手足口病(HFMD)患兒細胞免疫及體液免疫變化及與病情預后的關系探討

武鳴鳳 李 秋 單洪際

吉林省結核病醫院，吉林長春 130500

手足口病(HFMD)是臨床常見的嬰幼兒傳染性疾病[1]。發病人群多為5 歲以下兒童，臨床癥狀主要有手、足、口腔等部位的皰疹或者是破潰性潰瘍等，少數患兒可引發腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發癥。近幾年來，HFMD 的發病率逐年升高，如何在發病早期進行有效評估并對重癥患兒危險性給予及時干預，改善患兒病情預后，一直的臨床研究的重點[2]。目前實驗室T 細胞亞群及免疫球蛋白等免疫學檢測指標，在一定程度上可有效反映HFMD 患兒的機體免疫狀態[3]。該次研究抽選2010年7月—2014年5月175 例HFMD 患兒，對其不同病程患兒血清免疫球蛋白指標及T 細胞亞群相關指標進行分析，并與健康患兒進行對比，旨在探討HFMD 患兒病情進展與細胞及體液免疫水平的關系，以及機體免疫水平在HFMD 患兒病情進展中的作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機抽選該院收治的175 例HFMD 患兒，診斷均符合《手足口病診療指南》[4]的診斷標準，其中男92 例，女83 例，年齡5 個月～8 歲，平均(2.85±1.07)歲；根據臨床表現和病情發展分型：輕癥型63 例，其中男42 例，女21 例，年齡5 個月～7 歲，平均(2.79±1.09)歲；重型60 例，其中男32 例，女28 例，年齡6 個月～8 歲，平均(2.83±1.05)歲；危重型52 例，其中男18 例，女34 例，年齡5 個月～7 歲，平均(2.80±1.11)歲；所有患者均未合并其他慢性疾病史，輕癥型組均治愈好轉，重型組病例中死亡3 例，危重型組死亡6例。同時抽選同期131 例健康體檢兒為對照組，其中男75 例，女60 例，年齡4 個月～7 歲，平均(2.88±1.06)歲；各組間性別、年齡比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 重型及危重型HFMD 患兒臨床特性

重癥均有如單純腦炎、腦炎合并肺炎及其他上呼吸道感染等并發癥。重型組指有發熱、皮疹以及神經系統受累癥狀，表現為嗜睡、肢顫、陣發性抽搞、易驚嚇等。危重型組臨床表現為持續性高熱（基礎體溫≥39.0℃），持續時間大約為2～7 d；病情危重，頻繁抽搐以及有嚴重意識障礙，亦有循環、呼吸系統受累癥狀。

1.3 檢測方法

各組患兒入院后2 h 內（未進行治療前）抽取靜脈血送檢。采用免疫比濁法、HITACHI7600 全自動特定蛋白分析儀檢測IgM、IgG、IgA 等體液免疫功能，試劑從ORION DIAGNOSTICA 公司（芬蘭）選購，采用BD FACSCalihur 型號的流式細胞儀（FCM）檢測CD3+、CD4+、CD8+等細胞免疫功能指標，取肝素抗凝新鮮全血1 mL,然后再50 μL 的樣品試管中分別加入10 μL 劑量的相應單克隆抗體，充分混勻后室溫避光放置15 min，采用PACS 做溶血，FCM 分>10 000 個細胞，儀器和試劑購自BD Biosciences公司（美國）。

表1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標比較（±s）

表1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標比較（±s）

項目HFMD 患兒健康對照組t 值P 值體液免疫（g/L）IgMIgGIgA細胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.76±0.34 0.77±0.29 26.81<0.05 8.27±1.63 7.18±1.68 5.71<0.05 0.59±0.19 0.45±0.22 5.96<0.05 48.19±9.21 66.29±10.05 16.23<0.05 27.71±5.19 39.09±6.01 17.73<0.05 20.63±7.73 26.77±8.74 6.50<0.05

表2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標比較（±s）

表2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標比較（±s）

項目輕癥型組重型組危重型組F 值P 值體液免疫（g/L）IgMIgGIgA細胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.39±0.35 1.71±0.35 2.07±0.33 4.36<0.05 7.38±1.68 10.72±2.21 15.69±2.55 4.01<0.05 0.53±0.38 0.63±0.31 0.92±0.33 3.52<0.05 58.48±7.86 48.93±8.15 41.33±7.94 10.35<0.05 32.09±6.01 27.41±6.49 22.28±5.495 5.89<0.05 22.77±3.34 20.21±3.52 15.71±3.11 3.78<0.05

1.4 觀察指標

包括各組患兒臨床一般情況、表現、病情變化、體液免疫(IgM、IgG、IgA)及細胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+)結果，判斷疾病預后。

1.5 統計方法

采用SPSS17.0 軟件對數據進行統計分析，計量資料以（±s）表示，兩組間采用t 值檢驗，3 組均數采用F 值檢驗。

2 結果

2.1 HFMD 患兒與健康對照組各免疫指標比較

HFMD 患兒細胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T 細胞亞群）水平均顯著低于健康對照組（P<0.05）；體液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明顯高于健康對照組（P<0.05），比較差異有統計學意義（P<0.05）；見表1。

2.2 HFMD 患兒不同病情程度各免疫指標比較

隨著病情嚴重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒的CD3+、CD4+、CD8+水平不斷降低，IgM、IgG、IgA 水平升高，3 組比較差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

3 討論

手足口病(HFMD)是因感染腸道2 病毒而導致的一種傳染性疾病，可引發HFMD 的腸道病毒多達20 多種類型，其中以Cox-A16 及EV71 最為常見。多數患兒感染HFMD 后預后良好，有少部分重癥患兒可并發腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發癥，個別重癥患兒由于病情發展快速，搶救無效而發生死亡。有學者[5]認為HFMD 的病情轉歸與人體免疫功能可能存在重要相關性。

目前，臨床通常采用T 細胞亞群測定來準確判斷病人機體細胞免疫功能。越來越多的研究[6-7]表明，T 細胞在人體腸道病毒感染后起著重要的免疫介導作用，可釋放出多種細胞因子，在機體抗感染、抗病毒感染免疫應答機制中發揮重要作用。CD4+、CD8+能夠調節T 細胞的免疫功能，其中CD4+對B 淋巴細胞分化功能具有調節作用，刺激產生抗體；而CD8+對抗體合成以及分泌具有抑制作用，同時可抑制T 細胞增殖，兩者的協調作用使機體免疫應答維持正常。T 細胞亞群中的CD3+表達水平代表外周血成熟T 細胞總數，CD3+可通過向T 細胞內傳導TCR 雙識別信號而促進T 細胞活化，分布于所有活化T 細胞表面。CD4+又稱為Th 細胞，是一種輔助誘導性T 細胞亞群，CD4+上的TCR 能夠識別出抗原肽-II 類分子復合物，從而參與Th2 細胞激活。CD8+是一種抑制性(Ts)以及細胞毒性(Tc)細胞亞群，可識別并結合抗原肽-II 類分子，激活細胞毒性T 細胞。CD4+與CD8+的比值能夠反映出Th 與Tc 功能間的動態平衡狀態，是機體免疫內環境穩定的一項最重要的監測指標，其比值下降，則表示機體免疫力下降[8]。該研究HFMD 患兒細胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T細胞亞群）水平均顯著低于健康對照組（P<0.05），并且CD4+下降程度高于CD8+，因此CD4+/CD8+比值降低。提示HFMD 患兒機體活化的T 淋巴細胞明顯較少，免疫功能下降，病毒入浸及發病幾率增大，出現了細胞免疫功能紊亂。并且表2 還顯示隨著病情嚴重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒的CD3+、CD4+、CD8+水平不斷降低（P<0.05），說明感染HFMD 病毒后，隨著病情加重，患兒細胞免疫功能進一步下降。可能是因為重癥HFMD 患兒免疫應答更為強烈，在機體免疫保護、恢復疾病的同時，可能造成的免疫損傷更為嚴重，使部分患兒向危重癥型進展。

免疫球蛋白可使體液免疫增強，IgA、IgG 能夠增強巨噬及NK 細胞的免疫吞噬功能，IgA 通過經典途徑還能對補體系統產生激活作用，使得機體免疫應答反應明顯增強。有研究顯示，HFMD 患兒體液免疫亢進，并且同病情程度存在相關相關性，重癥患兒體液免疫亢進表現更為明顯，可能與HFMD 患兒機體防御有關。本研究中，HFMD 患兒體液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明顯高于健康對照組（P<0.05）；提示HFMD 患兒體液免疫功能被激活，出現了強烈的免疫反應。并且隨著病情嚴重程度的加重，輕癥型、重型、危重型患兒IgM、IgG、IgA 水平不斷升高，3 組比較差異有統計學意義（P<0.05）。田健美等研究報道顯示輕癥組和重、危重癥組HFMD 患兒的IgA、IgG、IgM 水平存在明顯異常；而輕癥組與重、危重癥組兩組對比差異有統計學意義(P<0.05)；危重癥組各項免疫球蛋白表達水平高于輕癥組（P<0.05），與該研究結果相一致（P<0.05）。提示HFMD 患兒體液免疫指標增加要引起臨床的高度重視，可能將要進一步向危重癥發展，需及早進行治療干預。

綜上所述，HFMD 患兒尤其是有腦炎合并癥的重癥患兒會出現顯著的細胞及體液免疫功能低下及調節紊亂，與疾病嚴重程度存在相關性。

[1]周杰林.不同病程的手足口病患兒體液免疫狀況分析[J].現代實用醫學,2012,24(8):883-885.

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[3]亞敏，王春妍，宋立文，等.手足口病患兒體液免疫檢測分析[J].臨床和實驗醫學雜志，2009,8(8):73-74.

[4]胡淑琴，李娜，王緒韶，等.手足口病患兒免疫球蛋自及補體檢測的臨床意義[J].中國中西醫結合兒科雜志，2012,4(5):433-434.

[5]李振華，周濤.手足口病患兒體液免疫功能與病情轉歸的關系[J].中國中西醫結合兒科學,2010,2(6):510-511.

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[8]趙青,康麗敏,孫晉芳,等.560 例手足口病患兒細胞免疫的變化[J].中國醫師雜志,2013,15(11):1515-1518.