究較多，各種檢測方法均有一定優勢[5-6]。為了探討血小板抗體在ITP中的表達，該院進行了相關研究。

血小板抗體多數是依賴于輔助性T淋巴細胞的B淋巴細胞產生，其輔助性T淋巴細胞對血小板是否產生抗體起到關鍵作用，其還能對抑制性T淋巴細胞網絡和抑制性細胞因子進行調控。血小板抗體可通過其Fab端與血小板膜糖蛋白或巨噬細胞相結合，并且激活單核細胞-巨噬細胞系統影響血小板破壞[7]。有學者試驗研究發現兒童ITP患者血漿中巨核細胞增多，并且存在血小板抗體及血小板功能抑制，而正常對照組無此種現象存在[8]。該院采用ELTSA法、MAIPA法分別測定了ITP患者及正常對照組血小板抗體，結果發現ITP患者其血小板相關抗體PAIgA、PAIgG及特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX均明顯較對照組升高，血小板計數明顯減少，對照組檢測結果在正常范圍內，提示ITP患者血小板相關抗體及特異性抗體均有陽性表達。臨床上研究認為ELTSA法測定血小板抗體雖然靈敏性高但是特異性較低，雖然能測定出血小板機體總量，但是無法確定是免疫性還是非免疫性因素導致，并且在測定結果容易受到年齡、循環免疫復合物等因素的影響導致測定結果誤差值較大，因此臨床上更多學者傾向于測定特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX等的表達[9]。目前對于特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX的檢測方法以MAIPA法最為常用，并且相對是臨床上最先進和特異性最高、靈敏度高的檢測方法，能對血小板上微量的抗原也能進行檢測，臨床研究發現其特異性抗原高達97%，陽性預測值在96%[10]，因此使用MAIPA法檢測血小板特異性抗體具有很高的臨床價值。而該院采取了ELTSA法、MAIPA法兩種方法進行了血小板相關抗體及特異性抗體檢測，均發現血小板抗體在ITP患兒中有異常表達，ITP組血小板計數與特異性抗體GPIIb/IIIa、GPIb/IX進行相關性分析顯示具有負相關，進一步說明血小板計數與病情嚴重程度、特異性血小板抗體密切相關。

該研究結果顯示，在ITP患兒中血小板相關抗體及特異性抗體均有明顯升高，呈現陽性表達，并且聯合檢測有助于鑒別免疫性與非免疫性血小板減少型紫癜，能提高早期診斷率，并且有助于指導臨床治療。

[1]胡品津.內科學[M].北京：中國協和醫科大學出版社，2005：499-502.

[2]鮑靜，倪合宇，夏瑞祥，等.血小板特異性自身抗體檢測在特發性血小板減少性紫癜中的意義[J].中國綜合臨床，2008,24（9）：861-863.

[3]周艷，鐘周琳，申衛東.ITP患者血小板特異性自身抗體的檢測及意義[J].廣西醫學，2010,32（6）：708-709.

[4]中華醫學會兒科學分會血液學組，中華兒科再找編輯委員會.特發性血小板減少性紫癜診療建議（修訂草案）[J].中華兒科雜志，1999,38（1）：50-51.

[5]陳榳，安群星，胡興斌，等.三種血小板抗體檢測方法的臨床應用比較[J].現代檢驗醫學雜志，2010，25（3）：104-107.

[6]牛媛，陳志嬌，關浩，等.常用血小板抗體檢測的臨床應用比較，2012，34（1）：93-95.

[7]陳劍芳，楊林花，董春霞，等.分泌GPIIb/IIIa抗體B細胞及血小板特異性抗體檢測在特發性血小板減少性紫癜診斷中的意義[J].中華血液學雜志，2010，31（9）：603-606.

[8]孟美麗，黃瑞濱.特發性血小板減少性紫癜患者血小板特異性抗體的表達、意義及檢測[J].江西醫藥，2009，44（3）：279-282.

[9]馮建軍，楊林花，陳劍芳，等.血小板減少性紫癜血小板特異性抗體和促血小板生成素檢測的臨床意義[J].中國藥物與臨床，2009,9（4）：272-274.

[10]郭新紅，哈力達·亞森，馬艷，等.血小板特異性抗體對特發性血小板減少性紫癜診斷價值的研究[J].中華實用診斷與治療雜志，2009，23（5）：438-440.