氣相檢測(cè)中微量注射器的清潔方法探討

梁 毅，魏默涵

（中國(guó)藥科大學(xué)國(guó)際醫(yī)藥商學(xué)院，江蘇南京 210009）

0 引言

微量注射器可用于手動(dòng)進(jìn)樣的氣相色譜儀中，每次使用之后都需要清洗，既防止殘留對(duì)注射器造成堵塞，又防止影響下一次氣相測(cè)定的結(jié)果。一般使用可溶解樣品的有機(jī)溶劑等進(jìn)行清洗。由于樣品的極性不同，有機(jī)溶劑性質(zhì)不同，故而為保證清潔完成，必須對(duì)清潔方法進(jìn)行摸索，主要包括使用溶劑與清潔次數(shù)。本文旨在探討注射器清洗的方法。

1 氣相手動(dòng)進(jìn)樣器概述

醫(yī)藥行業(yè)中，氣相色譜儀是原材料、中間體及藥品成品檢測(cè)所用到的最普遍的儀器之一。從進(jìn)樣方式來(lái)說(shuō)，可以分為自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣。目前來(lái)看，氣相色譜儀手動(dòng)與自動(dòng)進(jìn)樣方法都比較普遍。而使用手動(dòng)進(jìn)樣儀器時(shí)，微量注射器會(huì)被選擇作為進(jìn)樣器使用，其廣泛應(yīng)用于熱穩(wěn)定的氣體和沸點(diǎn)一般在500℃以下的液體樣品的分析。用于氣相色譜分析的微量注射器種類(lèi)很多，可根據(jù)樣品性質(zhì)選用不同的注射器。筆者所在單位所使用微量注射器是尖頭，規(guī)格是10μL。

微量注射器在使用時(shí)有一些注意事項(xiàng)。首先，要避免觸摸針筒，防止體溫對(duì)內(nèi)容物產(chǎn)生熱傳遞。其次，在進(jìn)樣時(shí)，要將氣泡全部擠出后，才能注射，否則會(huì)損壞儀器。微量注射器的使用壽命取決于其清潔方法，包括使用溶劑與清潔次數(shù)。一般來(lái)說(shuō)，會(huì)選取能夠使內(nèi)容物溶解的合適的有機(jī)溶劑，如丙酮、甲醇等，每次使用完，用該有機(jī)溶劑清洗一定次數(shù)，至樣品在注射器內(nèi)無(wú)殘留。

本文所涉及的微量注射器清潔方法事實(shí)上也適用于自動(dòng)進(jìn)樣的儀器，在工作站中進(jìn)行設(shè)定即可。

2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.1 使用溶劑的討論

若是固體樣品，進(jìn)樣時(shí)需要用合適的溶劑將其溶解后方可，至少要求樣品在該溶劑中具有一定的溶解性，選擇清洗溶劑時(shí)，可以選擇該溶劑；若該溶劑對(duì)注射器具有腐蝕性或本身具有粘性，必須選取另一種無(wú)腐蝕性、無(wú)粘性溶劑清洗。

若是液體樣品，可以直接進(jìn)樣。除非該樣品會(huì)對(duì)針體造成腐蝕或者本身具有粘性，導(dǎo)致針體粘連影響注射器的使用壽命。如果溶劑無(wú)以上情況則可以選擇不清洗，或者選擇無(wú)毒且易揮發(fā)的無(wú)水乙醇作為清洗溶劑。

2.2 清洗次數(shù)的探討

在進(jìn)行清潔次數(shù)的探討時(shí)，筆者設(shè)計(jì)了一個(gè)小實(shí)驗(yàn)，以此來(lái)研究可以完全清洗干凈的最少洗針次數(shù)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：在本實(shí)驗(yàn)中，選取的樣品是檸檬酸，在處理前為固體，選用甲醇作為溶劑。取少量樣品溶于甲醇中，配制成約0.1g/mL 的溶液，待用。再按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作。由于在進(jìn)行氣相分析時(shí)，樣品的要求濃度一般較小，于是本實(shí)驗(yàn)在設(shè)計(jì)時(shí)，將濃度擴(kuò)大到了原本液體進(jìn)樣的，并沒(méi)有選取多次實(shí)驗(yàn)的平均值，而是選取了結(jié)果最差的一組，因?yàn)楣P者認(rèn)為，在“最劣工況下”所進(jìn)行的清潔可以完全，那么其他條件下也同樣沒(méi)有問(wèn)題。

原理：無(wú)論濃度多少，檸檬酸的出峰時(shí)間不變

溶劑：甲醇

樣品：檸檬酸

儀器：氣相：Agilent 7890A

微量注射器：10μL

進(jìn)樣量：0.4μL

運(yùn)行時(shí)間：20min

實(shí)驗(yàn)方法：（1）用甲醇將注射器潤(rùn)洗10～20 次后，將空白樣甲醇進(jìn)一針，獲得空白樣圖譜BLANK（見(jiàn)圖1）；（2）取樣品，潤(rùn)洗10～20 次后進(jìn)一針，獲得樣品圖譜NMS（見(jiàn)圖2）；（3）用該溶劑沖洗注射器10 次、20 次、30 次、40 次后，分別進(jìn)樣，獲得4個(gè)圖譜，編號(hào)為RINSE-A，RINSE-B，RINSE-C，RINSE-D（見(jiàn)圖3-6）。

實(shí)驗(yàn)分析：觀察NMS 中檸檬酸的出峰時(shí)間，在4.1 與4.7min處分別有2 個(gè)較大峰，面積分別為993.7 與236.7，將RINSE 的4 個(gè)圖譜按照X 軸表示清洗次數(shù)RINSE-A，RINSE-B，RINSE-C，RINSE-D，Y 軸表示主要峰面積繪制表格，得到圖7。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：選用合適的溶劑進(jìn)行清洗，由圖7 可以看出，沖洗30 次已經(jīng)接近完全洗凈，40 次可以完全洗凈。

圖1 BLANK

圖2 NMS

圖3 RINSE-A

圖4 RINSE-B

圖5 RINSE-C

3 結(jié)論

根據(jù)所進(jìn)行實(shí)驗(yàn)可以得出結(jié)論，選擇溶劑時(shí)，應(yīng)選擇對(duì)注射器無(wú)腐蝕性，本身無(wú)粘性的，且正常情況下固體樣品在該溶劑中溶解性至少為可溶；液體樣品可以不清洗或用無(wú)水乙醇，筆者建議使用無(wú)水乙醇。用所選擇的溶劑進(jìn)行清洗時(shí)，沖洗20～30 次即可清洗干凈，建議次數(shù)為30～40 次，防止操作不當(dāng)引起誤差等。分析人員進(jìn)行工作時(shí)，需要注意這些細(xì)微之處，不能用感覺(jué)來(lái)判斷是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。故而，遇到新物質(zhì)、新溶劑或者新的分析方法時(shí)，微小之處如清洗自動(dòng)進(jìn)樣器方法也需要進(jìn)行科學(xué)的摸索，形成規(guī)范性、有依據(jù)的操作流程。注意細(xì)節(jié)才能做好分析工作。

圖6 RINSE-D

圖7 峰面積隨時(shí)間變化