酸棗仁加鋅合劑對睡眠剝奪小鼠學習記憶能力的影響

崔 鍇 張紅石 張茂云 崔 淼 (吉林省公安邊防總隊白山支隊衛生隊，吉林 白山 34300)

中藥酸棗仁有促進睡眠、養心安神的效果〔1〕。微量元素鋅對睡眠剝奪造成的學習記憶能力下降有保護作用〔2〕。筆者自制酸棗仁加鋅合劑，從中藥飲食調護的角度，觀察其對健康小鼠睡眠剝奪后學習記憶能力的影響，為改善因工作原因長期處于睡眠剝奪的亞健康狀態人群職業能力和延長其職業壽命提供依據。

1 材料與方法

1.1 動物分組及給藥 健康昆明種小鼠80只(長春生物制品研究所有限責任公司，CSXK-(吉)2011-0007)，經篩選后(通過各項學習測試獲得學習能力者)，選出50只，雌性各半，體重18～22 g，隨機分成空白組(清水灌胃正常喂養)、模型組(造睡眠剝奪模型清水灌胃)、陽性組造睡眠剝奪模型、葡萄糖酸灌胃、低劑量組組(造睡眠剝奪模型、酸棗仁加鋅合劑灌胃，按人鼠比例換算0.1 ml/10 g給藥)、高劑量組(造睡眠剝奪模型、酸棗仁加鋅合劑灌胃，按人鼠比例換算0.2 ml/10 g給藥)，每組10只。灌胃時間為分組結束后、睡眠剝奪前，共給藥5 d，5 d后開始進入24 h睡眠剝奪。

1.2 主要儀器和藥品 儀器:BA-200避暗儀，香港萬科;DT-200小鼠跳臺儀，杭州雷琪;Morris水迷宮(MWM)視頻分析系統，成都泰盟。藥品:二氧化鈦(天津福辰，批號:20060220)、葡萄糖酸鋅(哈藥集團，批號:12030212)、酸棗仁(北京同仁堂，按人鼠比例生藥量1∶8進行煎煮，文火煎煮至藥液濃縮100 ml后待用)。酸棗仁加鋅合劑(每100 ml酸棗仁湯劑加100 ml含鋅35.3 mg的葡萄糖酸鋅)。

1.3 動物造模 采用改良多平臺睡眠剝奪法(MMPM)，在標準大鼠籠內倒入清水，水位平鋪布滿籠底，在籠底黏附10根直徑2 cm的方形木框。每籠10只小鼠，當小鼠進入睡眠狀態后會從木樁上掉落，因觸水而達到覺醒，進而完成睡眠剝奪造模。水溫控制在22℃ ～23℃，每天持續日光燈照射，持續24 h。

1.4 壁暗實驗〔3〕利用鼠類的嗜暗習性而設計。記錄反射建立過程中的主動回避反映指標來反映實驗動物的學習、記憶能力的變化。5 min內觀察指標潛伏期。

1.5 跳臺實驗〔4〕在一個底面可以通電的反射箱內放置一個絕緣的跳臺，當動物在訓練中受到電擊時，可以跳上跳臺逃避電擊，通過測試動物在平臺上的潛伏期測試記憶，從而反映實驗動物學習、記憶能力的變化。5 min內觀察潛伏期。

1.6 水迷宮實驗〔5，6〕MWM主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學習記憶能力。觀察指標包括潛伏期、總距離、平均速度、朝向角。

1.7 統計學方法 采用SPSS13.0軟件，各組數據以s表示，數據需經正態分布檢驗，方差齊性檢驗用Levene法，多組間差異的顯著性分析用單因素方差分析，方差齊時用LSD法。

2 結果

空白組與模型組相比，除平均速度外，其余參考值均有顯著差異(P＜0.05);藥物高劑量與低劑量組比較，潛伏期、朝向角等指標有顯著性差異(P＜0.05)，總距離、平均速度差異不明顯(P ＞0.05)。見表1。

表1 不同劑量酸棗仁加鋅合劑對24 h睡眠剝度小鼠水迷宮及避暗、跳臺潛伏期的影響( s，n=10)

表1 不同劑量酸棗仁加鋅合劑對24 h睡眠剝度小鼠水迷宮及避暗、跳臺潛伏期的影響( s，n=10)

與模型組比較:1)P＜0.05;與低劑量比較:2)P＜0.05

組別 潛伏期(s)總距離(cm)平均速度(cm/s)朝向角(°)避暗實驗(s)跳臺實驗(s)空白組 84.70 ±20.471) 1 368.77 ±318.301) 15.81 ±2.48 39.45 ±16.251) 281.0 ±46.51) 233.0 ±44.91)模型組 1 12.32 ±6.48 2 113.16 ±200.16 17.78 ±3.21 82.50 ±26.28 202.3 ±78.4 121.6 ±18.5陽性組 77.24 ±15.921) 1 665.73 ±518.601) 22.86 ±9.39 81.14 ±20.71 257.2 ±50.711) 158.3 ±50.7低劑量組 81.85 ±22.841) 1 502.53 ±318.211) 16.98 ±4.25 23.70 ±10.351) 268.0 ±15.491) 182.0 ±66.21)高劑量組 64.27 ±12.601)2) 1 450.48 ±403.101) 14.37 ±9.88 39.60 ±12.711)2) 282.0 ±12.01)2) 238.7 ±14.21)2)

3 討論

睡眠剝奪是指由于各種原因導致機體在一段時間內不能獲得效睡眠而出現的精神、心理、行為等多方面改變的病理狀態。醫護理人員在倒班過程中常出現睡眠剝奪狀態，輪班導致護士睡眠剝奪后，人體免疫系統功能下降，且睡眠質量越差，對其免疫系統功能影響越大。目前國內外常用干預睡眠剝奪的研究方法包括生活護理〔7〕、飲食、藥物護理、對癥護理〔8～11〕等，但均存在不同程度的不良反應。常用的觀察指標包括行為學觀察、腦電觀察、內分泌、免疫觀察、腦細胞觀察、細胞相關因子及蛋白觀察等〔12，13〕。

本實驗證明睡眠剝奪對小鼠記憶學習能力產生了負面影響;酸棗仁加鋅合劑可有效地改善睡眠剝奪狀態，提高或維持小鼠的學習記憶能力;劑量對干預效量產生影響，但高、低劑量藥效影響差異不穩定，這可能與樣本量不足有關。因此，本實驗在設計上考慮以后應加大樣本量。總之，本實驗表明，睡眠剝奪對小鼠學習記憶能力起到了負面作用，酸棗仁加鋅合劑可有效改善此狀態，且其劑量的增加與干預效果呈正相關。

1 李成芹.熱浸酸棗仁治療冠心病失眠患者60例護理體會〔J〕.泰山醫學院學報，2010;31(6):473-4.

2 陳 俊，李積勝，王華仁.鋅對睡眠剝奪大鼠學習記憶及大腦皮層一氧化氮合酶的影響〔J〕.解放軍預防醫學雜志，2005;32(2):89-91.

3 張詠梅，江智霞，王連紅.護理輪班導致睡眠剝奪對人體免疫功能的影響〔J〕.護理研究，2011;25(3):259-60.

4 袁力勇，戴體俊，蘇 珍.跳臺實驗訓練后小鼠自然遺忘時間的觀察〔J〕.徐州醫學院學報，2007;27(2):84-5.

5 王緒平，品登俊，陳 宇.Morris水迷宮實驗評價血管性癡呆大鼠模型的學習記憶能力〔J〕.中華中醫藥學刊，2013;31(1):99-100.

6 趙施施，張科學，包素紅.丙泊酚對幼小鼠自主活動和學習記憶行為的影響〔J〕.中國藥理學通報，2013;29(2):198-201

7 Horne JA，Donlon J，Arendt J.Green light attenuates melatonin output and sleepiness during sleep deprivation〔J〕.Sleep，1991;14(3):233-40.

8 胡 慶，楊麗軍，張山起.微量元素鋅對睡眠剝奪大鼠學習記憶保護機制的研究〔J〕.山西醫藥雜志，2008;37(5):405-6.

9 陳利華，胡幼平，羅 榮，等.電針百會、三陰交對睡眠剝奪大鼠體重的影響〔J〕.江西中醫學院學報，2008;1220(6):44-5.

10 陳利華，胡幼平，羅 榮，等.電針百會、三陰交對大鼠睡眠剝奪(SD)行為學的實驗研究〔J〕.浙江中醫藥大學學報，2010;434(4):567-70.

11 陳利華，胡幼平，羅 榮，等.電針百會、三陰交對大鼠睡眠剝奪細胞因子的影響〔J〕.上海針灸雜志，2009;28(11):678-81.

12 裴保萍，任安萍.剝奪睡眠與藥物誘導睡眠腦電圖對兒科發作性疾病的診斷價值〔J〕.當代醫學，2009;115(3):26-7.

13 曾 榮，邵淑麗，徐興軍，等.長期異相睡眠剝奪對大鼠能量代謝及血清甲狀腺素水平的影響〔J〕.中國應用生理學雜志，2010;26(1):105-8.