千金子種子、種仁及種皮中重金屬測定

鄧德英， 張宏偉， 吳瑞環， 張振凌， 李 雅

（河南中醫學院/呼吸疾病診療與新藥研發河南省協同創新中心，河南鄭州450008）

千金子種子、種仁及種皮中重金屬測定

鄧德英， 張宏偉， 吳瑞環， 張振凌*， 李 雅

（河南中醫學院/呼吸疾病診療與新藥研發河南省協同創新中心，河南鄭州450008）

目的比較千金子種子、種仁及種皮中重金屬含有量，進一步確定千金子去皮殼的意義。方法原子吸收法測定千金子種子、種仁和種皮中重金屬元素含有量。其中銅用火焰原子吸收法 （FAAS），鉛、砷、鎘采用石墨爐原子吸收法 （GFAAS），汞用冷吸收法 （HGAAS）測定。結果不同批次千金子種皮中銅、鎘、鉛、砷、汞的量均高于種仁中量。結論千金子凈制去殼具有一定合理性。

千金子；重金屬；凈制去殼；炮制工藝

千金子藥材來源為大戟科Euphorbiaceae植物續隨子Euphorbia lathyris L.的干燥成熟種子［1］。歷代炮制有 “去殼”、 “去殼，研”、 “去殼，紙裹壓去油”等方法炮制，均要求除去種皮后應用［2］。查閱了37部古代炮制相關著作，其中有34部要求 “去殼”炮制操作［3］，而現今對于千金子去皮的合理性確有爭議，李英霞等［4］通過測定比較種仁與種皮中脂肪油含有量及其組成、總香豆素含有量否定了去殼操作的合理性；而李群［5］通過對千金子種皮得率、脂肪油含有量及理化常數對比、總溶出成分［6］、秦皮乙素和秦皮甲素含有量對比［7］，認為千金子凈制去殼是必要的。本研究利用原子吸收分光光度法［8-10］進一步測定千金子種子、種仁及種皮中重金屬含有量，研究去種皮后應用凈制的意義。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Aanalyst 800原子吸收分光光度計（美國珀金埃爾默公司）；Milli-Q超純水發生器（美國密理博公司）；MARS-5微波消解儀 （美國培安公司）；AE240電子分析天平 （瑞士梅特勒-托利多公司）；BS210S電子天平 （北京賽多利斯天平公司）；鉛、銅、鐵、鎘、錳、鈣、鎂、鉀、鋅空心陰極燈，汞、砷無極放電燈 （美國）；電爐。

1.2 試藥 鉛 （Pb）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅（Cu）、鎘 （Cd）標準液，批號分別為：GSB04-1742-2004，GSB04-1729-2004，GSB04-1714-2004，GSB04-1725-2004，GSB 04-1721-2004（國家有色金屬及電子材料分析測試中心），質量濃度均為1 000μg/mL；實驗用水為去離子水；氫氧化鈉、硝酸為優級純；過氧化氫為分析純；硼氫化鈉、硝酸鎳為光譜純；玻璃器皿用前用30%硝酸浸泡過夜，然后去離子水沖干凈，烘干，備用。

2 方法與結果

2.1 樣品的處理

2.1.1 測定鉛 （Pb）、銅 （Cu）、砷 （As）、鎘（Cd）的樣品處理 分別取千金子種子、種仁及種皮樣品粉末0.3 g（3批供試樣品，批號分別為20110707、20100330、20110912），精確稱量，置于消解罐中，加入2 mL過氧化氫，6 mL濃硝酸置入微波消解儀中，按表1中程序進行微波消解［11-12］，待程序結束，消解罐冷卻后，取出，開啟罐蓋，用少量去離子水清洗消解罐蓋子和內壁，在電爐上濃縮溶液至約1 mL，冷卻后，移入量瓶中，去離子水定容至50 mL，作為測定鉛 （Pb）、銅（Cu）、砷 （As）、鎘 （Cd）元素的供試品溶液。隨同試樣做2份空白對照。

表1 微波消解程序Tab.1 M icrowave digestion procedure

2.1.2 測定汞（Hg）的樣品處理 按照“2.1.1”項下方法進行消解制備千金子種子、種仁及種皮樣品溶液，將溶液移入量瓶中，用去離子水定容至50 mL，作為測定汞 （Hg）元素的供試品溶液。隨同試樣做2份空白對照。

2.2 對照品溶液的制備

2.2.1 銅 （Cu）對照品溶液的制備 分別精密量取1 000μg/mL Cu標準液0.05、0.1、0.3、0.5 mL，分別置于100 mL量瓶中，0.5%硝酸溶液定容，即得質量濃度分別為0.5、1、3、5μg/mL的對照品溶液。

2.2.2 鉛 （Pb）、鎘 （Cd）、砷 （As）對照品溶液的制備 分別精密量取1 000μg/mL Pb、As、Cd標準液0.1 mL，分別置于100 mL量瓶中，0.5%HNO3溶液定容。分別精密量取5、1、1 m L上述Pb、As、Cd溶液，分別置于100 m L量瓶中，0.5%HNO3溶液定容，即得50μg/L Pb對照品貯備液和10μg/L As、Cd對照品貯備液，再經儀器自動稀釋成5、10、20、35、50μg/L Pb對照品溶液，2、4、6μg/L Cd對照品溶液，2、4、6、8、10μg/L As對照品溶液。

2.2.3 汞 （Hg）對照品溶液的制備 精密量取1 000μg/m LHg標準液0.1 m L，置于100 m L量瓶中，0.5%HNO3溶液定容。然后再分別精密量取上述溶液0.1、0.3、0.5、0.7 mL于100 mL量瓶中，0.5%HNO3溶液定容，即得質量濃度分別為1、3、5、7μg/L的對照品溶液。

2.3 儀器參數的設定 銅用火焰原子吸收法（FAAS）測定［13］，鉛、砷、鎘采用石墨爐原子吸收法（GFAAS）測定，汞用冷吸收法（HGAAS）測定［14］。不同金屬離子設定不同的儀器工作參數，見表2、3、4。

表2 FAAS儀器工作參數表（Cu）Tab.2 Flam parameters of Cu

表3 GFAAS儀器工作參數表（Pb、Cd、As）Tab.3 Graphite furance parameters of Pb、Cd、As

表4 HGAAS儀器工作參數表（Hg）Tab.4 Hydride generation-cold parameters of Hg

2.4 標準曲線的繪制 精密吸取各對照品溶液20μL，按照儀器的操作條件，進行測定，以質量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，計算線性回歸方程和相關系數見表5。

表5 各元素標準曲線Tab.5 Standard curves of five elements

2.5 方法學考察

2.5.1 精密度試驗 取上述各對照品溶液，重復進樣5次，測定吸光度，RSD＜3.0%，精密度良好，結果見表6。

表6 精密度試驗（n=5）Tab.6 Results of precision tests（n=5）

2.5.2 重復性試驗 分別精密稱取千金子種仁樣品 （批號20110912）5份，每份約0.3 g，按照“2.1”項下方法，制備供試品溶液，精密吸取20 μL，測定，RSD＜3.0%，重復性良好，結果見表7。

表7 重復性試驗（n=5）Tab.7 Results of reproducibility tests（n=5）

2.5.3 加樣回收率試驗 取已知含有量的千金子種仁樣品 （批號20110912）5份，每份約0.15 g，精密稱定，置于消化罐中，加入一定量的Cu、Cd、Pb、As、Hg標準溶液，按照 “2.1”項下方法，制備供試品溶液，各精密吸取 20μL，測定，RSD＜3.0%，準確度良好，結果見表8。

表8 加樣回收率試驗（n=5）Tab.8 Results of recovery tests（n=5）

2.6 樣品測定 按照儀器的操作條件，精密吸取各供試品溶液，進行測定，計算，結果見表9。

表9 千金子種子、種仁和種皮重金屬測定結果Tab.9 Determ ination results of heavy metals contents in seeds，kernel and kind shell of Euphorbiae Semen

根據上表結果計算出3個不同批次種皮、種子、種仁重金屬含有量平均值，其中種皮中Cu平均含有量為58.02μg/g，高于種子（44.31μg/g），且二者均高于種仁 （38.24μg/g）；種皮中Cd平均含有量為77.87μg/g，高于種子（29.02μg/g），均高于種仁（1.570μg/g）；種皮中Pb平均含有量為1.280μg/g，高于種子（0.587 6μg/g），均高于種仁（0.269 6μg/g）；種皮中As平均含有量為29.74μg/g，高于種子（5.853μg/g），均高于種仁（-3.044μg/g）；種皮中Hg平均含有量為0.8444μg/g，高于種子（0.651 5μg/g），且均高于種仁（0.434 9μg/g）。

3 討論

千金子的種子、種仁、種皮中，千金子種皮中銅、鎘、鉛、砷、汞5種重金屬的含有量最高，其次是種子的重金屬含有量，最后是種仁的重金屬含有量。因此，千金子凈制去皮具有科學性。千金子種皮在種子占比例較大，千金子制霜使用摻入種皮影響其外觀性狀和臨床療效，因此在千金子入藥或制霜應用時，剝去種皮是十分必要的。

中華人民共和國對外貿易經濟合作部公告2001年第4號文件，藥用植物及制劑進出口綠色行業標準重金屬限量標準：Cu≤20 mg/kg、Cd≤0.3 mg/kg、Pb≤5.0 mg/kg、As≤2 mg/kg、Hg≤0.2 mg/kg［15］。將其換算為與實驗數據相一致的單位為：Cu≤20μg/g、Cd≤0.3μg/g、Pb≤5.0 μg/g、As≤2μg/g、Hg≤0.2μg/g。與3個不同批次種皮、種子、種仁重金屬含有量的平均數對比顯示：千金子種仁Pb、As含有量均在規定范圍內，雖然千金子種仁中其他重金屬含有量超過規定標準，但是千金子種皮的重金屬含有量超出標準值最多，種皮中含Cu量約是標準值的2.9倍左右，含Cd量是標準的259.6倍左右，含As量約為標準的14.9倍，含Hg量約為標準的4.2倍。種仁中含Cu量是標準值的1.9倍左右，含Cd量約是標準的5.2倍，含Hg量約為標準的2.2倍。相比較，種仁中重金屬的含有量更接近于標準值，種皮中重金屬的含有量遠超標準值。因此，凈制去皮能降低千金子中重金屬含有量。

由于千金子種子較小不易剝去種皮，在實驗研究過程中考察了傳統手工去殼操作和幾種農作物去殼機械應用于千金子去殼操作，傳統手工去殼工作量大，耗費大量時間；而機械操作去皮效率低，均不適合千金子去殼操作。因此需要進一步研究較好的去殼設備應用于千金子的去殼操作，以保證千金子炮制的可操作性。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：20-21.

［2］全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編：上冊［M］.北京：人民衛生出版社，1975：807.

［3］張宏偉，張振凌.千金子炮制方法傳承與規范化應用研究［D］.鄭州：河南中醫學院，2013：63-65.

［4］李英霞，劉春農，韋 朋.千金子種仁與種皮中總香豆素的含量測定［J］.陜西中醫，2008，29（5）：605-606.

［5］李 群，王 琦，黃春凌，等.千金子炮制品中脂肪油成分的研究［J］.中成藥，1994，16（4）：24-25.

［6］李 群，黃春凌.炮制對千金子總溶出成分的影響［J］.時珍國藥研究，1994，5（1）：23-25.

［7］李 群，盧 煒，王文蘭，等.千金子炮制品中秦皮乙素含量的測定［J］.中成藥，2000，22（2）：137-139.

［8］孫 楠，金紅宇，薛 健. 原子吸收法測定中藥材中6種重金屬及有害元素的殘留量［J］.藥物分析雜志，2007，27（2）：256-259.

［9］呂 鵬，李松武，張振凌.懷山藥及其非藥用部位的成分比較和開發研究［D］.鄭州：河南中醫學院論文，2012：47-54.

［10］王一碩，趙麗娜，張振凌.中藥斑蝥炮制前后微量元素含量的比較研究［J］.中藥材，2013，36（5）.718-720.

［11］李云仙，付 惠，趙 寧，等.微波消解-ICP-AES法測定梔子中的微量元素［J］.安徽農業科學，2010，38（22）：11787-11788.

［12］王志嘉，尤海丹，吳志剛.微波消解-原子熒光光譜法測定中藥材中鉛、鎘、砷、汞、銻的含量［J］.沈陽藥科大學學報，2008，25（5）：388-392.

［13］韓麗琴，董順福，曹慧玲，等.火焰原子吸收分光光度法測定五味子中金屬元素的含量［J］.現代科學儀器，2007，17（6）：82-83.

［14］陳 磊，劉 怡.不同產地梔子重金屬含量測定［J］.中國實驗方劑學雜志，2011，17（23）：68-70.

［15］郭 偉.中藥中的重金屬及其檢測和去除方法［J］.天津中醫藥，2010，27（4）：351-352.

Determ ination of heavy metals contents in seed，kernel and testa of Euphorbiae Semen

DENG De-ying， ZHANG Hong-wei， WU Rui-huan， ZHANG Zhen-ling*， LIYa
（Collaborative Innovation Center for Respiratory Disease Diagnosis and Treatment&Chinese Medicine Development of Henan Province，Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 45008，China）

Euphorbia Semen；heavymetals；net system to shell；process technology

R284.1

：A

：1001-1528（2015）06-1305-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.06.032

2014-07-28

中醫藥行業專項課題 “千金子炮制方法傳承與規范化應用研究”（201107008）

鄧德英，女，實驗師，從事中藥標本與質量分析研究。E-mail：dengdeying2014@126.com

*通信作者：張振凌，女，教授，博士導師，從事中藥飲片炮制教學與研究。E-mail：zzlhnzy@126.com