MTS1在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)研究

張 艷 劉 玲 諶宏鳴

（新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊830011）

0 引言

食管癌是我國常見的惡性腫瘤之一，在癌癥死亡原因居第5位。在食管癌高發(fā)區(qū)的發(fā)病率和死亡率仍維持在較高水平。呂秀平等[1]建立了食管鱗狀癌細(xì)胞和食管正常上皮細(xì)胞的雙向凝膠電泳2-DE圖譜,獲得了43個差異蛋白點(diǎn),發(fā)現(xiàn)其中15種蛋白例如Gstp、HnRNPA2/B1、HSP27等在食管鱗狀癌細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào)[1]。Zhang[2]等也發(fā)現(xiàn)食管鱗狀癌組織中Bmi-1蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。多腫瘤抑制基因(multiple tumor suppressor，MTS1)，是近年來發(fā)現(xiàn)的一個重要的抑癌基因，在細(xì)胞周期中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。本課題應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測60例食管鱗狀細(xì)胞組織中MTS1的表達(dá),并應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析表達(dá)與臨床病理學(xué)指標(biāo)的意義。

1 材料和方法

1.1 材料

收集新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2012年1月-2014年9月經(jīng)手術(shù)切除,并且病理診斷確診為食管鱗狀細(xì)胞癌的組織60例,分化程度I級(高分化)、Ⅱ級(中分化)、Ⅲ級(低分化)例數(shù)分別為：23、28、9例。腫瘤有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例19例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例41例。另外選取10例正常癌旁組織。收集病例獲取所有患者性別、年齡、民族等基本信息,建立完整的數(shù)據(jù)資料,并由兩位高年資經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師指導(dǎo)收集病理標(biāo)本、閱片。這項(xiàng)研究通過本院的醫(yī)學(xué)倫理委員會審查,向研究中涉及的參與人員解釋,并簽署知情同意文件。

1.2 試劑

本研究所用抗體腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因MTS1為兔抗人多克隆抗體，產(chǎn)品編號分別為RAB-0144，所用試劑購自福州邁新生物技術(shù)公司。

1.3 MTS1檢測

采用SP免疫組織化學(xué)三步法進(jìn)行MTS1檢測,步驟嚴(yán)格按照試劑盒操作說明。

1.4 MTS1陽性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)胞漿或細(xì)胞膜或細(xì)胞核呈現(xiàn)棕黃色染色時即為陽性，陰性：無陽性著色；陽性：陽性細(xì)胞占l～10%：強(qiáng)陽性：陽性細(xì)胞ffgt;l0%。

2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析處理數(shù)據(jù),分析分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況.用χ2檢驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05.Pfflt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 不同分化程度食管鱗狀細(xì)胞癌組織中MTS1的表達(dá)結(jié)果

表1 不同分化程度食管鱗狀細(xì)胞癌組織中MTS1的表達(dá)

從表1可以看出，食管鱗狀細(xì)胞癌組織中，不同分化程度I級、II級、Ⅲ級MTS1的陽性表達(dá)檢出率分別為17.4%、32.1%和66.6%。三者比較，Pfflt;0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性，隨著分化程度的惡化，MTS1的陽性表達(dá)反而升高。

3.2 食管鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與MTS1表達(dá)的關(guān)系

表2 食管鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與MTS1表達(dá)的關(guān)系

表2顯示，食管鱗狀細(xì)胞癌組織中，有和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移MTS1的陽性表達(dá)檢出率分別為73.7%和12.2%，兩者比較，Pfflt;0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的晚期食管鱗狀細(xì)胞癌組織中MTS1的陽性表達(dá)率高。

4 討論

MTSl是Kamb等[3]首次報(bào)道的一種新的抗癌基因。MTSl位于人第九號染色體短臂上，由3個外顯子和兩個內(nèi)含子組成，外顯子序列能編碼一種細(xì)胞周期素依賴性激酶CDK的抑制蛋白p16。據(jù)報(bào)道MTSl/p16基因的突變和缺失廣泛存在于人類多種腫瘤組織及腫瘤細(xì)胞株中。研究顯示,MTS1在肺癌中有異常表達(dá)[4]，前列腺癌[5]等組織中也有高表達(dá)。

在本研究中，食管鱗狀細(xì)胞癌組織有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組MTS1的陽性表達(dá)檢出率高。不同分化程度I級、II級、Ⅲ級的食管鱗狀細(xì)胞癌組織MTS1的陽性表達(dá)檢出三者比較，分化程度高者，表達(dá)低，隨著組織學(xué)分級由高到低以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生，MTS1的陽性率呈高表達(dá)，未能證實(shí)其對腫瘤抑制作用，可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理學(xué)分級無關(guān)，也可能與入選例數(shù)少，入組低分化例數(shù)少(9／60)有關(guān)，此項(xiàng)結(jié)果在國內(nèi)外報(bào)道不一,需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在不同分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間的表達(dá)有顯著差異,提示MTS1可能與食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),對其進(jìn)一步研究有望成為食管鱗狀細(xì)胞癌早期診斷的參考指標(biāo)，為今后研究食管癌分子診斷標(biāo)記物、靶基因治療、預(yù)后監(jiān)測等研究奠定基礎(chǔ)。

［1］呂秀平,蒲紅偉,龔曉瑾,苗娜,陳曉.MALDI-TOF-MS分析新疆食管鱗狀細(xì)胞癌的蛋白組學(xué)[J].世界華人消化雜志.2011,19(36)：3682-3686.

［2］Zhang Y,Zhang YL,Chen HM,Pu HW,Ma WJ,Li XM,Ma H,Chen X.Expression of Bmi-1 and PAI-1 in esophageal squamous cell carcinoma[J].World JGastroenterol.2014;14;20(18)：5533-9.

［3］Kamb A，Gruis NA，Wearer Feldhaus J，et a1.A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor type[J].Science,1994,264：436.

［4］Dempsie Y,Nilsen M,White K,Mair KM,Loughlin L,Ambartsumian N,Rabinovitch M,Maclean MR.Development of pulmonary arterial hypertension in mice over-expressing S100A4/Mts1 is specific to females[J].Respir Res.2011,20;12：159.

［5］Ameri A,Alidoosti A,Hosseini SY,Parvin M,Emranpour MH,Taslimi F,Salehi E,Fadavip P.Prognostic Value of Promoter Hypermethylation of Retinoic Acid Receptor Beta(RARB)and CDKN2(p16/MTS1)in Prostate Cancer[J].Chin J Cancer Res.2011;23(4)：306-11.