血塞通對急性腦梗死不同時間點(diǎn)血清VEGF和VEGFR表達(dá)的影響

黃寧芳 顏鐘生 唐國傳 楊桂欽 陳強(qiáng) 余祖輝538021廣西防城港市防城區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)科

血塞通對急性腦梗死不同時間點(diǎn)血清VEGF和VEGFR表達(dá)的影響

黃寧芳 顏鐘生 唐國傳 楊桂欽 陳強(qiáng) 余祖輝
538021廣西防城港市防城區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)科

目的：評價血塞通（三七總皂苷，NPS）對急性腦梗死（ACI）患者血清血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和血清血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGFR）表達(dá)的影響。方法：納入發(fā)病72 h內(nèi)入院的急性腦梗死患者，分為NPS組和曲克蘆丁組，以年齡、性別與急性腦梗死患者匹配的健康正常人作為對照組。對ACI患者于發(fā)病后3、7和14 d 3個時間點(diǎn)采血，采用ELISA法測定血清VEGF和VEGFR的含量。結(jié)果：ACI患者的血清VEGF和VEGFR水平在3個時間點(diǎn)均持續(xù)升高，至病程第7天均達(dá)到高峰，以后下降，但至14 d仍維持較高水平；NPS組與曲克蘆丁組和正常對照組比較，可使VEGF和VEGFR表達(dá)明顯上升（P＜0.01）。結(jié)論：NPS在各時間點(diǎn)均顯著增加腦梗死后血清VEGF和VEGFR的含量，且能使其維持在一個較高的水平，推測這可能是NPS治療急性腦梗死的分子機(jī)制之一。

三七總皂苷；急性腦梗死；血管內(nèi)皮生長因子；血管內(nèi)皮生長因子受體

中藥三七的有效成分三七總皂苷（NPS）對腦梗死腦缺血功能障礙能夠發(fā)揮一定的改善作用，在腦梗死的治療中療效顯著。本研究通過觀察NPS對腦梗死患者不同時間點(diǎn)血清VEGF和VEGFR水平表達(dá)的影響，從分子水平的角度上，探討NPS促進(jìn)腦梗死后功能恢復(fù)的機(jī)制。

資料與方法

納入對象：①納入標(biāo)準(zhǔn)：符合中國急性缺血性腦卒中診治指南2010中急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，經(jīng)頭顱CT證實(shí)。同時根據(jù)全國第4屆腦血管病會議通過的腦卒中患者神經(jīng)功能評分標(biāo)準(zhǔn)[2]，依據(jù)改良愛丁堡+斯堪的那維亞卒中量表分組。②排除標(biāo)準(zhǔn)：心肝腎等重要器官的功能不全，腫瘤及嚴(yán)重感染，大面積腦梗死及昏迷，嚴(yán)重精神疾病。健康正常人對照組：排除短暫腦供血不足或腦卒中，3個月內(nèi)發(fā)生過腦外傷，心肝腎疾病以及腫瘤。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：本研究分為3組，①ACI患者，采用血塞通+基礎(chǔ)治療；②ACI患者，采用曲克蘆丁+基礎(chǔ)治療；③選取年齡、性別與前兩組相匹配的健康正常人，40例，不給予任何處理。

干預(yù)措施：①藥物與試劑：血塞通：400 mg/支；VEGF和VEGFR試劑盒：嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行檢測。②劑量與療程：所有ACI患者均給予腸溶阿司匹林100mg口服，1次/d；胞二磷膽堿1.0 g加入0.9％氯化鈉注射液250mL中靜脈滴注，1次/d。根據(jù)病情需要，加用甘露醇。對于合并高血壓、糖尿病及血脂異常的患者，給予相應(yīng)的對癥處理。在上述治療的基礎(chǔ)上，曲克蘆丁組同時給予曲克蘆丁400mg+0.9％氯化鈉注射液250mL靜脈滴注，1次/d。NPS組在曲克蘆丁組的基礎(chǔ)上再增加血塞通400mg+ 0.9％氯化鈉注射液250mL靜脈滴注，1 次/d，2周1個療程。③標(biāo)本采集及指標(biāo)測定：對照組采集1次清晨空腹血8mL，儲存用于備用。發(fā)病后第3、7、14天清晨，所有ACI患者分別取空腹血8mL，所有血樣均以無菌試管留取，靜置30min，3 000 r/min離心10min收集血清，-20℃保存。④觀察指標(biāo)：血清VEGF和VEGFR含量。

結(jié)果

納入患者的基本情況：2012年10 月-2014年10月收治急性腦梗死患者80例，入院時均在發(fā)病72 h之內(nèi)。其中男44例，女36例，年齡43～78歲，平均（62.8±11.2）歲。血塞通治療組40例，男23例，女17例；年齡42～77歲，平均（61.86±10.04）歲；伴有高血壓20例，糖尿病11例，血脂異常9例，有短暫性腦缺血發(fā)作史7例。曲克蘆丁治療組40例，男24例，女16例；年齡44～79歲，平均（63.88±10.66）歲；伴高血壓18例，糖尿病10例，血脂異常10例，短暫性腦缺血發(fā)作史6例。正常對照組：與觀察組年齡、性別配對的門診健康成人體檢者40例，男22例，女18例；年齡46～78歲，平均（64.63±10.91）歲。3組一般資料及兩組急性腦梗死患者的病情程度對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

血清VEGF和VEGFR水平比較：在發(fā)病第3天，NPS組和曲克蘆丁組血清VEGF均較對照組明顯升高（P＜0.01），至病程第7天時達(dá)到高峰，此后逐漸下降。發(fā)病后3 d內(nèi)NPS組和曲克蘆丁組患者的血清VEGF含量比較無顯著差異，在第7天和第14天時NPS組較曲克蘆丁組的血清VEGF和VEGFR含量升高更為明顯（P＜0.05），并一直保持在一個相對較高的水平，與正常對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表1。

討論

VEGF是內(nèi)皮細(xì)胞的強(qiáng)力絲裂劑，具有強(qiáng)大的促進(jìn)新生血管生成作用，是最具特意性且作用最強(qiáng)的內(nèi)源性血管生成因子[3]。最近研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血再灌注損傷時，VEGF表達(dá)上調(diào)，通過與VEGFR結(jié)合發(fā)揮促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖作用，加速新生血管的形成，其中最相關(guān)的是VEGFR2受體[3]。我們通過大量的臨床試驗(yàn)以及動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)了VEGF和VEGFR的神經(jīng)保護(hù)作用[4-5]。在腦梗死急性期，腦血流量顯著減少，VEGF和VEGFR表達(dá)明顯上調(diào)，從而減小梗死灶，對神經(jīng)功能具有改善作用，促進(jìn)缺血半暗帶腦血管新生。隨后側(cè)支循環(huán)建立，腦血供改善，VEGF和VEGFR表達(dá)減少。所以隨著病程的發(fā)展，VEGF和VEGFR水平呈動態(tài)變化。本研究結(jié)果顯示，升高的VEGF和VEGFR水平對缺血的腦組織具有保護(hù)作用，可延長腦神經(jīng)的存活時間，從而減小腦梗死體積，促進(jìn)神經(jīng)元功能恢復(fù)。

有學(xué)者發(fā)現(xiàn)急性腦損傷48 h內(nèi)開始應(yīng)用PNS可促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[6]。本研究結(jié)果顯示，在腦梗死患者的急性期，NPS可使血清VEGF和VEGFR得水平升高，可能通過增加其活性，促進(jìn)新的血管床開放和促使新生血管生長，增進(jìn)側(cè)支循環(huán)的建立，從而改善缺血、缺氧狀況。所以推測這可能是NPS治療急性腦梗死的分子機(jī)制之一。

[1]中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病學(xué)組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組.中國急性缺血性腦卒中診治指南2010[J].中華神經(jīng)科雜志,2010,43：146-153.

[2]中華神經(jīng)科學(xué)會.各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)[J].中華神經(jīng)科雜志,1996,29（6）：379-383.

[3]Otrock ZK,Makarem JA.Shamseddine AL Vascular endothelial growth factor family of ligands and receptors：Review[J].Blood Cell MolDis,2007,38：258-268.

[4]孔朝紅,劉煜敏,朱江,等.粒細(xì)胞集落刺激因子對慢性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響[J].中華老年醫(yī)學(xué)雜志,2013,32（8）：882-885.

[5]何佳,丁鳳菲,劉敏珍,等.VEGF/VEGFR在腦缺血再灌注損傷中的神經(jīng)保護(hù)作用[J].神經(jīng)損傷與功能重建,2013,8（3）：177-180.

[6]丁宏巖,董強(qiáng),韓翔,等.三七總皂苷對急性基底節(jié)區(qū)出血患者神經(jīng)功能及rCBF的影響[J].神經(jīng)損傷與功能重建,2008,3（6）：386-398.

Influence o f Xue Sai Tong on the serum VEGF and VEGFR expression at different tim e points of acute cerebral infarction

Huang Ningfang,Yan Zhongsheng,Tang Guochuan,YangGuiqin,Chen Qiang,Yu Zuhui
Departmentof InternalMedicine,the People'sHospitalofFangcheng District,Fangchenggang City,Guangxi538021

Foundation item GuangxiFangchenggang City Scientific Research Project[No.Fang ScienceWord（2012）9]

Objective：To evaluate the influence of Xue Sai Tong（panax notoginseng saponins,NPS）on the serum vascular endothelialgrowth factor（VEGF）and serum vascular endothelialgrowth factor receptor（VEGFR）expression of patientswith acute cerebral infarction（ACI）.Methods：The patients with acute cerebral infarction within 72 hours of onset were admitted.They were divided into the NPS group and the troxerutin group,the healthy normal people matched with patients with acute cerebral infarction at the age and gender as the controlgroup.ACIpatientswere given blood collection at three time points,such as 3,7 and 14 days after onset.The serum VEGF and VEGFR contents were measured by ELISA method.Results：The serum VEGF and VEGFR levels of ACI patients continued to rise at three time points,reached the peak at 7 days,then decreased,but still maintained a high levelat14 days.The NPSgroup and the troxerutin group were compared with the normal controlgroup,it could make the VEGF and VEGFR expression increased significantly（P＜0.01）.Conclusion：NPS at each time point are significantly increased the serum VEGF and VEGFR contents after cerebral infarction,and canmake it remain ata high level,itspeculats that thismay beone of themolecularmechanism ofNPSin the treatmentofacute cerebral infarction.

Panax notoginseng saponins；Acute cerebral infarction；Vascular endothelial growth factor；Vascular endothelial growth factor receptor

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.11.64

廣西防城港市科研課題[No.防科字（2012）9號]