前列地爾對老年糖尿病腎病患者氧化應激及免疫功能的影響

田 勇 王俊宏 (平頂山市第一人民醫院內分泌代謝科，河南 平頂山 467000)

前列地爾對老年糖尿病腎病患者氧化應激及免疫功能的影響

田 勇 王俊宏 (平頂山市第一人民醫院內分泌代謝科，河南 平頂山 467000)

目的 探討前列地爾注射液對老年糖尿病腎病(DN)患者氧化應激及免疫功能的影響。方法 選擇80例老年DN患者隨機分為治療組和對照組，兩組均給予西醫常規治療，治療組加用前列地爾注射液治療2 w，對照組加用安慰劑。兩組檢測治療前后空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率(UAER)、尿微量白蛋白(mALB)及血β2微球蛋白(β2-MG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、外周血T淋巴細胞亞群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、殺傷性T細胞、抑制性T細胞、輔助性T細胞、早期活化T細胞、總淋巴細胞、自然殺傷細胞、B細胞。結果 前列地爾注射液干預治療2 w后，治療組患者UAER、mALB、β2-MG、MDA、ROS、早期活化T細胞和總淋巴細胞水平較對照組降低(P＜0.05)，SOD、CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組升高(P＜0.05)，余指標變化無統計學意義。結論 前列地爾注射液具有調節老年DN患者氧化應激及免疫功能的作用，能改善患者腎功能。

前列地爾;糖尿病腎病;氧化應激;免疫功能

糖尿病腎病(DN)是一種常見的糖尿病慢性并發癥，甚至導致氮質血癥、尿毒癥，嚴重危害患者的生活質量。目前具體發病機制仍不清楚，但多數認為其發生與脂肪、內分泌、氧化應激、免疫系統等功能障礙有關〔1〕。其中氧化應激與DN的發展有著密切的聯系，不僅使得氧化代謝終產物腎臟活性氧(ROS)增多，而且同時也影響著機體的抗氧化防御系統。2型糖尿病作為一種自然免疫和低度炎癥性疾病，患者自身免疫功能低下也導致免疫應答異常，本研究旨在通過檢測使用前列地爾注射液治療的老年DN患者脂肪、內分泌、氧化應激、免疫系統等指標水平的變化，探討前列地爾對DN患者的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年4月至2013年1月在我院內分泌科住院并診斷為DN患者80例，男44例，女36例，按入院順序隨機分為對照組和前列地爾組，對照組40例，男27例，女13例，年齡39～68〔平均(57.2±10.5)〕歲，平均病程為(8.9±5.7)年。前列地爾組40例，男26例，女14例，年齡42～69〔平均(60.4±8.5)歲〕，平均病程為(8.9±5.7)年。排除標準:經尿檢、腎穿刺活檢等排除其他因素引起的腎臟病患者;近期使用抗氧化劑等藥物治療者;反復尿路感染者;有嚴重心、肝、肺疾病者。該研究已經我院醫學倫理委員會審查通過，兩組患者的性別、年齡及DN病程和體質量指數方面比較，差異無統計學意義，均具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對照組患者給予常規控制蛋白量飲食、穩定血糖等對癥治療，前列地爾組在對照組治療基礎上加用前列地爾20 μg溶解在100 ml生理鹽水中靜脈滴注，1次/d，療程14 d。1.2.2 生化指標檢測 所有入選者在治療前、治療1個療程后禁食12 h后次晨采集肘靜脈血，采用AU5400全自動生化分析儀，用免疫比濁法、酶學法等技術測定兩組患者空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率(UAER)。采用放射免疫法測定尿微量白蛋白(mALB)及血β2微球蛋白(β2-MG)。

1.2.3 氧化指標檢測 空腹取靜脈血2 ml，4 000 r/min離心10 min，取上清液置于－20℃ 冰箱內統一保存待測。采用分光光度計法檢測超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)活性。采用比色法測定血清ROS，試劑盒均由北京中生生物科技股份有限公司提供，按試劑說明書操作。

1.2.4 免疫狀態指標檢測 空腹取靜脈血2 ml，采用FC500流式細胞儀及配套試劑，按試劑說明書操作，檢測外周血T淋巴細胞亞群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、殺傷性 T 細胞、抑制性T細胞、輔助性T細胞、早期活化T細胞、總淋巴細胞、自然殺傷細胞、B細胞。

1.3 統計學方法 采用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析、t檢驗;采用Spearman等級相關性檢驗。

2 結果

2.1 各組治療前后常規指標比較 治療前兩組患者FPG、HbA1c、TC、TG、血肌酐、尿素氮、UAER、mALB 和 β2-MG 水平比較，差異均無統計學意義，治療后前列地爾組患者 UAER、mALB和β2-MG水平與對照組比較差異顯著(P＜0.05)，FPG、HbA1c、TC、TG、血肌酐和尿素氮水平差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

2.2 各組治療前后免疫功能指標比較 治療前兩組患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、殺傷性、抑制性、輔助性 T 細胞、早期活化T細胞、總淋巴細胞和B細胞水平比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)，治療后前列地爾組患者 CD4+、CD4+/CD8+、早期活化T細胞和總淋巴細胞水平與對照組比較，差異有統計學意義(P＜0.05)，CD8+、殺傷性、抑制性、輔助性T細胞和B細胞水平差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

2.3 各組治療前后氧化應激指標比較 治療前兩組患者MDA、SOD和ROS水平比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)，治療后前列地爾組患者MDA、SOD和ROS水平與對照組比較， 差異有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表1 兩組患者治療前后一般指標比較(±s，n=40)

表1 兩組患者治療前后一般指標比較(±s，n=40)

與對照組治療后比較:1)P＜0.05，下表同

組別FPG(mmol/L)HbA1c(%)TC(mmol/L)TG(mmol/L)血肌酐(μmol/L)尿素氮(mmol/L)UAER(mg/min)mALB(mg/L)β2-MG(mg/L)8 ±1.5 82.3±67.1 50.2±4.1 1.6±0.2治療后 7.1±1.2 7.2±2.7 5.1 ±1.2 1.6 ±0.5 79.9 ±13.0 5.9 ±1.4 62.3±47.8 47.4±4.1 1.4±0.2前列地爾組 治療前 7.1±1.10 7.1±2.4 5.4±1.3 1.7±0.5 84.5±14.3 6.0±1.5 83.4±71.9 49.3±5.1 1.6±0.2治療后 7.1±1.0 7.2±2.6 5.2 ±1.4 1.6 ±0.4 78.4 ±14 6.0 ±1.9 42.5±37.11)38.4±3.21) 0.8±0.11)對照組 治療前 7.2±1.1 7.1±2.5 5.3±1.3 1.8±0.4 83.8±13.2 5.

表2 兩組患者治療前后免疫功能指標比較(±s，n=40)

表2 兩組患者治療前后免疫功能指標比較(±s，n=40)

指標 CD4+(%)CD8+(%)CD4+/CD8+殺傷性T細胞抑制性T細胞輔助性T細胞早期活化T細胞總淋巴細胞B細胞(%)45.0±13.5 45.8±12.7 28.5±9.7 8.1±4.8治療后 28.5±4.9 27.2±7.3 1.1±0.4 15.6 ±5.2 13.7 ±6.4 45.2±14.4 44.9±12.8 27.3±8.4 10.4±5.2前列地爾組 治療前 25.3±4.8 24.4±7.6 1.0±0.4 15.3±5.2 13.6 ±6.3 45.1±13.7 45.2±12.4 28.7±9.2 8.2±4.2治療后 38.2±5.41) 27.4±7.8 1.4±0.61) 16.0±7.2 14.3±6.4 45.2±13.9 43.2±13.11)24.6±7.31)對照組 治療前 25.1±4.7 24.5±6.8 1.0±0.4 15.2±5.1 13.4±7.2 9.8±4.8

表3 兩組患者治療前后氧化應激指標比較(±s，n=40)

表3 兩組患者治療前后氧化應激指標比較(±s，n=40)

指標 MDA(mmol/ml)SOD(μg/ml) ROS(U/ml)14.9±0.4 94.9±1.6 492.5±59.2治療后 34.2±0.7 62.7±2.4 458.7±57.9前列地爾組 治療前 14.6±0.5 94.7±1.5 488.7±61.5治療后 32.5±0.71) 74.3±2.51) 302.7±50.11)對照組 治療前

2.4 相關性分析 在前列地爾組中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、殺傷性、抑制性、輔助性T細胞、早期活化T細胞和B細胞表達水平經Spearman等級相關分析結果顯示，CD4+表達與MDA和ROS表達水平呈負相關，與SOD表達水平呈正相關;早期活化T細胞表達與MDA和ROS表達水平呈正相關，與SOD表達水平呈負相關(見表4)。

表4 前列地爾組氧化應激與免疫功能指標表達的相關性(r值)

3 討論

DN患者紅細胞免疫功能低下可能與患者紅細胞免疫黏附調節系統失調等密切相關，不僅發生紅細胞免疫黏附功能的下降，而且還發生血管壁上循環免疫復合物的堆積，參與了血管壁與周圍組織結合的損傷過程〔2〕。因此傳統針對糖脂代謝紊亂、血流動力學方面的治療無法阻斷氧化應激途徑和提高自身免疫功能。Schrier〔3〕提出氧化應激反應增強對機體將造成巨大的損害，將大大加速DN病程進展。前列地爾由花生四烯酸轉化而來，具有廣泛的藥理作用，對肺、心、腎及全身的動脈、靜脈都有擴張作用，同時具有抑制血小板聚集有作用，認為其在保護腎功能、減少尿蛋白中具有重要的作用〔4〕。

本研究發現前列地爾組患者UAER、mALB和β2-MG表達水平均明顯下降，FPG、HbA1c、TC、TG、Scr和 BUN 表達水平變化不大。這與文獻報道相一致。本研究中的UAER、mALB和β2-MG作為前列地爾療效的直觀評價指標，UAER、mALB和β2-MG表達水平在治療后明顯下降表明前列地爾可改善微循環，進而減緩腎小球系膜細胞和系膜基質的增生，保腎臟和腎功能，與相關研究一致〔5〕。DN患者腎組織中活性氧濃度升高，過量的ROS增加腎臟負擔，進而引起機體氧化應激反應〔6〕。SOD作為一種自由基清除劑，可作為一種間接反映機體氧自由基的指標〔7〕;MDA作為一種脂質過氧化物，可作為一種直接反映機體過氧化強度的指標〔8〕;ROS由線粒體產生，正常腎臟產生的少量ROS不會引起機體損傷，過量的ROS不僅調節了腎髓質血流的變化，還引起腎臟的進一步氧化損傷〔9〕。因此，本研究通過檢測上述3項指標，以綜合評估機體氧化應激情況。本研究顯示與對照組比較，治療后前列地爾組患者MDA和ROS水平明顯下降，SOD水平明顯上升。分析認為前列地爾通過激活細胞內腺苷酸環化酶致使局部血管擴張，改善了局部血流動力，降低了ROS的釋放，阻斷過氧化反應，進而起到保護腎臟組織細胞不進一步受到氧化應激引起的損傷〔10〕。

CD4+是具有增強免疫反應的作用，CD8+具有免疫抑制作用，CD4+/CD8+比值是反映免疫調節的指標〔11〕。本研究顯示與對照組比較，治療后前列地爾組患者CD4+和CD4+/CD8+水平明顯上升，早期活化T細胞和總淋巴細胞水平明顯下降，CD4+表達與MDA和ROS表達水平呈負相關，與SOD表達水平呈正相關;早期活化T細胞表達與MDA和ROS表達水平呈正相關，與SOD表達水平呈負相關。由上述結果推測，免疫細胞處于氧化和抗氧化平衡中而維持細胞正常功能，使得各種免疫細胞產生適度的免疫應答，而又不損傷機體組織。DN患者體內ROS增多，過多的ROS將削弱免疫細胞有絲分裂不應答，致使免疫細胞增殖降低，由此推斷氧化應激可能影響機體的細胞免疫功能〔11〕。

綜上所述，DN 患者血清 UAER、mALB、β2-MG、MDA、ROS、早期活化T細胞、總淋巴細胞、SOD、CD4+和CD4+/CD8+水平，可以作為觀察DN病情變化和預后的重要指標，針對DN患者的治療前列地爾可通過降低患者氧化應激狀態和增強免疫功能等作用延緩慢性腎臟病的發生、發展，間接地起到改善腎功能的作用，為進一步研究及尋找能全面干預和調節2型糖尿病患者代謝通路的藥物提供了新的方向。由此認為針對氧化應激和免疫功能可能是治療DN的方向之一。

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R589

A

1005-9202(2015)09-2419-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.049

王俊宏(1967-)，男，主任醫師，碩士生導師，主要從事糖尿病及其急性性并發癥的防治研究。

田 勇(1980-)，男，主治醫師，主要從事糖尿病及其并發癥研究。

〔2013-09-17修回〕

(編輯 曹夢園)