Urotensin II誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型的建立及機(jī)制探討

李瑩瑩，禹曉童，王學(xué)江△(首都醫(yī)科大學(xué)，北京100069)

Urotensin II誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型的建立及機(jī)制探討

李瑩瑩，禹曉童，王學(xué)江△
(首都醫(yī)科大學(xué)，北京100069)

目的:采用Urotensin II(UII)體外誘導(dǎo)法建立HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型，并探討其機(jī)制。方法:采用含不同UII濃度的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HepG2細(xì)胞，最后半小時(shí)與1×10－7mol/L insulin共孵育，葡萄糖-己糖激酶法檢測不同時(shí)點(diǎn)培養(yǎng)基中葡萄糖含量，以HepG2細(xì)胞蛋白進(jìn)行定量，確定胰島素抵抗最佳作用濃度及時(shí)間;多功能酶標(biāo)儀檢測UII誘導(dǎo)hepG2細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)變化; Western blot法檢測胰島素受體結(jié)合物IRS-1及Akt蛋白的表達(dá)。結(jié)果: hepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗的最佳作用時(shí)間為24 h，最佳UII濃度為1×10－7mol/L。與空白對照相比，UII刺激hepG2細(xì)胞后ROS增高明顯(P＜0. 05) ;且UII孵育組IRS-1及Akt蛋白的表達(dá)明顯降低(P＜0. 05)，提示UII可能通過增高h(yuǎn)epG2細(xì)胞中ROS而使hepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗。結(jié)論:采用UII體外誘導(dǎo)的方法，UII濃度為1×10－7mol/L，作用24 h后，可建立HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型，且UII可能通過誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞ROS的增高而引起胰島素抵抗。

△E-mail: xjwang@ccmu.edu.cn