多囊卵巢綜合征不孕癥患者血清睪酮水平變化及與機體氧化應激的關系

鄭國華，王愛婷，李文欣，董天亮，張桂霞

(1濰坊市婦幼保健院，山東濰坊261011;2濰坊市濱海區婦幼保健院;3昌樂縣營丘中心衛生院)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種好發于青春期和育齡期的內分泌疾病，發病率為5% ～10%，血液中雄激素水平過高是其最基本的內分泌特征，是引起不孕癥的常見原因［1］。De 等［2］報道，PCOS 患者不排卵是由于卵巢局部高濃度的雄激素直接引起的。女性體內的雄激素主要有睪酮(T)、雄烯二酮、脫氫表雄酮、硫酸脫氫表雄酮等，其中T的活性最強。高雄激素血癥的成因目前還不十分清楚，國內外研究認為氧化應激在PCOS的發生發展中起到重要作用。本研究對PCOS不孕癥患者血清中T水平進行檢測，并分析血清T水平與機體氧化應激指標的關系，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2012年6月～2014年5月濰坊市婦幼保健院及濱海區婦幼保健院收治的PCOS不孕癥患者73例(觀察組)，年齡24～41(30.33±3.64)歲。PCOS診斷參照2003年5月歐洲人類生殖和胚胎醫學會與美國生殖醫學(ESHRE/ASRM)鹿特丹專家共同推薦的診斷標準［3］:①臨床出現偶發排卵或持續無排卵;②高雄激素血癥:血清總睪酮水平≥0.51 μg/L;③卵巢呈多囊樣改變:B超下至少有一側卵巢卵泡直徑達2～9 mm，卵泡≥12個，卵巢體積＞10 cm3;具備以上3條中的2條就可診斷為PCOS。不孕癥診斷參照世界衛生組織(WHO)標準，即結婚后至少1 a、同居、有正常性生活、未采取任何避孕措施而未妊娠者［4］。另選同期來我院進行孕前體檢的健康婦女70例(對照組)，年齡23～40(29.13±2.69)歲。兩組均適用以下排除標準:患者有甲狀腺、腎上腺等內分泌系統疾病或合并心血管疾病、肝腎功能不全、惡性腫瘤等內外科疾病，就診前3個月有激素類藥物使用史，隨診失訪或發現無完整就診資料。

1.2 血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a檢測 所有受試者均在知情同意的情況下于月經周期第3天(月經紊亂者可在B超檢查未見優勢卵泡時)8:00～10:00抽取空腹靜脈血待測。采用電化學發光法檢測血清T，儀器使用羅式E411電化學發光分析儀，試劑為原裝配套試劑，實驗嚴格按操作規程操作。采用黃嘌呤氧化酶法檢測血清超氧化物歧化酶(SOD)活性，即標本采集后離心分離血清并置于－40℃低溫冰箱保存，3個月內進行測定。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，按說明書步驟加入樣品和試劑，溫育40 min，加入顯色劑，室溫靜置10 min，550 nm比色，計算結果。采用雙抗體夾心免疫酶法檢測血清8-iso-PGF2α，即血清分離后置于－40℃低溫冰箱保存，3個月內進行測定;試劑盒由德國DRG公司生產，儀器應用Anthos 2010酶標儀。

1.3 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件。計量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗。采用Spearman相關分析法分析血清T與SOD活性、8-iso-PGF2a的關系。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較見表1。Spearman法分析顯示，T與SOD活性呈負相關(r= －0.631，P ＜0.05)、與 8-iso-PGF2α 呈正相關(r=0.687，P ＜0.05)。

表1 兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較(±s)

表1 兩組血清T、SOD活性、8-iso-PGF2a比較(±s)

注:與對照組比較，▲P ＜0.01。

組別 T(μg/L) SOD活性(U/mL)8-iso-PGF2a(ng/L)觀察組 1.04 ±0.69▲ 57.57± 9.28▲ 187.22±21.82▲對照組0.28 ±0.15 100.73 ±14.48 66.13 ± 7.85

3 討論

PCOS是育齡婦女最常見的內分泌紊亂性疾病，是一種典型的卵泡發育障礙性疾病，血液循環中高水平的雄激素是PCOS患者卵巢多囊改變和卵泡發育障礙的主要內分泌環境，嚴重影響顆粒細胞的分化，同時增加顆粒細胞對LH的反應能力，導致卵泡發育停滯［5］。持續的高雄激素導致持續的卵泡排卵及發育障礙，臨床表現為月經失調和育齡期不孕癥。文獻［6］報道，50% ～70%的PCOS患者可出現雄激素過多的癥狀。本文結果顯示，觀察組有高雄激素血癥者34例，約占46.57%。

PCOS不孕癥患者高雄激素血癥的成因尚不十分清楚，國內外研究認為氧化應激在PCOS的發生發展中起到重要作用。牛志宏等［7］通過實驗發現，PCOS患者卵泡液內存在氧化應激狀態的異常。氧化應激在妊娠和不孕癥發病機制中的作用也引起廣泛關注。Bedaiwy等［8］報道，卵泡液內氧化應激狀態與卵子質量及卵胞漿內單精子顯微注射技術助孕患者的妊娠結局有關聯。SOD被認為是機體最重要的抗氧化酶，在保護機體免受氧化應激損傷中起著重要作用，檢測其活性可以了解機體的氧化應激水平。Jenkins等認為，SOD活性與妊娠關系密切。8-iso-PGF2α是細胞膜上的酯化花生四烯酸受到自由基攻擊后裂解而形成的脂質過氧化產物，因合成和釋放持續穩定，水平不受飲食中脂質和藥物的影響，大量的臨床和實驗研究顯示8-iso-PGF2α可作為評價體內氧化應激的敏感指標。本研究顯示，觀察組血清SOD活性顯著低于對照組，而8-iso-PGF2a水平高于對照組，且T與SOD活性呈負相關、與8-iso-PGF2α呈正相關，提示氧化應激狀態的存在可能是造成PCOS患者雄激素水平升高的重要因素，其機制有待進一步研究。人體內雄激素合成及代謝受多種酶的調控，例如CYP17復合酶就是雄激素合成中的關鍵酶，氧化與抗氧化的失衡有可能影響酶的活性從而影響雄激素合成與代謝。有研究認為，脂質過氧化物與PCOS的發病有關，在生理調節下，雄激素可能改變氧化劑—抗氧化劑的平衡而導致局部雄激素水平升高。

［1］馬曼華，王旭東.多囊卵巢綜合征中醫診療研究進展［J］.遼寧中醫藥大學學報，2010，12(1):97.

［2］De Leo V，Lanzetta D，D'Antona D，et al.Hormonal effects of flutamide in young women with polycystic ovary syndrome［J］.J Clin Endocrinol Metab，1998，83(1):99-102.

［3］The Rotterdam ESHRE/ASRM-Sponsored Pcos Consensus Workshop Group.Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome(PCOS)［J］.Hum Reprod，2004，19(1):41-47.

［4］Montoya JM，Bernal A，Borrero C.Diagnostics in assisted hum an reproduction［J］.Reprod Biomed Online，2002，5(2):198-210.

［5］Jerome Strauss，吳效科.多囊卵巢綜合征可能是原發性卵泡病［J］.醫學研究生報，2006，19(11):1040-1043.

［6］Huang A，Brennan K，Azziz A.Prevalence of hyperandrogenemia in the polycystic ovary syndrome diagnosed by the NIH 1990 criteria［J］.Fertil Steril，2010，93(6):1938-1941.

［7］牛志宏，吳丹丹，谷瑞環，等.多囊卵巢綜合征患者體重指數與卵泡液氧化應激指標的相關研究［J］.中華內分泌代謝雜志，2012，28(8):627-630.

［8］Bedaiwy MA，Elinashar SA，Jeffrey M，et al.Effect of follicular fluid oxidative stress parameters on intracytoplasmie sperm injection outcome［J］.Gynecol Endoerinol，2012，28(1):51-55.