鎖陽化學成分的研究

王曉飛， 李 輝，2， 劉銘佩， 焦海勝*

（1.蘭州大學第二醫院，甘肅蘭州730030；2.蘭州大學藥學院，甘肅蘭州730000）

鎖陽化學成分的研究

王曉飛1， 李 輝1，2， 劉銘佩1， 焦海勝1*

（1.蘭州大學第二醫院，甘肅蘭州730030；2.蘭州大學藥學院，甘肅蘭州730000）

目的研究鎖陽的化學成分。方法利用硅膠柱層析、重結晶等方法對鎖陽乙酸乙酯部位進行分離純化，然后通過1H-NMR、13H-NMR、MS等手段鑒定所得化合物的結構。結果從中分離得到9個化合物，經鑒定分別為十八烷酸α-單甘油酯 （1）、β-谷甾醇 （2）、正丁酸 （3）、細梗香草內酯 （4）、胡蘿卜苷 （5）、原兒茶酸 （6）、兒茶素（7）、沒食子酸 （8）、表兒茶素沒食子酸酯 （9）。結論化合物9為首次從該屬植物中分離得到，化合物1和3為首次從該植物中分離得到。

鎖陽；乙酸乙酯部位；化學成分；分離鑒定

鎖陽Cynomorium songaricum Rupr始載于宋朝龐安石所著的 《本草補遺》，別名不老藥、地毛球，為鎖陽科肉質寄生草本植物，主產于甘肅、內蒙古、新疆。其根莖入藥，味甘，性溫，具有補腎助陽、潤腸通便等功效［1］，其化學成分主要為三萜、黃酮、生物堿和木脂素類等［2］。現代藥理研究表明，鎖陽具有增強男性生殖能力、抗氧化、抗病毒、抗糖尿病等作用［2］。為了充分利用鎖陽資源，本實驗系統研究了其乙酸乙酯部位的化學成分，結果從中分離得到9個化合物 （1-9），并通過1H-NMR、13H-NMR、MS鑒定了其結構。

1 儀器、材料與試劑

JNM-ESC400核磁共振儀 （日本電子株式會社）；SMP3高級數字式熔點測定儀（英國Stuart公司）；RE-52AA型旋轉蒸發儀 （上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環水式多用真空泵 （鄭州長城科工貿有限公司）；MH-2000型電熱套 （北京科偉永興儀器有限公司）。

鎖陽購自蘭州安泰堂中藥飲片有限公司 （批號為130826）。柱層析硅膠 （200～300目）、GF254薄層層析硅膠 （青島海洋化工有限公司）；所用試劑均為分析純 （天津市化學試劑一廠）。

2 提取分離

取鎖陽3 kg粉碎，加入95%乙醇30 L，加熱回流提取3次，每次2 h，提取液合并后減壓濃縮，得到浸膏256 g。將其均勻分散于水中，石油醚萃取6次以脫脂，然后乙酸乙酯萃取6次，萃取液合并后減壓濃縮，得到乙酸乙酯部位98 g。將該部位溶解，100 g硅膠 （60～80目）拌樣后干法上柱，三氯甲烷-甲醇 （1∶0、99∶1、98∶2、95∶5、9∶1、8∶2、7∶3）梯度洗脫，得到169個組分。其中，組分16～19（純三氯甲烷洗脫）合并，經硅膠柱反復層析，石油醚-乙酸乙酯 （9∶1）洗脫，重結晶純化后得到化合物1（10 mg）；組分22～26［三氯甲烷-甲醇 （99∶1）洗脫］合并，重結晶后得到化合物2（25 mg）；組分45～50［三氯甲烷-甲醇 （98∶2）洗脫］合并，經硅膠柱反復層析，石油醚-乙酸乙酯 （8∶2）洗脫，重結晶純化后得到化合物3（7 mg）；組分62～65［三氯甲烷-甲醇（98∶2）洗脫］合并，經硅膠柱反復層析，石油醚-乙酸乙酯 （75∶25）洗脫，重結晶純化后得到化合物4（11 mg）；組分70～76［三氯甲烷-甲醇（95∶5）洗脫］合并，重結晶后得到化合物5（35 mg）；組分85～95［三氯甲烷-甲醇 （9∶1）洗脫］合并，經硅膠柱反復層析，三氯甲烷-甲醇（93∶7）洗脫，重結晶純化后得到化合物6（13 mg）、7（15 mg）、8（25 mg）；組分112～116［三氯甲烷-甲醇 （8∶2）洗脫］合并，經硅膠柱反復層析，三氯甲烷-甲醇 （75∶25）洗脫，重結晶純化后得到化合物9（17 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：無色針狀結晶 （乙酸乙酯），mp 67～69℃，ESI-MS m/z 381.0［M+Na］+。HNMR（CDC13，400 MHz）δ：4.16（2H，m，H-1），3.91（1H，m，H-2），3.66（1H，m，H-3α），3.80（1H，m，H-3β），2.33（2H，t，J=7.5 Hz，H-5），2.00（2H，m，H-6），1.59（2H，m，H-7），1.23～1.31（28H，m，H-8～20），0.86（3H，t，J=7.5 Hz，H-21）。13C-NMR（CDC13，100 MHz）δ：174.5（C-4），70.3（C-2），65.2（C-1），63.4（C-3），34.2（C-5），32.0（C-6），22.8～29.8（C-7～20），14.2（C-21）。以上數據與文獻 ［3］報道基本一致，故確定化合物1為十八烷酸α-單甘油酯。

化合物2：無色針狀結晶 （乙酸乙酯），mp 135～137℃。與β-谷甾醇對照品在TLC上的Rf值一致，而且混合后熔點不下降，故確定化合物2為β-谷甾醇。

化合物3：無色針狀結晶 （丙酮），mp 109～111℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：4.30（1H，d，J=8.7 Hz，H-2），4.12（1H，m，H-4），3.83（1H，t，J=8.0 Hz，H-3），1.36（3H，d，J= 6.2 Hz，H-5）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：173.8（C-1），79.5（C-3），76.6（C-4），74.5（C-2），17.4（C-5）。以上數據與文獻 ［4］報道基本一致，故確定化合物3為全順式-5-脫氧戊糖酸-γ-內酯，又名細梗香草內酯。

化合物4：無色針狀結晶 （丙酮）。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：2.25（2H，t，J=7.4 Hz，H-3），1.56（2H，m，H-2），1.32（3H，s，H-1）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：173.8（C-4），33.3（H-3），30.4（H-2），24.7（H-1）。以上數據與文獻 ［5］報道基本一致，故確定化合物4為正丁酸。

化合物5：無色粉末 （甲醇），mp 285～286℃。與胡蘿卜苷對照品在TLC上的Rf值一致，而且混合后熔點不下降，故確定化合物5為胡蘿卜苷。

化合物6：無色針狀結晶 （甲醇），mp 180～188℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：7.50（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.44（1H，dd，J= 8.3，2.4 Hz，H-6），6.86（1H，d，J=8.3 Hz，H-5）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：166.6（C-7），149.8（C-4），144.6（C-3），122.8（C-6），122.3（C-1），116.6（C-2），114.8（C-5）。以上數據與文獻 ［6］報道基本一致，故確定化合物6為3，4-二羥基苯甲酸，又名原兒茶酸。

化合物7：淡黃色針狀結晶 （甲醇），mp 254～256℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：6.86（1H，d，J=1.8 Hz，H-2＇），6.73（2H，m，H-5＇，6＇），5.99（1H，d，J=2.2 Hz，H-8），5.84（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），4.52（1H，d，J=7.5 Hz，H-2），3.97（1H，m，H-3），2.87（1H，dd，J= 16.0，5.3 Hz，H-4α），2.49（1H，dd，J=16.1，8.2 Hz，H-4β）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：156.9（C-5），156.4（C-7），156.1（C-9），144.9（C-3＇），144.8（C-4＇），131.3（C-1＇），119.2（C-6＇），114.8（C-2＇），114.4（C-5＇），99.8（C-10），95.3（C-6），94.6（C-8），81.9（C-2），67.5（C-3），28.0（C-2）。以上數據與文獻 ［7］報道基本一致，故確定化合物7為兒茶酸。

化合物8：無色針狀結晶 （甲醇），mp 239～241℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：7.11（2H，s，H-2，6）。13C-NMR（Acetone-d6，100MHz）δ：166.8（C-7），145.1（C-3，5），137.7（C-4），121.2（C-1），109.1（C-2，6）。以上數據與文獻［8］報道基本一致，故確定化合物8為沒食子酸。

化合物9：淡黃色膠狀物質 （甲醇），ESI-MS m/z 465.1［M+Na］+，907.1［2M+Na］+。1HNMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：6.82（1H，d，J= 1.8 Hz，H-2＇），6.78（1H，s，H-2＇＇，6＇＇），6.72（1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6＇），6.61（1H，d，J=8.2 Hz，H-5＇），5.89（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），5.79（1H，d，J=2.2 Hz，H-5），5.32（1H，m，H-3），4.98（1H，m，H-2），2.90（1H，dd，J= 17.4，4.6 Hz，H-4β），2.64（1H，m，H-4α）。13CNMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：165.7（C-7＇＇），157.1（C-9），157.0（C-5），156.1（C-7），145.9（C-3＇＇，5＇＇），145.3（C-5＇），145.2（C-4＇），139.1（C-4＇＇），129.3（C-1＇），119.8（C-1＇＇），118.1（C-6＇），115.6（C-2＇），114.8（C-3＇），109.2（C-2＇＇，6＇＇），97.9（C-10），96.1（C-8），94.9（C-6），77.0（C-2），68.6（C-3），25.0（C-4）。以上數據與文獻 ［9］報道基本一致，故確定化合物9為表兒茶素沒食子酸酯。

［1］林 佳，徐麗珍，鄒忠梅.鎖陽的研究進展［J］.國外醫學：中醫中藥分冊，2003，25（6）：332-334.

［2］Meng H C，Wang S，Li Y，et al.Chemica1 constituent and pharmaco1ogic actions of Cynomorium p1ant［J］.Chin J Nat Med，2013，11（4）：321-329.

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［4］王曉梅，張 倩，熱娜·卡斯木，等.鎖陽全草化學成分的研究［J］.中草藥，2011，42（3）：458-460.

［5］崔錫強，陳若蕓.滇桑莖皮中化學成分的研究［J］.中草藥，2010，41（3）：352-355.

［6］盧汝梅，楊長水，韋建華.荔枝草化學成分的研究［J］.中草藥，2011，42（5）：859-862.

［7］楊大松，楊永平，楊永紅，等.秋楓化學成分的研究［J］.天然產物研究與開發，2013，25（8）：1056-1059.

［8］鄒忠杰，楊俊山.寬葉大戟化學成分研究［J］.中成藥，2010，32（10）：1743-1745.

［9］張 倩，熱娜·卡斯木，王曉梅，等.鎖陽花序中黃酮類化學成分的研究［J］.新疆醫科大學學報，2007，30（5）：466-468.

Chem ical constituents from Cynomorium songaricum Rupr

WANG Xiao-fei1， LIHui1，2， LIU Ming-pei1， JIAO Hai-sheng1*

（1.Lanzhou University Second Hospital，Lanzhou 730030，China；2.College of Pharmacy，Lanzhou University，Lanzhou 730000，China）

AIMTo study the chemica1constituents from Cynomorium songaricum Rupr.METHODSSi1ica ge1co1umn and recrysta11ization were used to iso1ate and purify the ethy1acetate portion of C.songaricum.Then their structures were identified by1H-NMR，13H-NMR and MS.RESULTSNine compounds were iso1ated and identified as stearic acidα-monog1yceride（1），β-sitostero1（2），n-butyric acid（3），dapi11ip1actone（4），daucostero1（5），protocatechuic acid（6），catechin（7），ga11ic acid（8）and epicatechin ga11ate（9）.CONCLUSIONCompound9is iso1ated from this genus for the first time.Compounds1and3are first1y iso1ated from this p1ant.

Cynomorium songaricum Rupr；ethy1acetate portion；chemica1 constituents；iso1ation and identification

R284.1

A

1001-1528（2015）08-1737-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.08.023

2014-12-01

中央高校基本科研業務費專項資金 （1zujbky-2013-46）；蘭州大學第二醫院院內中醫藥項目 （YJzy2013-14）

王曉飛 （1982—），男，博士，從事天然藥物化學研究。Te1：（0931）8942491，E-mai1：wxf-2511@163.com

*通信作者：焦海勝 （1963—），男，教授，碩士生導師，從事藥物新劑型、新技術研究工作。Te1：（0931）8942571，E-mai1：1deyjhs @sohu.com