內臟痛與行為學改變的相關研究進展

孫天愛 翁志軍 譚琳鎣 劉慧榮*

（上海市針灸經絡研究所，上海 200030）

內臟痛與行為學改變的相關研究進展

孫天愛 翁志軍 譚琳鎣 劉慧榮*

（上海市針灸經絡研究所，上海 200030）

內臟痛是臨床上常見疾病，由于內臟痛定位不明確，疼痛性質模糊，不易辨別疼痛的明確位置，故而探究其外在所表現出的行為學改變是認識內臟痛的一個重要手段，目前內臟痛的發病機制尚無定論，行為學評估主要用于對于內臟痛敏模型的鑒定，對行為學改變方面的研究，有助于對內臟痛有進一步的認識。

內臟痛；行為學；綜述

1　內臟痛

內臟痛多由于內臟受到機械牽拉、缺血、痙攣、炎癥、潰瘍等刺激而引發，是臨床常見癥狀之一，以定位不明確，疼痛性質模糊，發生緩慢，持續時間長，多伴有不愉快的情緒反應和防御反應等為主要特點。內臟痛的機制極為復雜，現認為包括外周敏化機制、中樞敏化機制及精神心理因素等都對內臟痛產生影響。目前國內外有多種動物模型用于內臟痛相關疾病的實驗研究［1-2］，行為學改變由于其直觀、易于鑒別、可操作性強，故而被作為評價內臟痛模型的重要指標。

2　內臟痛的行為學改變

2.1腹部撤回反射（abdominal withdrawal reflex，AWR）評分：腹壁撤回反射評分（AWR）評分法是在Al-Chaer等大鼠腸道高敏性模型上創立而成［3］，之后不斷被改進完善。較為經典的一種是：造模成功后，給予結直腸球囊擴張刺激（colorectal distention，CRD）：使用三通閥連接臺式血壓計和注射器，為減少糞便形成，評分前禁食不進水8～12 h，將球囊順大鼠直腸生理曲度緩慢進至降結腸部位，推動注射器給予恒壓擴張刺激，壓力的大小通過血壓計控制，分別給予20 mm Hg、40 mm Hg、60 mm Hg、80 mm Hg四個不同壓力等級的結直腸擴張刺激。每只大鼠測量3次AWR評分，每次結直腸擴張刺激20 s，間隔5 min后進行下一次刺激，共3次，取三次平均值作為最終評分值。

AWR評分標準分為5個等級。0分：對CRD無行為反應；1分：刺激開始時大鼠有動作停頓后并偶見短暫頭部活動，CRD期間大鼠保持不動；2分：腹部肌肉輕微收縮，無腹部肌肉抬起；3分：腹部肌肉強烈收縮，腹部肌肉抬起，無盆腔及陰囊抬起；4分：身體拱起，盆腔及陰囊抬起。

2.2腹外斜肌放電測量：腹外斜肌放電測量是使用電極置于大鼠腹外斜肌，通過生物信號采集系統收集記錄在不同球囊壓力下大鼠腹外斜肌的放電活動，球囊的使用和壓力設置與腹部回撤反射類似。電極的放置分兩種，一種是事先對大鼠進行麻醉，通過手術的方法將電極穿過腹外斜肌并固定于皮下［4-5］，另一種則是不進行麻醉，實驗時將大鼠仰臥位固定于手術臺上，將電極直接插入腹外斜肌上進行測量［6］。

2.3曠場實驗：將大鼠放入100 cm×100 cm×50 cm的黑色不透光正方形箱中，箱底平分為9個方格，大鼠從最中央的格子放入，并立刻計時，觀察并記錄5 min內大鼠的曠場行為，如穿越格子數目、總距離、休息時間、直立次數等數據，每次實驗保持實驗環境安靜，光照強度恒定。

2.4糖水偏好實驗：將大鼠單獨飼養，給予一瓶1%蔗糖溶液和一瓶自來水，適應48 h后，禁水禁食24 h，然后進行實驗，每只大鼠同時給予事先稱重好的糖水和自來水，定時更換兩瓶水的位置，1 h后取走分別稱重，每只大鼠糖水消耗率=糖水消耗量/（糖水消耗量+自來水消耗量）×100%。

2.5強迫游泳實驗：將大鼠放入直徑20 cm，水深30～35 cm的圓筒中，水溫（22±1） ℃，記錄大鼠5 min不運動的時間（大鼠四肢不動漂浮于水面，露出頭部呼吸），實驗時保持實驗環境安靜，光照強度恒定。

3　不同行為學方法實驗結果

楊斌等［7］使用腹壁撤回反射和腹外斜肌放電檢測大鼠內臟痛敏化程度，結果顯示，壓力在15～60 mm Hg，腹外斜肌放電有明顯改變，壓力在15～45 mm Hg時，腹壁撤回反射有改變；楊建平等［8］使用腹壁撤回反射評價大鼠直腸擴張內臟痛動物模型的行為反應，結果提示直腸擴張后100%出現腹壁撤回反射，評分與壓力大小成正比，AWR評分差異有顯著性；楊燕珍等［9］采用腹外斜肌放電法評價幼鼠內臟痛覺高敏感模型，結果提示，直腸擴張為30～75 mm Hg時，實驗組與對照組差異有顯著性；易麗莎等［10］采用曠場實驗觀察精神應激導致內臟高敏感大鼠的行為學變化，結果提示與對照組比較，應激刺激后大鼠的站立次數及跨越分格線數顯著下降，差異有統計學意義。喻樂［11］等觀察新生大鼠直腸擴張所致功能性慢性內臟痛，采用曠場實驗、糖水偏好實驗及強迫游泳實驗，結果提示對比對照組，實驗組大鼠在曠場穿越的格子數、直立次數及總運動距離明顯減少，休息時間增多，糖水消耗率下降，強迫游泳實驗中不動時間增加，差異有統計學意義。

4　討 論

內臟痛由于其本身疼痛感模糊，定位不明顯，因而尋求外在的病例表現顯得不可或缺，通過行為學的變化確定內臟痛模型的鑒定標準，已經被廣泛使用，通過不斷的研究探索，產生了上述行為學評價標準，并都得到了廣泛應用。

腹壁撤回反射與腹外斜肌放電檢測是目前評定內臟痛敏感性的重要方法，二者比較而言，前者的評分帶有一定的主觀性，分級較少，得到的結果不夠精細，而且由于動物的感覺也沒有那么精細，對于疼痛的反應不如腹外斜肌放電結果迅速直接；后者由于是儀器測量，能夠區分出微小的差異；但使用腹外斜肌放電檢測，如果電極固定于腹外斜肌內，雖然實驗時大鼠處于自然體位，適應性好，但須先行手術，如果臨時插入腹外斜肌，則實驗時須將大鼠固定，容易受環境刺激干擾，結果波動較大［12］。

曠場實驗、強迫游泳實驗以及糖水消耗實驗都是衡量嚙齒類動物抑郁行為的良好指標［13-14］，內臟痛敏導致動物精神心理上產生焦慮、抑郁等負面情緒，曠場實驗表明由于其對周圍事物的興趣減弱，探索欲下降，糖水消耗實驗是動物好感度缺失的表現，而強迫游泳實驗則是動物對于外界不利環境的妥協，由于負面情緒的產生，使得其出現消極狀態的時間明顯減少。

以上均表明，內臟痛能夠產生一系列消極的行為學變化，通過觀察行為學上的改變，將多種行為學表現聯系起來，有助于我們進一步認識內臟痛的機制。

［1］williams CI，Villar GR，Peterson JM，et al.Stress-induced changes in intestinal transit in the rats ：a model for irritable bowel syndrome［J］.Gastroenterology，1988，94（3）：611-621.

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［3］Al-Chaer ED，Kawasaki M，Pasricha PJ.A new model of chronic visceral hypersensitivity in adult rats induced by colon irritation during postnatal development［J］.Gastroenterology，2000，119（5）：1 276-1285.

［4］Tian XY，Bian ZX，Hu HG，et al.Electro-acupuncture attenuates stress-induced defecation in rats with chronic visceral hypersensitivity via serotonergic pathway［J］.Brain Res，2006，108 8（1）：101-108.

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［7］楊斌，江繼宏，李士通.兩種內臟痛覺過敏大鼠模型痛覺效能的比較［J］.中國比較醫學雜志，2009，19（1）：30-33.

［8］楊建平，姚明.大鼠結直腸擴張內臟痛模型的建立與行為學評價［J］.中華實驗外科雜志，2003，20（12）：1116-1118.

［9］楊燕珍，吳斌，張睿，等.腹外斜肌放電測量在幼鼠內臟痛覺高敏感模型評價中的應用［J］.中國當代兒科雜志，2008，10（5）：637-641.

［10］易麗莎，陳螢火，孫會會，等.精神應激致內臟高敏感大鼠的心里行為學變化［J］.中國現代醫學雜志，2013，23（35）：1-6.

［11］喻樂，花璐，陳自洋，等.早起生活應激所致功能性慢性內臟痛對成年后大鼠抑郁樣行為和下丘腦室旁核促腎上腺皮質激素釋放激素表達的影響［J］.世界華人消化雜志，2014，22（15）：2091-2099.

［12］陳瑜，林春，陳愛琴，等.評價清醒大鼠內臟痛覺敏感性的方法［J］.中國應用生理學雜志，2009，25（1）：188.

［13］Beauge LA，DiPolo R.Sidedness of the ATP-Na+-K+ interactions with the Na+ pump in squid axons［J］.Biochim Biophys Acta，197 9，553（4）：495-500.

［14］王丹.抑郁癥動物模型及行為學評價［J］.西安文理學院學報，2012，15（2）：51-53.

Research Progress of Visceral Pain and Behavior Change

SUN Tian-ai， WENG Zhi-jun， TAN Lin-ying， LIU Hui-rong*
（Shanghai Institute of Acupuncture and Meridians， Shanghai 200030， China）

Visceral pain is a common disease in clinic， due to visceral pain location is not clear， the nature of pain is vague， it’s hard to tell the exact location of the pain. Therefore， it is an important method to study the behavior of the external manifestations. At present， there is no conclusion about the pathogenesis of visceral pain， behavioral assessment is mainly used for the identification of visceral pain sensitivity model， by studying the change of behavior， and it is helpful to have a further understanding of visceral pain.

Visceral pain； Behavior； Review

R2

A

1671-8194（2015）29-0034-02

國家自然科學基金項目（812027520）；上海市衛計委項目（20144Y0227）

E-mail： lhr_tcm@139.com