血清人附睪蛋白4和糖類抗原125對診斷上皮性卵巢癌的比較研究

摘要：目的 比較人附睪蛋白4（HE4）與糖類抗原125（CA-125）對診斷上皮性卵巢癌的臨床應用價值。方法 分別采用酶聯免疫法和電化學發光法檢測32例上皮性卵巢癌和62例良性卵巢腫瘤患者（良性組）血清HE4及CA-125水平，ROC曲線比較分析二者對上皮性卵巢癌診斷的準確性。結果 卵巢癌患者血清HE4及CA-125水平中位數顯著高于良性組（P<0.05）；良性組中卵巢子宮內膜異位癥患者的CA-125水平中位數顯著高于其他良性腫瘤患者（P=0.03），但HE4無明顯變化（P=0.49）。ROC曲線分析顯示，HE4和CA-125對卵巢癌的最佳診斷切點分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL；血清HE4、CA-125用于卵巢癌診斷時ROC曲線下面積分別為0.93、0.85，兩者比較有顯著性差異。結論 與CA-125相比，HE4對診斷上皮性卵巢癌具有更好的準確性和可信度。

關鍵詞：附睪蛋白4；糖類抗原125；上皮性卵巢癌；比較研究

卵巢癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，起病隱匿，早期臨床癥狀不明顯。據2003～2007年我國腫瘤登記地區資料表明，城鄉卵巢癌發病率和死亡率均呈上升趨勢[1]。但卵巢癌若能被早診斷和早治療，則患者的5年生存率可升高至94%[2]。因此，尋找有效的早期診斷卵巢癌的血清腫瘤標志物有極其重要的意義。目前，卵巢癌術前診斷和病情監測的首選血清標志物是糖類抗原125（CA-125），但特異性低，限制了其臨床應用。人附睪蛋白4（HE4）是近年來國內外卵巢癌研究的熱點，但有報道[3，4]，HE4不僅在卵巢癌組織表達，在其他腫瘤如肺腺癌、腎癌、胰腺癌等也有表達。為了明確血清HE4對卵巢癌的診斷意義，本研究擬通過比較患者血清HE4和CA-125水平變化及二者的診斷敏感度和特異性，進而闡述HE4在卵巢癌早期診斷的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年12月～2013年8月本院婦產科收治的卵巢疾病患者為研究對象。納入標準：所有患者經細胞和病理學確診，并按國際婦產科聯盟（ FIGO，2000年）修訂的手術-病理標準進行分期；除卵巢腫塊無其他婦科疾病；在6個月內未接受過任何激素類或免疫抑制劑類藥物的治療；心、肝、肺、腎等重要臟器無異常；本人和家屬知情、同意，并經醫院倫理委員會批準。

1.2病例資料 納入病例為94例，分卵巢癌組和良性卵巢腫瘤組（ 良性組）。其中上皮性卵巢癌患者32例，年齡29～71歲，平均40.5歲，包括漿液性囊腺癌16例、透明細胞癌5例、黏液性囊腺癌5例、混合型上皮癌4例、子宮內膜樣癌2例，Ⅰ-Ⅳ期分別為6、4、20、2例；良性卵巢腫瘤患者62例，年齡26～71歲，平均年齡39.1歲，包括卵巢子宮內膜異位癥23例、成熟畸胎瘤16例、黏液性囊腺瘤8例、漿液性囊腺瘤8例、非特異性腫瘤7例。兩組在年齡上比較差異無顯著性（P>0.05）。

1.3方法 所有標本在患者未經任何檢查治療前采集，常規分離血清，儲存-20℃冰箱待測。血清HE4采用酶聯免疫法（ELISA）測定，試劑購自美國富吉瑞必歐診斷公司。血清CA-125采用羅氏E170電化學化光免疫分析儀及其配套試劑測定。上述操作均嚴格按照試劑盒和儀器說明書進行。

1.4統計學處理 采用SPSS17.0完成所有統計學處理，本組數據不服從正態分布，計量資料采用中位數（間距）表示，組間計量資料中位數的比較采用符號秩和檢驗，認為P<0.05有統計學意義。繪制ROC曲線，確定HE4和CA-125的診斷臨界點，并比較兩者的ROC下面積（AUC）。

2 結果

2.1血清HE4和CA-125水平比較 卵巢癌患者的HE4和CA-125水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者（CA-125： 394.1 U/mL vs. 22.7 U/mL； HE4： 56.7pmol/L vs. 18.5pmol/L； P<0.05）；良性組內卵巢子宮內膜異位癥（內異癥）患者的CA-125水平明顯高于其他良性腫瘤患者（31.95 U/mL vs. 17.9 U/ mL， P=0.03），而HE4水平無明顯變化（19.0pmol/L vs. 18.2pmol/L， P=0.49）；但卵巢癌患者的HE4和CA-125水平均明顯高于卵巢子宮內膜異位癥患者（CA-125， P=0.004； HE4， P=0.001）。見表1。

2.2血清CA-125和HE4的ROC分析比較 本研究以良性卵巢腫瘤組CA-125和HE4的ROC下面積（AUC）為參照，則卵巢癌組CA-125和HE4的相對ROC下AUC分別為0.85、0.93，兩者比較差異有顯著性（P<0.001）；計算Youden指數，以Youden指數最大的切點為臨界點，此時，HE4和CA-125對卵巢癌的最佳診斷切點分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL，及其對應的靈敏度和特異度分別為78.1%、86.5%和84.4%、67.4%。見表2、圖1。

圖1 HE4和CA-125診斷卵巢癌的ROC曲線

3 討論

由于卵巢的胚胎發育、組織解剖及內分泌功能較復雜，早期癥狀、體征不典型，并且各項輔助檢查亦難以發現小的病灶，錯過了最佳治療時間，所以發現的時候大多數患者已處于晚期、死亡率高而被稱為\"安靜的\"殺手[5]。提高早期診斷率是決定卵巢癌患者生存率最重要的因素，研究資料表明[6]，卵巢癌局限于子宮時5年生存率為70%～82%，然而，大多數卵巢癌患者診斷時已處在疾病的進展期，5年生存率僅為15%。

在卵巢癌的診斷中，血清腫瘤標志物的檢測具有簡便、創傷小且客觀的優點，在腫瘤篩查、診斷、復發檢測及療效判斷等方面應用廣泛。目前卵巢癌早期診斷的腫瘤標志物主要是CA-125，盡管CA-125在卵巢癌的的診斷中已得到肯定，但是易受其他婦科良性疾病，如子宮內膜異位癥、卵巢良性腫瘤、盆腔炎、早孕、剖腹探查等影響。另外，有資料表明[7，8]，約40%～50%早期卵巢癌的CA125水平不增高，所以CA-125面臨的一個首要的問題就是對于早期卵巢癌的敏感性過低和假陽性高。本研究結果顯示，卵巢癌患者的CA-125水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者（394.1 U/mL vs. 22.7 U/mL P<0.05），但是良性組內卵巢子宮內膜異位癥（內異癥）患者的CA-125水平明顯高于其他良性腫瘤患者（31.95 U/mL vs. 17.9 U/ mL， P=0.03），誤診率高達32.6%，，給良性疾病患者甚至是健康人帶來不必要的精神和經濟負擔以及不必要的侵入性檢查引起的創傷。因此，尋求靈敏度和特異度均高的卵巢癌血清腫瘤標志物是臨床的迫切需要。

HE4是由Kirchhoff在人附睪上皮內發現，該基因表達的是一種酸性蛋白質。研究表明，HE4在卵巢癌組織中高表達，而在癌旁組織、正常組織及良性腫瘤中低表達[9，10]。 Montagnana等[9]將HE4用于鑒別良、惡性盆腔包塊，對40例患有良性盆腔包塊的患者和99例患有婦科腫瘤的患者及12例健康對照者進行CA125 和HE4血清分析， 結果發現：CA125 和HE4血清水平的中位數值在卵巢癌中遠遠高于健康對照者和良性疾病患者，HE4的敏感性和特異性均高于CA125。羅兆芹等[10]應用隨機效應模型分析，結果顯示HE4診斷卵巢癌的敏感性為75%，95%可信區間為0.68～0.81；特異性為0.95，95%可信區間為0.93～0.97；陽性預測值為0.89，95%可信區間為0.84～0.95；陰性預測值為0.86，95%可信區間為0.81～0.90。說明HE4作為卵巢癌標志物應用于臨床是有前途的。本組數據表明，卵巢癌患者的HE4明顯高于良性卵巢腫瘤患者（HE4： 56.7pmol/L vs. 18.5pmol/L； P<0.05）；良性組內卵巢子宮內膜異位癥（內異癥）患者的HE4水平與其他良性腫瘤患者無明顯變化（19.0pmol/L vs. 18.2pmol/L， P=0.49）。通過繪制ROC曲線，發現以良性卵巢腫瘤組CA-125和HE4的ROC下面積（AUC）為參照，則卵巢癌組CA-125和HE4的相對ROC下AUC分別為0.85、0.93，兩者比較差異有顯著性（P<0.001）；HE4比CA-125對卵巢癌的具有更高的診斷價值，同時，計算Youden指數，以Youden指數最大的切點為臨界點，此時，HE4和CA-125對卵巢癌的最佳診斷切點分別為76.0pmol/L、37.45 U/mL，及其對應的靈敏度和特異度分別為78.1%、86.5%和84.4%、67.4%。兩者相比，雖然HE4靈敏度略低于CA-125，但其特異度遠遠高于CA-125，診斷效能得到大大提高，對臨床應用也具有更具體的指導意義。因而，HE4相對于CA-125而言，在卵巢癌的早期診斷上具有更為廣泛的前景。

參考文獻：

[1]楊念念，嚴亞瓊，龔潔.中國2003-2007 年卵巢癌發病與死亡分析[J].中國腫瘤，2012，21 （6）：401-405.

[2]袁嘉玲，段瑞岐，郄明蓉.應用受試者工作特征曲線分析人附睪蛋白4和糖鏈抗原-125聯合檢測對卵巢癌的診斷價值[J/CD].中華婦幼臨床醫學雜志，電子版，2012，8（2）：155-158.

[3]Shin Hye Chung， Soo Yoon Lee， Woong Ju， et al. Clinical efficacy of serum human epididy- mis protein 4 as a diagnostic biomarker of ovarian cancer： A pilot study[J]. Obstet Gynecol Sci， 2013，56（4）：234-241.

[4]Galgano MT， Hampton GM， Frierson HF Jr. Comprehensive analysis of HE4 expression in normal and malignant human tissues[J]. Mod Pathol， 2006，19（6）：847-853.

[5]陳芳芳，任平，于宏，等.血清FS及CA125用于卵巢癌診斷的比較研究[J].中國實驗診斷學，2012，16（8）：1410-1413.

[6]Brown PO， Palmer C. The preclinical natural history of serous ovarian cancer： defining the target for early detection[J]. Plos Med， 2009，6（7）：e1000114.

[7]Medeiros LR， Rosa DD， da Rosa MI， et al. Accuracy of CA-125 in the diagnosis of ovarian tumors：A quantitative systematic review[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol，2009，142（2）： 99-105.

[8]Jacobs I， Bast RC Jr. The CA 125 tumour-associated antigen： a review of the literature[J]. Hum Reprod，1989，4（1）：1- 12.Cancer Res，2005，65（6）：2162-2169.

[9]Montagnana M， Lippi G， Ruzzenente O， et al. The utility of serum human epididymis protein 4 （HE4）in patients with a pelvic mass[J].J Clin Lab Anal，2009，23（5）：331-335.

[10]羅兆芹，李力.卵巢癌診斷中血清人附睪分泌蛋白4 檢測價值的Meta分析[J].循證醫學，2012，12（3）：163-168.

編輯/哈濤