環(huán)氧化物酶—2與缺氧誘導(dǎo)因子—1α在肺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

林招賢+陳新+吳榕龍+潘丹玲

[摘要] 目的 探討環(huán)氧化物酶—2（cyclooxygenase2，COX—2）與缺氧誘導(dǎo)因子-1αhypoxia-inducible factor1，HIF—1α）在肺癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法 隨機(jī)選取2011年5月—2013年5月在該院治療的56例肺癌患者的肺癌組織標(biāo)本，進(jìn)行病理學(xué)檢查，其中小細(xì)胞癌18例，腺癌9例，鱗癌29例；早期（Ib期，IIIa期）26例，晚期（IIIb期，IV期）30例。應(yīng)用免疫組化法對(duì)56例肺癌組織中的COX-2、HIF-1α的表達(dá)進(jìn)行檢測；用原位核酸分子雜交方法檢測 H IF～1在非小細(xì)胞肺癌癌組織中的表達(dá)；同時(shí)用CD34單克隆抗體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記并計(jì)數(shù)微血管密度（MVD），對(duì)COX-2、HIF-1α與肺癌組織及其血管生成的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 ①56例肺癌組織內(nèi)COX-2的陽性表達(dá)為14例（78.57%），其中在小細(xì)胞癌中陽性表達(dá)為14例（77.78%），腺癌陽性表達(dá)為8例（88.89%），鱗癌陽性表達(dá)率22例（75.86%），COX-2陽性表達(dá)率不受病理分型影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在早期（Ib-IIIa期）肺癌組中COX-2陽性表達(dá)率為61.54%，晚期（IHb-IV期）表達(dá)率為90.00%，COX-2陽性表達(dá)率有病理分期有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。②56例肺癌組織內(nèi)HIF-1α陽性表達(dá)為45例（89.49%），其中在小細(xì)胞癌中陽性表達(dá)為17例（94.44%），腺癌陽性表達(dá)為7例（77.78%），鱗癌陽性表達(dá)為25例（86.21%），HIF-1α陽性表達(dá)率不受病理分型影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在早期（Ib-IIIa期）的肺癌組中HIF-1α陽性表達(dá)率為80.77%，晚期（IIIb-IV期）為93.33%，HIF-1α有病理分期有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。③COX-2弱陽性的MVD值為13.32±8.91，較強(qiáng)陽性為19.20±9.98，強(qiáng)陽性為23.04±5.69，在病灶部位MVD隨著COX-2表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；HIF-1α弱陽性MVD值為13.78±4.59，較強(qiáng)陽性為21.59±8.25，強(qiáng)陽性為28.58±2.59，在病灶部位MVD隨著HIF-1α表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 COX-2、HIF-1α對(duì)于肺癌組織及其血管的生成具有重要作用，探討分析COX-2、HIF-1α在肺癌組織中的作用對(duì)于治療肺癌具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 環(huán)氧化物酶-2；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；肺癌組織；臨床意義

[中圖分類號(hào)] R725 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）09（a）-0009-03

實(shí)體腫瘤的特征之一使缺氧，若缺氧狀態(tài)下惡性腫瘤仍能不斷浸潤、生長，說明癌組織對(duì)缺氧適應(yīng)能力很強(qiáng)，而這種能力主要由生成血管及增加糖酵解實(shí)現(xiàn)[1，2]。目前對(duì)癌組織長、浸潤的研究發(fā)現(xiàn)，癌組織在缺氧狀態(tài)下的生長主要與COX-2、HIF-1α有關(guān)[3，4]。該研究中，隨機(jī)選取2011年5月—2013年5月在該院治療的56例肺癌患者的肺癌組織標(biāo)本進(jìn)行病理檢查，應(yīng)用免疫組化法，對(duì)肺癌組織中的COX-2、HIF-1α的表達(dá)進(jìn)行檢測，用CD34對(duì)腫瘤組織的微血管密度（microvessel density，MVD）進(jìn)行檢測，探討COX-2、HIF-1α的表達(dá)及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集在該院治療的肺癌病人的組織標(biāo)本56例，經(jīng)病理實(shí)驗(yàn)證實(shí)均屬肺癌組織。其中男39例，女17例；年齡47～81歲，平均（64.69±6.45）歲；小細(xì)胞癌18例，腺癌9例，鱗癌29例。根據(jù)美國聯(lián)合癌癥分類委員（AJCC）與國際抗癌聯(lián)盟（UICC）2002制訂的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：Ib期3例，IIb期6例，IIIa期14例，IIIb期11例，IV期21例。早期（Ib期，IIIa期）26例，晚期（IIIb期，IV期）30例。

1.2 試劑

HIF-1α兔抗人多克隆抗體（武漢博士德生物工程有限公司），濃度1：50。COX-2、CD34、超敏S-P試劑盒為即用型（福州邁新生物技術(shù)工程公司）。

1.3 方法

步驟運(yùn)用免疫組化法，步驟如下。①用10%福爾馬林固定標(biāo)本，石蠟包埋，將切片（4 μm）用二甲苯脫蠟，用梯度乙醇進(jìn)行水化；②用3%過氧化氫溶液在室溫下浸泡20 min，并用磷酸鹽溶液（PBS）沖洗2次；③將切片放入枸櫞酸溶液100 ℃水浴加熱15 min，待自然冷卻后用磷酸鹽溶液沖洗2次；④將山羊血清密封，37 ℃恒溫孵育20 min；⑤將血清棄去，分別滴加HIF-1α兔抗人多克隆抗體稀釋液以及COX-2、CD34，4 ℃恒溫孵育一夜，并用PBS沖洗2次；⑥滴加通用型IgG生物素化，在室溫下孵育30 min，并用PBS沖洗2次；⑦滴加比例適當(dāng)?shù)睦备笜?biāo)記鏈酶卵白素（經(jīng)PBS稀釋），在室溫下孵育30 min，用PBS沖洗2次；⑧顯色，用蘇木素進(jìn)行復(fù)染、脫水、透明、封片，并用顯微鏡進(jìn)行觀察。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

HIF-1α參照Bimer等[5]研究方法，細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒即為陽性，在400倍高倍鏡下每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野觀察，每個(gè)視野計(jì)數(shù)細(xì)胞200個(gè)，共計(jì)數(shù)1 000個(gè)。根據(jù)染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞率半定量處理：染色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：1分：弱染色但較陰性對(duì)照強(qiáng)；2分：染色較強(qiáng)；3分：染色強(qiáng)；細(xì)胞陽性率評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：2分：陽性率11%～50%；3分：陽性率51%～80%；4分：陽性率>81%。兩項(xiàng)評(píng)分結(jié)果相加，陽性率<10%者，均為陰性表達(dá)（-）；其余3分弱陽性（+）；4～5分中度陽性（++）；6～7分強(qiáng)陽性（+++）。COX-2判定標(biāo)準(zhǔn)如上。MVD參照Weidner[6]的報(bào)道方法，于40倍物鏡下尋找高密度血管區(qū)，在200倍高倍鏡下觀察3個(gè)視野內(nèi)被CD34染為棕色的血管數(shù)目，計(jì)算平均值。endprint

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSSl7.0軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 COX-2、HIF-1α在肺癌組織中的表達(dá)情況

COX-2主要在胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為44例（78.57%）；其中，弱陽性為18例（40.91%）；中度表達(dá)為16例 （36.36%）；強(qiáng)表達(dá)10例 （22.73%）。HIF-1α主要在胞核或胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為45（80.36%），其中，弱陽性為17例（37.78%），中度表達(dá)為13例（28.89%），強(qiáng)表達(dá)為15例（33.33%）。

2.2 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分型的關(guān)系

56例肺癌組織中COX-2陽性為44（78.57%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率77.78%，腺癌陽性表達(dá)率88.89%，鱗癌陽性表達(dá)率75.86%。HIF-1α陽性率為45（80.36%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率94.44%，腺癌陽性表達(dá)率77.78%，鱗癌陽性表達(dá)率為86.21%。COX-2、HIF-1α陽性率均不受病理分型影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.3 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分期的關(guān)系

COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%（16/26），晚期表達(dá)率為90.00%（27/30）， COX-2與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.839，P<0.05）；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%（21/26），晚期為93.33%（28/30），HIF-1α與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2==9.286，P<0.05）。見表2。

2.4 COX-2陽性率與MVD的關(guān)系

COX-2弱陽性的MVD值為（13.32±8.91），較強(qiáng)陽性為（19.20±9.98），（強(qiáng)陽性為23.04±5.69），MVD隨著COX-2表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.5 HIF-1α陽性率與MVD的關(guān)系

HIF-1α弱陽性MVD值為（13.78±4.59），較強(qiáng)陽性為（21.59±8.25），強(qiáng)陽性為（28.58±2.59），MVD隨著HIF-1α表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

3 討論

由于癌組織在缺氧環(huán)境下亦能生長、浸潤，因此隨著對(duì)癌組織研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)COX-2與HIF-1α在癌組織中異常表達(dá)，Marxsen[7]對(duì)肺癌、皮膚癌、前列腺癌、乳腺癌等進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中HIF-1α呈過表達(dá)，特別是腫瘤壞死區(qū)域及腫瘤浸潤邊緣更加明顯，而腫瘤組織的基質(zhì)細(xì)胞及鄰近正常組織中未見HIF-1α表達(dá)。Shoslow等[8]采用免疫組化法對(duì)60例腫瘤組織的石蠟切片進(jìn)行檢測，包括肺癌（腺癌、鱗癌）、乳腺癌、結(jié)腸癌，發(fā)現(xiàn)COX-2在90%的肺癌、56%的乳腺癌、71%的結(jié)腸癌中顯示中度甚至高度表達(dá)。Tomozawa等[9]認(rèn)為COX-2產(chǎn)生的血栓素、前列腺素是形成新血管的必要因素，它們能夠誘導(dǎo)VEGF生成，增使血管通透性增加，并增血流量，同時(shí)還可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，從而促進(jìn)血管的生成。

在該研究中證實(shí)COX-2和HIF-1α與癌組織病理分期具有重要關(guān)系，COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%，晚期表達(dá)率為90.00%；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%，晚期為93.33%。而且MVD的強(qiáng)度COX-2和HIF-1α的陽性狀態(tài)的增強(qiáng)而增強(qiáng)。但研究發(fā)現(xiàn)COX-2和HIF-1α與癌組織的病理分型關(guān)系不大。由此可見COX-2和HIF-1α對(duì)于癌組織在缺氧狀態(tài)下血管的生成具有重要作用。而且對(duì)于新的有關(guān)影響癌組織血管生成的因素的研究也在繼續(xù)，在未來的抗腫瘤研究領(lǐng)域?qū)⒂懈嘤欣诎┌Y治療的方法出現(xiàn)。這就使得惡性腫瘤的治療希望越來越大。

綜上所述，對(duì)COX-2與HIF-1α的研究及其調(diào)控對(duì)于抑制腫瘤血管的生長方面擁有廣闊的前景及價(jià)值，在今后的抗腫瘤治療中勢(shì)必會(huì)成為新靶點(diǎn)。而COX-2與HIF-1α的相互影響及關(guān)系，也將成為治療腫瘤的有力依據(jù)。同時(shí)也替該院應(yīng)該繼續(xù)加大對(duì)其他有關(guān)其組織形成的基因的研究，以便于全面的綜合的對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 連一新，施敏驊.缺氧誘導(dǎo)因子-1α和環(huán)氧化物酶-2在肺癌組織中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[J]. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，5（12）：15-16.

[2] 鄧述愷，聶文軍，王長安.HIF-1α和COX-2在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2010，5（13）：27-28.

[3] Diano S， Horvath TL.Mitochondrial uncoupling protein2（UCP2）in glucose and lipid metabolism[J]. Trends in Molecular Medicine ，2012，6（9）：18-20.

[4] Kim H S ，Park K G ，Koo TB，et al. The modulating effects of the over expression of uncoupling protein 2 on the formation of reactive oxygen species in vascular cells[J]. Diabetes Research and Clinical Practice ，2007，9（11）：56-57.

[5] Bimer E，Schindl M，Obermair A，et a1.Over expression of hypoxia-inducible factor lalpha is a marker for an unfavorable prognosis in early-stage invasive cervical cancer[J].Cancer Res，2000，60（17）：4693-4699.

[6] Weidner N.In tratum or almicrovessel density as a prognostic factor in cancer[J].Am J Pathol，1995，147（1）：9-19.

[7] Marxsen JH，Schmitt O，Metzen E，et a1.Vascular endothelial Growthfactorgene expressionin the human breast cancer cell line MX21 iscontrolledby 02 availabilityin vitro and in vivo[J].AnnAnat，2001（183）：243-249.

[8] Shoslow RA，Dannenberg AJ，Rush D，et al.COX-2 is expressed in human pulmonary，colonic，and Mammary tumors[J].Cancer，2000（89）：2637-2645.

[9] Tomozawa S，Tsuno NI-I，Sunaml E，et al.Cyclooxygenase-2over Expression correlates with tumor recurrence especially hematogenous metastasis of colorectal cancer[J].Br J Cancer，2000（61）：324-328.

（收稿日期：2014-06-03）endprint

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSSl7.0軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 COX-2、HIF-1α在肺癌組織中的表達(dá)情況

COX-2主要在胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為44例（78.57%）；其中，弱陽性為18例（40.91%）；中度表達(dá)為16例 （36.36%）；強(qiáng)表達(dá)10例 （22.73%）。HIF-1α主要在胞核或胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為45（80.36%），其中，弱陽性為17例（37.78%），中度表達(dá)為13例（28.89%），強(qiáng)表達(dá)為15例（33.33%）。

2.2 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分型的關(guān)系

56例肺癌組織中COX-2陽性為44（78.57%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率77.78%，腺癌陽性表達(dá)率88.89%，鱗癌陽性表達(dá)率75.86%。HIF-1α陽性率為45（80.36%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率94.44%，腺癌陽性表達(dá)率77.78%，鱗癌陽性表達(dá)率為86.21%。COX-2、HIF-1α陽性率均不受病理分型影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.3 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分期的關(guān)系

COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%（16/26），晚期表達(dá)率為90.00%（27/30）， COX-2與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.839，P<0.05）；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%（21/26），晚期為93.33%（28/30），HIF-1α與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2==9.286，P<0.05）。見表2。

2.4 COX-2陽性率與MVD的關(guān)系

COX-2弱陽性的MVD值為（13.32±8.91），較強(qiáng)陽性為（19.20±9.98），（強(qiáng)陽性為23.04±5.69），MVD隨著COX-2表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.5 HIF-1α陽性率與MVD的關(guān)系

HIF-1α弱陽性MVD值為（13.78±4.59），較強(qiáng)陽性為（21.59±8.25），強(qiáng)陽性為（28.58±2.59），MVD隨著HIF-1α表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

3 討論

由于癌組織在缺氧環(huán)境下亦能生長、浸潤，因此隨著對(duì)癌組織研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)COX-2與HIF-1α在癌組織中異常表達(dá)，Marxsen[7]對(duì)肺癌、皮膚癌、前列腺癌、乳腺癌等進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中HIF-1α呈過表達(dá)，特別是腫瘤壞死區(qū)域及腫瘤浸潤邊緣更加明顯，而腫瘤組織的基質(zhì)細(xì)胞及鄰近正常組織中未見HIF-1α表達(dá)。Shoslow等[8]采用免疫組化法對(duì)60例腫瘤組織的石蠟切片進(jìn)行檢測，包括肺癌（腺癌、鱗癌）、乳腺癌、結(jié)腸癌，發(fā)現(xiàn)COX-2在90%的肺癌、56%的乳腺癌、71%的結(jié)腸癌中顯示中度甚至高度表達(dá)。Tomozawa等[9]認(rèn)為COX-2產(chǎn)生的血栓素、前列腺素是形成新血管的必要因素，它們能夠誘導(dǎo)VEGF生成，增使血管通透性增加，并增血流量，同時(shí)還可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，從而促進(jìn)血管的生成。

在該研究中證實(shí)COX-2和HIF-1α與癌組織病理分期具有重要關(guān)系，COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%，晚期表達(dá)率為90.00%；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%，晚期為93.33%。而且MVD的強(qiáng)度COX-2和HIF-1α的陽性狀態(tài)的增強(qiáng)而增強(qiáng)。但研究發(fā)現(xiàn)COX-2和HIF-1α與癌組織的病理分型關(guān)系不大。由此可見COX-2和HIF-1α對(duì)于癌組織在缺氧狀態(tài)下血管的生成具有重要作用。而且對(duì)于新的有關(guān)影響癌組織血管生成的因素的研究也在繼續(xù)，在未來的抗腫瘤研究領(lǐng)域?qū)⒂懈嘤欣诎┌Y治療的方法出現(xiàn)。這就使得惡性腫瘤的治療希望越來越大。

綜上所述，對(duì)COX-2與HIF-1α的研究及其調(diào)控對(duì)于抑制腫瘤血管的生長方面擁有廣闊的前景及價(jià)值，在今后的抗腫瘤治療中勢(shì)必會(huì)成為新靶點(diǎn)。而COX-2與HIF-1α的相互影響及關(guān)系，也將成為治療腫瘤的有力依據(jù)。同時(shí)也替該院應(yīng)該繼續(xù)加大對(duì)其他有關(guān)其組織形成的基因的研究，以便于全面的綜合的對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 連一新，施敏驊.缺氧誘導(dǎo)因子-1α和環(huán)氧化物酶-2在肺癌組織中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[J]. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，5（12）：15-16.

[2] 鄧述愷，聶文軍，王長安.HIF-1α和COX-2在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2010，5（13）：27-28.

[3] Diano S， Horvath TL.Mitochondrial uncoupling protein2（UCP2）in glucose and lipid metabolism[J]. Trends in Molecular Medicine ，2012，6（9）：18-20.

[4] Kim H S ，Park K G ，Koo TB，et al. The modulating effects of the over expression of uncoupling protein 2 on the formation of reactive oxygen species in vascular cells[J]. Diabetes Research and Clinical Practice ，2007，9（11）：56-57.

[5] Bimer E，Schindl M，Obermair A，et a1.Over expression of hypoxia-inducible factor lalpha is a marker for an unfavorable prognosis in early-stage invasive cervical cancer[J].Cancer Res，2000，60（17）：4693-4699.

[6] Weidner N.In tratum or almicrovessel density as a prognostic factor in cancer[J].Am J Pathol，1995，147（1）：9-19.

[7] Marxsen JH，Schmitt O，Metzen E，et a1.Vascular endothelial Growthfactorgene expressionin the human breast cancer cell line MX21 iscontrolledby 02 availabilityin vitro and in vivo[J].AnnAnat，2001（183）：243-249.

[8] Shoslow RA，Dannenberg AJ，Rush D，et al.COX-2 is expressed in human pulmonary，colonic，and Mammary tumors[J].Cancer，2000（89）：2637-2645.

[9] Tomozawa S，Tsuno NI-I，Sunaml E，et al.Cyclooxygenase-2over Expression correlates with tumor recurrence especially hematogenous metastasis of colorectal cancer[J].Br J Cancer，2000（61）：324-328.

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1.5 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSSl7.0軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 COX-2、HIF-1α在肺癌組織中的表達(dá)情況

COX-2主要在胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為44例（78.57%）；其中，弱陽性為18例（40.91%）；中度表達(dá)為16例 （36.36%）；強(qiáng)表達(dá)10例 （22.73%）。HIF-1α主要在胞核或胞漿中表達(dá)，為棕黃色。56例肺癌組織中陽性表達(dá)為45（80.36%），其中，弱陽性為17例（37.78%），中度表達(dá)為13例（28.89%），強(qiáng)表達(dá)為15例（33.33%）。

2.2 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分型的關(guān)系

56例肺癌組織中COX-2陽性為44（78.57%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率77.78%，腺癌陽性表達(dá)率88.89%，鱗癌陽性表達(dá)率75.86%。HIF-1α陽性率為45（80.36%），其中小細(xì)胞癌陽性表達(dá)率94.44%，腺癌陽性表達(dá)率77.78%，鱗癌陽性表達(dá)率為86.21%。COX-2、HIF-1α陽性率均不受病理分型影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.3 COX-2、HIF-1α陽性率與病理分期的關(guān)系

COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%（16/26），晚期表達(dá)率為90.00%（27/30）， COX-2與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.839，P<0.05）；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%（21/26），晚期為93.33%（28/30），HIF-1α與病理分型有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2==9.286，P<0.05）。見表2。

2.4 COX-2陽性率與MVD的關(guān)系

COX-2弱陽性的MVD值為（13.32±8.91），較強(qiáng)陽性為（19.20±9.98），（強(qiáng)陽性為23.04±5.69），MVD隨著COX-2表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.5 HIF-1α陽性率與MVD的關(guān)系

HIF-1α弱陽性MVD值為（13.78±4.59），較強(qiáng)陽性為（21.59±8.25），強(qiáng)陽性為（28.58±2.59），MVD隨著HIF-1α表達(dá)強(qiáng)度增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

3 討論

由于癌組織在缺氧環(huán)境下亦能生長、浸潤，因此隨著對(duì)癌組織研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)COX-2與HIF-1α在癌組織中異常表達(dá)，Marxsen[7]對(duì)肺癌、皮膚癌、前列腺癌、乳腺癌等進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中HIF-1α呈過表達(dá)，特別是腫瘤壞死區(qū)域及腫瘤浸潤邊緣更加明顯，而腫瘤組織的基質(zhì)細(xì)胞及鄰近正常組織中未見HIF-1α表達(dá)。Shoslow等[8]采用免疫組化法對(duì)60例腫瘤組織的石蠟切片進(jìn)行檢測，包括肺癌（腺癌、鱗癌）、乳腺癌、結(jié)腸癌，發(fā)現(xiàn)COX-2在90%的肺癌、56%的乳腺癌、71%的結(jié)腸癌中顯示中度甚至高度表達(dá)。Tomozawa等[9]認(rèn)為COX-2產(chǎn)生的血栓素、前列腺素是形成新血管的必要因素，它們能夠誘導(dǎo)VEGF生成，增使血管通透性增加，并增血流量，同時(shí)還可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，從而促進(jìn)血管的生成。

在該研究中證實(shí)COX-2和HIF-1α與癌組織病理分期具有重要關(guān)系，COX-2在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為61.54%，晚期表達(dá)率為90.00%；HIF-1α在早期肺癌組中陽性表達(dá)率為80.77%，晚期為93.33%。而且MVD的強(qiáng)度COX-2和HIF-1α的陽性狀態(tài)的增強(qiáng)而增強(qiáng)。但研究發(fā)現(xiàn)COX-2和HIF-1α與癌組織的病理分型關(guān)系不大。由此可見COX-2和HIF-1α對(duì)于癌組織在缺氧狀態(tài)下血管的生成具有重要作用。而且對(duì)于新的有關(guān)影響癌組織血管生成的因素的研究也在繼續(xù)，在未來的抗腫瘤研究領(lǐng)域?qū)⒂懈嘤欣诎┌Y治療的方法出現(xiàn)。這就使得惡性腫瘤的治療希望越來越大。

綜上所述，對(duì)COX-2與HIF-1α的研究及其調(diào)控對(duì)于抑制腫瘤血管的生長方面擁有廣闊的前景及價(jià)值，在今后的抗腫瘤治療中勢(shì)必會(huì)成為新靶點(diǎn)。而COX-2與HIF-1α的相互影響及關(guān)系，也將成為治療腫瘤的有力依據(jù)。同時(shí)也替該院應(yīng)該繼續(xù)加大對(duì)其他有關(guān)其組織形成的基因的研究，以便于全面的綜合的對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行治療。

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