IgG ABO型抗體效價與ABO新生兒溶血病的相關性研究

王茂玲 林海容 賀國鳳 楊 眉△ 安邦權 鄧 波

（1.貴州省人民醫院輸血科，貴州 貴陽550002：2.遵義醫學院，貴州 遵義563003）

“新生兒溶血病（hemolytic disease of the newborn，HDN）”這一病名特指因胎兒從父親方面獲得的一些母親體內沒有的紅細胞抗原，導致母嬰血型不合引起的一種胎兒或新生兒溶血的免疫性溶血性疾?。?］，可引起胎兒或新生兒水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、膽紅素腦病甚至死亡等嚴重后果。其中以ABO血型系統的發病率最高，約占HDN的85.3%［2］?，F就貴州省人民醫院行產前效價檢測及生產的326名O型孕婦的IgG ABO血型抗體效價結果及其新生兒的HDN發病情況進行分析。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2013年2月28日至2013年11月30日于貴州省人民醫院產科進行產檢及生產的0型孕婦及其新生兒的血標本。

1.2 儀器與試劑 強生全自動血型分析儀、水浴箱（上海梅香儀器有限公司）、巰基乙醇、凝聚胺試劑（中山市生科試劑儀器有限公司）、ABO紅細胞懸液（長春博德生物技術有限責任公司）。

1.3 方法 （1）IgG ABO血型抗體效價測定，嚴格按全國臨床檢驗操作規程（第三版）和凝聚胺試劑盒說明書操作：分別吸取待檢患者200μL血清和200μL，巰基乙醇加入試管中，混勻，然后放入37℃的水浴箱中孵育2h。取10支試管，分別編號為1～10號，并在每支試管中加入200μL 0.9%的生理鹽水，吸取孵育好的血清200μL加入1號試管中，然后倍比稀釋直到第10管。從第10管到第1管依次吸150μL棄用，每管留待檢血清50μL，再分別加入4%的相應紅細胞懸液50μL、低離子介質3滴，混勻，靜置30s后加凝聚胺1滴，混勻，3 500R／min離心15s，離心結束取出扣搖，肉眼可見明顯的凝集（若無凝集重做）；加假凝集清除液1滴于管底，輕搖，凝集1min內消失呈均勻混懸液，為陰性，凝集1min內不能被消除，即為陽性。出現陽性的最高稀釋度即為該患者IgG ABO血型抗體效價。（2）血型鑒定，用強生全自動血型分析儀檢測孕婦和新生兒血型。（3）統計學方法，實驗結果采用統計學軟件SPSS 11.5進行統計學分析，分別采用χ2檢驗、χ2分割法對實驗數據進行統計學分析。

2 結 果

2.1 發病率 326名0型孕婦分娩的新生兒中，HDN患兒23例，總HDN發病率為7.1%。

2.2 母嬰ABO血型相合性與新生兒溶血病發生的關系 326例0型孕婦中，183例分娩的新生兒為母嬰ABO血型不合，23例HDN患兒全部分布在母嬰血型不合組，其HDN發病率為12.6%，遠高于母嬰血型相合組（0%），有顯著統計學意義（P＜0.01）。

2.3 母嬰血型不合組孕期效價與新生兒溶血病發生的關系 183例母嬰ABO型不合的孕婦按孕期所檢測的抗體效價分組，其新生兒溶血病發病率差異有統計學意義（P＜0.01），且隨著效價增高，新生兒溶血病發病率呈增高趨勢。其中除效價32～64組與效價≥64組間差異無統計學意義（P＞0.05）外，其余兩兩比較均有統計學差異（P＜0.01）。見表1。

表1 孕期效價與新生兒溶血病的發生

2.4 孕期效價動態檢測結果與新生兒溶血病發生的關系 183例母嬰ABO血型不合的孕婦中，僅有46例于孕期進行了IgG ABO血型抗體效價的動態監測。此46例孕婦孕期效價動態監測結果按變化趨勢分組，效價上升組的新生兒溶血病發病率明顯高于另外兩組，但差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 效價動態監測與新生兒患有ABO溶血的關系

3 討 論

本資料結果進一步印證了ABO血型不合是HDN的主要致病因素，遠高于其他血型系統。HDN的發病與其母親孕期體內的血型抗體效價高低明顯相關，且隨著母體孕期血型抗體效價增高，HDN的發生率也相應增高，與以往相關文獻報道相符［3］。抗體效價＜32與≥32相比較，其HDN發病率差異有顯著統計學意義，這也進一步確定HDN的發病與其母親體內的血型抗體效價高低明顯相關，且母體孕期血型抗體效價＜32是一個相對安全的閾值。當然，影響HDN發病率及其嚴重程度的因素，除了母體孕期體內的血型抗體濃度外，還有新生兒抗原的強弱、IgG血型抗體的亞類、胎盤的作用及胎兒體內血型物質的含量等因素。ABO抗原雖然在5～6周的胎兒身上已經可以檢測出來，但直至出生其抗原發育仍不完全，無論在數量還是在質量上都與成人紅細胞有著較大差距。每個新生兒紅細胞上只能結合很少IgG類ABO抗體（相對于每個紅細胞上幾十萬ABO抗原而言），并且存在個體差異，而紅細胞上結合IgG抗體數量的差異與溶血發生與否關系密切。其次新生兒溶血病嚴重程度強弱還與結合在胎兒紅細胞上的IgG血型抗體亞類相關。此外，IgG類抗體是通過胎盤絨毛膜上的IgG受體，主動吸收到胎兒血液循環中來的，吸收IgG抗體的速度以及亞類與IgG受體的數量和種類有關，因此胎盤對HDN的發病率及其嚴重程度也有影響。在某些胎兒（分泌型）的體液中還含有可溶性A或B物質，這種物質能中和抗A或抗B的抗體，從而保護胎兒紅細胞，起到阻止ABO新生兒溶血病的發生或緩解其臨床表現的作用［4］。這就解釋了為什么有些母體孕期血型抗體效價高，但其胎兒或新生兒卻并未患HDN。母體孕期抗體效價＜32時，也有少數HDN的發生，可能是因為孕婦在前期檢查時，還沒有受到過多的類紅細胞膜抗原的刺激，沒有形成大量的IgG抗體，而到后期時則受到此類抗原的刺激而母體產生抗體［5］。

理論上，單次孕期抗體效價的檢測因上述種種因素影響，對HDN發病的預測有一定的局限性，應對孕期抗體效價進行動態監測，以觀察母體抗體濃度的變化。但本文結果顯示雖然抗體效價上升組HDN發病率明顯高于抗體效價下降組和平穩組，差異無統計學意義。這可能與完成動態監測的孕婦例數過少有關。

［1］ 高峰，主編.臨床輸血與檢驗［M］.2版.北京：人民衛生出版社，2007：109－111.

［2］ 李惠玲，廖小鳳，郭礦玲，等.孕婦產前免疫型IgG抗體效價檢測意義探討［J］.中國醫藥導報，2011，20（8）：142－143.

［3］ 陸莉，趙麗，李娟，等.485例0型血孕婦ABO血型抗體效價的檢測結果分析與新生兒溶血病的防治［J］.中國婦幼保健，2006，23（19）：2703－2707.

［4］ Mohamed H.Turner JN.Caggana M.Biochip for separating fetal cells from materal circulation［J］.J Chromatoar A，2007，1162（2）：187－192.

［5］ 楊秋娥，曾釗輝.320例0型血孕婦學期IgG抗A（B）抗體效價分析［J］.檢驗醫學與臨床，2012，12（9）.