影響CXCL12/CXCR4在NSCLC中表達的相關性研究

劉華　黃杰　郭家龍　羅湘玉　劉斌　羅玲　張軍

【摘要】 目的 檢測CXCL12、CXCR4在非小細胞肺癌（NSCLC）組織及癌旁正常肺組織中的表達情況， 分析其陽性表達的意義及其陽性表達與NSCLC相關參數的聯系。方法 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。結果 NSCLC細胞CXCL12、CXCR4與NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率差異有統計學意義（P<0.05）；與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等差異有統計學意義（P<0.05）。結論 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中表達能夠促進NSCLC癌組織的浸潤、發展及轉移， 并且與縱隔淋巴結轉移有關；其表達是專一性的， 具有靶向性。

【關鍵詞】 CXCL12；CXCR4；非小細胞肺癌；免疫組織化學

Relevant research of influence on expression of CXCL12/CXCR4 in NSCLC LIU Hua， HUANG Jie， GUO Jia-long， et al. Department of Chest Heart Great Vessels Surgery， Hubei Shiyan City Taihe Hospital， Shiyan 442000， China

【Abstract】 Objective To detect the expression of CXCL12 and CXCR4 in non small cell lung cancer （NSCLC） and adjacent normal tissue， and to analyze the significance of their positive expression， and the correlation between positive expression and related NSCLC parameters. Methods Immunohistochemical staining method was applied to detect 62 cases of clinically diagnosed NSCLC and the normal lung tissue samples above 5 cm of the shortest path. Results There were statistically significant difference between the positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC and NSCLC adjacent normal tissue （P<0.05）. The positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC also had statistically significant difference with TNM period of NSCLC and mediastinal lymph node metastasis （P<0.05）. Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in NSCLC tissue can promote the infiltration， development and metastasis of NSCLC cancer tissue， and it is correlated with mediastinal lymph node metastasis. The expression has specificity and targeting feature.

【Key words】 CXCL12； CXCR4； Non small cell lung cancer； Immunohistochemistry

趨化因子（chemokines）是被最早發現與免疫細胞具有控制細胞向炎癥定向遷移的一類細胞因子， 在調控免疫細胞分化、發育及定向遷移過程中起重要作用。科研證明CCL2、CCL3、CCL4、CXCL13等19種趨化因子在癌組織中有表達[1]。其中， CCL5激活CCR1、CCR3、CCR5， 并在患者的腫瘤細胞中表達， 且在Ⅰ期肺腺癌中與患者生存率有關；抗CXCR1抗體使細胞增殖明顯降低， 但抗CXCR2抗體卻沒有此效應， 在CXCL8促肺癌有絲分裂功能主要是由CXCR1受體介導的。

CXCL12和CXCR4結合后可能參與非小細胞肺癌轉移的調節。趨化因子CXCL12與其特異性受體CXCR4相互作用而構成的一個與細胞間信息傳遞、細胞遷移有密切關系的偶聯分子對[2]。其實質在于CXCR4對其配體CXCL12的高度親和力和絕對特異性， 即CXCR4作CXCL12的專屬受體而存在。

1 材料與方法

1. 1 材料 收集本院胸心外科2011年9月～2013年2月臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本70例， 最終病理確診及納入本實驗標本62例。標本均行S-P法免疫組織化學染色。每張切片在顯微鏡下觀察10個高倍視野計數（×400）， 陽性細胞數≥10%為陽性（+）， 陽性數<10%為陰性（-）。陽性為細胞染色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀。

1. 2 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。

1. 3 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計學分析。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

CXCL12主要在NSCLC細胞胞漿中表達， 檢測到胞漿中色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀染色， 而NSCLC癌旁正常肺組織中信號相對很弱。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。而CXCR4主要在NSCLC癌細胞中表達， 其余指標相同。NSCLC細胞CXCR4的陽性表達33例， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達2例， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=6.742， P=0.035）。CXCL12、CXCR4的表達與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等有顯著相關性， 與性別、發病年齡、吸煙史、家族史、文化程度、組織學病理類型等差異無統計學意義。兩者表達陽性率隨TNM分期的升高而升高， Ⅲa～Ⅲb期表達率（90.9%）明顯高于Ⅱa～Ⅱb期（55.5%）， 差異有統計學意義（P<0.05）；CXCL12、CXCR4的陽性表達率在縱隔淋巴結轉移陽性表達率（94.7%）顯著高于縱隔淋巴結轉移陰性表達率（56.5%）， 表達差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

3. 1 CXCL12陽性表達分析 CXCL12是CXC族趨化因子中的成員， 其特點是分子內無谷-亮-精氨酸（ELR）基序。由組成骨髓基質細胞分泌并發揮對造血細胞的歸巢到骨髓的關鍵作用。CXCL12對T淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞等均有趨化作用。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。這說明NSCLC癌巢中有CXCL12表達。

3. 2 CXCR4陽性表達分析 趨化因子受體CXCR4屬于G蛋白耦聯7次跨膜受體， 廣泛表達在許多細胞表面。同CXCR1、CXCR2、CXCR3一樣， 在腫瘤組織中他們的表達直接或間接反應了腫瘤的生物學特性。但CXCR4的陽性表達是促癌還是抑癌效應， 則成為下一步將要進行的分析。

3. 3 CXCL12 與CXCR4的陽性表達與NSCLC臨床參數的分析 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中均一致性表達。縱隔淋巴結轉移與CXCL12、CXCR4陽性表達有關， 但CXCL12、CXCR4陽性表達在淋巴結轉移的機制所起的作用并不清楚。也就是說， 縱隔淋巴結發生轉移也有其他機制參與其中。CXCL12、CXCR4的陽性表達是專一性的， 是一對一的關系， 這使CXCL12與CXCR4結合后讓研究者專注于他們的通道研究， 這更具有靶向性。

參考文獻

[1] 耿華， 徐美林.趨化因子CXCL12/CXCR4在非小細胞肺癌中的表達.天津醫藥， 2012（3）：74-76.

[2] 周雯慧， 劉越.趨化因子受體CXCR7在人肺癌組織和肺癌細胞系的表達.中華臨床醫師雜志， 2013（17）：45-50.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 檢測CXCL12、CXCR4在非小細胞肺癌（NSCLC）組織及癌旁正常肺組織中的表達情況， 分析其陽性表達的意義及其陽性表達與NSCLC相關參數的聯系。方法 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。結果 NSCLC細胞CXCL12、CXCR4與NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率差異有統計學意義（P<0.05）；與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等差異有統計學意義（P<0.05）。結論 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中表達能夠促進NSCLC癌組織的浸潤、發展及轉移， 并且與縱隔淋巴結轉移有關；其表達是專一性的， 具有靶向性。

【關鍵詞】 CXCL12；CXCR4；非小細胞肺癌；免疫組織化學

Relevant research of influence on expression of CXCL12/CXCR4 in NSCLC LIU Hua， HUANG Jie， GUO Jia-long， et al. Department of Chest Heart Great Vessels Surgery， Hubei Shiyan City Taihe Hospital， Shiyan 442000， China

【Abstract】 Objective To detect the expression of CXCL12 and CXCR4 in non small cell lung cancer （NSCLC） and adjacent normal tissue， and to analyze the significance of their positive expression， and the correlation between positive expression and related NSCLC parameters. Methods Immunohistochemical staining method was applied to detect 62 cases of clinically diagnosed NSCLC and the normal lung tissue samples above 5 cm of the shortest path. Results There were statistically significant difference between the positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC and NSCLC adjacent normal tissue （P<0.05）. The positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC also had statistically significant difference with TNM period of NSCLC and mediastinal lymph node metastasis （P<0.05）. Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in NSCLC tissue can promote the infiltration， development and metastasis of NSCLC cancer tissue， and it is correlated with mediastinal lymph node metastasis. The expression has specificity and targeting feature.

【Key words】 CXCL12； CXCR4； Non small cell lung cancer； Immunohistochemistry

趨化因子（chemokines）是被最早發現與免疫細胞具有控制細胞向炎癥定向遷移的一類細胞因子， 在調控免疫細胞分化、發育及定向遷移過程中起重要作用。科研證明CCL2、CCL3、CCL4、CXCL13等19種趨化因子在癌組織中有表達[1]。其中， CCL5激活CCR1、CCR3、CCR5， 并在患者的腫瘤細胞中表達， 且在Ⅰ期肺腺癌中與患者生存率有關；抗CXCR1抗體使細胞增殖明顯降低， 但抗CXCR2抗體卻沒有此效應， 在CXCL8促肺癌有絲分裂功能主要是由CXCR1受體介導的。

CXCL12和CXCR4結合后可能參與非小細胞肺癌轉移的調節。趨化因子CXCL12與其特異性受體CXCR4相互作用而構成的一個與細胞間信息傳遞、細胞遷移有密切關系的偶聯分子對[2]。其實質在于CXCR4對其配體CXCL12的高度親和力和絕對特異性， 即CXCR4作CXCL12的專屬受體而存在。

1 材料與方法

1. 1 材料 收集本院胸心外科2011年9月～2013年2月臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本70例， 最終病理確診及納入本實驗標本62例。標本均行S-P法免疫組織化學染色。每張切片在顯微鏡下觀察10個高倍視野計數（×400）， 陽性細胞數≥10%為陽性（+）， 陽性數<10%為陰性（-）。陽性為細胞染色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀。

1. 2 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。

1. 3 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計學分析。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

CXCL12主要在NSCLC細胞胞漿中表達， 檢測到胞漿中色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀染色， 而NSCLC癌旁正常肺組織中信號相對很弱。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。而CXCR4主要在NSCLC癌細胞中表達， 其余指標相同。NSCLC細胞CXCR4的陽性表達33例， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達2例， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=6.742， P=0.035）。CXCL12、CXCR4的表達與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等有顯著相關性， 與性別、發病年齡、吸煙史、家族史、文化程度、組織學病理類型等差異無統計學意義。兩者表達陽性率隨TNM分期的升高而升高， Ⅲa～Ⅲb期表達率（90.9%）明顯高于Ⅱa～Ⅱb期（55.5%）， 差異有統計學意義（P<0.05）；CXCL12、CXCR4的陽性表達率在縱隔淋巴結轉移陽性表達率（94.7%）顯著高于縱隔淋巴結轉移陰性表達率（56.5%）， 表達差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

3. 1 CXCL12陽性表達分析 CXCL12是CXC族趨化因子中的成員， 其特點是分子內無谷-亮-精氨酸（ELR）基序。由組成骨髓基質細胞分泌并發揮對造血細胞的歸巢到骨髓的關鍵作用。CXCL12對T淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞等均有趨化作用。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。這說明NSCLC癌巢中有CXCL12表達。

3. 2 CXCR4陽性表達分析 趨化因子受體CXCR4屬于G蛋白耦聯7次跨膜受體， 廣泛表達在許多細胞表面。同CXCR1、CXCR2、CXCR3一樣， 在腫瘤組織中他們的表達直接或間接反應了腫瘤的生物學特性。但CXCR4的陽性表達是促癌還是抑癌效應， 則成為下一步將要進行的分析。

3. 3 CXCL12 與CXCR4的陽性表達與NSCLC臨床參數的分析 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中均一致性表達。縱隔淋巴結轉移與CXCL12、CXCR4陽性表達有關， 但CXCL12、CXCR4陽性表達在淋巴結轉移的機制所起的作用并不清楚。也就是說， 縱隔淋巴結發生轉移也有其他機制參與其中。CXCL12、CXCR4的陽性表達是專一性的， 是一對一的關系， 這使CXCL12與CXCR4結合后讓研究者專注于他們的通道研究， 這更具有靶向性。

參考文獻

[1] 耿華， 徐美林.趨化因子CXCL12/CXCR4在非小細胞肺癌中的表達.天津醫藥， 2012（3）：74-76.

[2] 周雯慧， 劉越.趨化因子受體CXCR7在人肺癌組織和肺癌細胞系的表達.中華臨床醫師雜志， 2013（17）：45-50.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 檢測CXCL12、CXCR4在非小細胞肺癌（NSCLC）組織及癌旁正常肺組織中的表達情況， 分析其陽性表達的意義及其陽性表達與NSCLC相關參數的聯系。方法 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。結果 NSCLC細胞CXCL12、CXCR4與NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率差異有統計學意義（P<0.05）；與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等差異有統計學意義（P<0.05）。結論 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中表達能夠促進NSCLC癌組織的浸潤、發展及轉移， 并且與縱隔淋巴結轉移有關；其表達是專一性的， 具有靶向性。

【關鍵詞】 CXCL12；CXCR4；非小細胞肺癌；免疫組織化學

Relevant research of influence on expression of CXCL12/CXCR4 in NSCLC LIU Hua， HUANG Jie， GUO Jia-long， et al. Department of Chest Heart Great Vessels Surgery， Hubei Shiyan City Taihe Hospital， Shiyan 442000， China

【Abstract】 Objective To detect the expression of CXCL12 and CXCR4 in non small cell lung cancer （NSCLC） and adjacent normal tissue， and to analyze the significance of their positive expression， and the correlation between positive expression and related NSCLC parameters. Methods Immunohistochemical staining method was applied to detect 62 cases of clinically diagnosed NSCLC and the normal lung tissue samples above 5 cm of the shortest path. Results There were statistically significant difference between the positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC and NSCLC adjacent normal tissue （P<0.05）. The positive expression of CXCL12， CXCR4 in NSCLC also had statistically significant difference with TNM period of NSCLC and mediastinal lymph node metastasis （P<0.05）. Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in NSCLC tissue can promote the infiltration， development and metastasis of NSCLC cancer tissue， and it is correlated with mediastinal lymph node metastasis. The expression has specificity and targeting feature.

【Key words】 CXCL12； CXCR4； Non small cell lung cancer； Immunohistochemistry

趨化因子（chemokines）是被最早發現與免疫細胞具有控制細胞向炎癥定向遷移的一類細胞因子， 在調控免疫細胞分化、發育及定向遷移過程中起重要作用。科研證明CCL2、CCL3、CCL4、CXCL13等19種趨化因子在癌組織中有表達[1]。其中， CCL5激活CCR1、CCR3、CCR5， 并在患者的腫瘤細胞中表達， 且在Ⅰ期肺腺癌中與患者生存率有關；抗CXCR1抗體使細胞增殖明顯降低， 但抗CXCR2抗體卻沒有此效應， 在CXCL8促肺癌有絲分裂功能主要是由CXCR1受體介導的。

CXCL12和CXCR4結合后可能參與非小細胞肺癌轉移的調節。趨化因子CXCL12與其特異性受體CXCR4相互作用而構成的一個與細胞間信息傳遞、細胞遷移有密切關系的偶聯分子對[2]。其實質在于CXCR4對其配體CXCL12的高度親和力和絕對特異性， 即CXCR4作CXCL12的專屬受體而存在。

1 材料與方法

1. 1 材料 收集本院胸心外科2011年9月～2013年2月臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本70例， 最終病理確診及納入本實驗標本62例。標本均行S-P法免疫組織化學染色。每張切片在顯微鏡下觀察10個高倍視野計數（×400）， 陽性細胞數≥10%為陽性（+）， 陽性數<10%為陰性（-）。陽性為細胞染色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀。

1. 2 采用免疫組織化學染色方法對臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標本62例進行檢測。

1. 3 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計學分析。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

CXCL12主要在NSCLC細胞胞漿中表達， 檢測到胞漿中色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網狀染色， 而NSCLC癌旁正常肺組織中信號相對很弱。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。而CXCR4主要在NSCLC癌細胞中表達， 其余指標相同。NSCLC細胞CXCR4的陽性表達33例， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達2例， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=6.742， P=0.035）。CXCL12、CXCR4的表達與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結轉移等有顯著相關性， 與性別、發病年齡、吸煙史、家族史、文化程度、組織學病理類型等差異無統計學意義。兩者表達陽性率隨TNM分期的升高而升高， Ⅲa～Ⅲb期表達率（90.9%）明顯高于Ⅱa～Ⅱb期（55.5%）， 差異有統計學意義（P<0.05）；CXCL12、CXCR4的陽性表達率在縱隔淋巴結轉移陽性表達率（94.7%）顯著高于縱隔淋巴結轉移陰性表達率（56.5%）， 表達差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

3. 1 CXCL12陽性表達分析 CXCL12是CXC族趨化因子中的成員， 其特點是分子內無谷-亮-精氨酸（ELR）基序。由組成骨髓基質細胞分泌并發揮對造血細胞的歸巢到骨髓的關鍵作用。CXCL12對T淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞等均有趨化作用。NSCLC細胞CXCL12的陽性表達率73.8%， NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達率15.0%， 兩者之間差異有統計學意義（χ2=8.135， P=0.027）。這說明NSCLC癌巢中有CXCL12表達。

3. 2 CXCR4陽性表達分析 趨化因子受體CXCR4屬于G蛋白耦聯7次跨膜受體， 廣泛表達在許多細胞表面。同CXCR1、CXCR2、CXCR3一樣， 在腫瘤組織中他們的表達直接或間接反應了腫瘤的生物學特性。但CXCR4的陽性表達是促癌還是抑癌效應， 則成為下一步將要進行的分析。

3. 3 CXCL12 與CXCR4的陽性表達與NSCLC臨床參數的分析 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中均一致性表達。縱隔淋巴結轉移與CXCL12、CXCR4陽性表達有關， 但CXCL12、CXCR4陽性表達在淋巴結轉移的機制所起的作用并不清楚。也就是說， 縱隔淋巴結發生轉移也有其他機制參與其中。CXCL12、CXCR4的陽性表達是專一性的， 是一對一的關系， 這使CXCL12與CXCR4結合后讓研究者專注于他們的通道研究， 這更具有靶向性。

參考文獻

[1] 耿華， 徐美林.趨化因子CXCL12/CXCR4在非小細胞肺癌中的表達.天津醫藥， 2012（3）：74-76.

[2] 周雯慧， 劉越.趨化因子受體CXCR7在人肺癌組織和肺癌細胞系的表達.中華臨床醫師雜志， 2013（17）：45-50.

[收稿日期：2014-08-26]