老年胰腺癌組織中生存素的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

張蓬波 丁偉超 張秀忠 張沖 任澤強(qiáng)

胰腺癌是一種惡性程度非常高、發(fā)展十分迅速、預(yù)后極差的消化系統(tǒng)系惡性腫瘤。胰腺癌致死率較高，且缺乏有效治療手段，分析研究胰腺癌的發(fā)病機(jī)制及其生物學(xué)特性，以探索有效的早期診斷、治療及預(yù)后評(píng)價(jià)指標(biāo)具有十分重要的臨床意義。既往文獻(xiàn)報(bào)道，生存素(survivin)在其發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用［1-2］。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉菌親和素-過氧化物酶(SP)法對(duì)老年胰腺癌組織進(jìn)行survivin檢測(cè)，旨在探討survivin的表達(dá)與老年胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2006～2010年行根治性手術(shù)切除的老年胰腺導(dǎo)管腺癌標(biāo)本30例，所有患者均獲隨訪，隨訪日期截止至2013年12月，隨訪方式為電話、書信隨訪和(或)門診復(fù)查。其中，男18例，女 12例，年齡 60～85歲，平均(68.93±6.78)歲。所有患者均經(jīng)病理診斷為原發(fā)性胰腺導(dǎo)管腺癌，且術(shù)前均未行放療、化療及免疫治療等。其中，高+中分化腺癌為22例、低分化腺癌為8例;Ⅰ期15例、Ⅱ～Ⅳ期15例。選取距離腫瘤邊緣＞2 cm的組織作為癌旁非腫瘤標(biāo)本。

1.2 免疫組織化學(xué)檢測(cè) 采用SP法，具體步驟按照說明書。survivin抗體工作濃度為1∶100，4℃過夜。兔抗人survivin單克隆抗體、SP試劑盒、濃縮型3，3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑均購(gòu)于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜染成棕黃色為陽(yáng)性。每張切片任選5個(gè)400倍光鏡視野觀察，陽(yáng)性細(xì)胞率≤10%為表達(dá)陰性，＞10%為表達(dá)陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。定性資料分析采用Fisher確切概率法。累積生存時(shí)間及累積生存率計(jì)算采用Kaplan-Meier法，生存檢驗(yàn)采用Log-rank檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

30例胰腺癌組織中有20例表達(dá)陽(yáng)性(圖1)，陽(yáng)性率為66.7%;癌旁非腫瘤組織中未見survivin表達(dá)。

圖1 survivin在胰腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)(×400)

在不同性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小與腫瘤分化程度患者之間，survivin表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);但在不同TNM分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者之間，survivin表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 survivin的表達(dá)與臨床病理項(xiàng)目的關(guān)系(n)

續(xù)表

生存分析顯示，survivin陽(yáng)性組患者預(yù)后明顯差于陰性組(P＜0.05)。見圖2。

圖2 胰腺癌組織中不同survivin表達(dá)患者的生存分析

3 討論

迄今為止，胰腺癌仍是最難診斷和治療的惡性腫瘤之一［3］。因其具有臨床癥狀不典型、發(fā)病比較隱匿等特點(diǎn)，加之老年人對(duì)腹部疼痛不適等癥狀不敏感，使早期發(fā)現(xiàn)疾病更加困難。研究證實(shí)，胰腺癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多階段的復(fù)雜過程，其中細(xì)胞凋亡與之有密切關(guān)系［4］。survivin是現(xiàn)今已鑒定的8個(gè)凋亡抑制蛋白(IAPs)家族成員中分子質(zhì)量(16.5 kD)最小的成員，是目前已發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)凋亡抑制因子之一［5-7］。因此，分析研究老年胰腺癌與survivin的關(guān)系，探索有效的診斷及預(yù)后評(píng)測(cè)指標(biāo)，具有重要臨床意義。

既往文獻(xiàn)報(bào)道，survivin蛋白幾乎在所有人類腫瘤中高表達(dá)，而在正常終末分化的成年細(xì)胞或組織中不表達(dá)或低表達(dá)［2，8］。本研究顯示，survivin在胰腺癌組織中的陽(yáng)性率顯著高于其癌旁組織(P＜0.05)。胰腺癌組織中survivin的高表達(dá)，癌旁非腫瘤組織中的不表達(dá)或低表達(dá)，提示survivin在胰腺癌的發(fā)生中發(fā)揮了重要作用。既往文獻(xiàn)報(bào)道，腫瘤分化程度越低，sur-vivin表達(dá)越高，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組顯著低于有轉(zhuǎn)移組［9-10］。但本研究顯示，患者在不同性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小及腫瘤分化程度之間，survivin表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);而在不同TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間，survivin表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。這可能與本組病例數(shù)較少有關(guān)。胰腺癌組織中survivin表達(dá)與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)，提示survivin在胰腺癌的發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，survivin表達(dá)陽(yáng)性的胰腺癌組織可能具有更強(qiáng)的侵襲性。而且，Kaplan-Meier生存分析顯示survivin陽(yáng)性組患者預(yù)后明顯差于陰性組(P＜0.05)，提示survivin表達(dá)陽(yáng)性與胰腺癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。

綜上所述，本研究證實(shí)盡管survivin的表達(dá)與患者的年齡無關(guān)，但是，survivin在老年胰腺癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后中可能起重要作用，有望成為胰腺癌的預(yù)后評(píng)價(jià)指標(biāo)，有助于指導(dǎo)老年胰腺癌患者術(shù)后的綜合治療及隨訪。

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