丹參中幾種脂溶性成分的含量分析

冷英梅

丹參中幾種脂溶性成分的含量分析

冷英梅

目的建立丹參中3種脂溶性成分含量的高效液相測定方法。方法色譜柱：ODS-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流動相：乙腈（A）-0.03%磷酸水溶液（B），0～60 min，10%A→68%A；60～70 min，68%A→80%A；70～80 min，80%A→100%A，流速：1.0 ml/min檢測波長280 nm，柱溫：25℃，進樣10μl。結果丹參酮I、二氫丹參酮I、丹參酮IIA具有良好線性關系，精密度、穩(wěn)定性、回收率等均符合藥典要求。結論高效液相法測定丹參中3種脂溶性成分具有準確性高、精密程度好、有良好的線性關系，可考慮作為丹參脂溶性成分含量測定方法。

丹參；脂溶性成分；二氫丹參酮Ⅰ；丹參酮Ⅰ；丹參酮ⅡA

丹參（Salvia miltiorrhiza Bge），為唇形科植物鼠尾草屬的干燥根及根莖[1]，味苦，性微寒[2-3]，是較為常見的中藥材之一。丹參因其根赤肉紫，形狀似參，故得名[4]，主產(chǎn)于河南、四川等地[5]，具有養(yǎng)血安神、調經(jīng)止痛、活血祛瘀等功效[6]。其脂溶性成分丹參酮類為主，如：異丹參酮I、異隱丹參酮II、丹參酮IIA等[7]。由于丹參中成分較多，為全面控制其質量，常規(guī)檢測丹酚酸 B、丹參酮ⅡA存在一定不足，為能有效鑒定丹參有效成分含量，本文旨在建立丹參脂溶性成分的含量測定方法，以期為其質量控制提供參考。

1 材料

島津LC-20A型高效液相色譜儀，配置有紫外檢測器；十萬分位天平，乙腈由國藥集團化學試劑有限公司提供，為色譜醇，水為超純水（自制），其他試劑均為分析純；二氫丹參酮Ⅰ，丹參酮Ⅰ，丹參酮ⅡA均由中國食品藥品檢定研究院提供；丹參藥材安徽亳州（批號20140125-20150413），粉碎過40目篩，待用。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：ODS-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流動相：乙腈（A）-0.03% 磷酸水溶液（B），0～60 min，10%A→68%A；60～70 min，68%A→80%A；70～80 min，80%A→100%A，流速：1.0 ml/min檢測波長280 nm，柱溫：25℃，進樣10 μl。

2.2 供試品溶液的制備

丹參藥材打粉后，過四號篩，采用萬分位天平精密稱定0.523 1 g藥材置250 ml具塞錐形瓶中，采用50 ml移液管精密移取甲醇溶液50 ml，記錄總計重量后，超聲20 min，放置室溫后，繼續(xù)稱重，用甲醇溶液補足損傷重量，搖勻后經(jīng)濾紙濾過，量取5 ml續(xù)濾液于50 ml棕色容量瓶中，加甲醇溶液至刻度，搖勻后密封，低溫保存?zhèn)溆茫褂们靶璺胖檬覝亍?/p>

2.3 對照溶液的制備

分別精密稱取各對照品適量，轉移至10 ml棕色容量瓶中，加甲醇定容，得到貯備液備用。后各取適量于25 ml容量瓶，甲醇加至刻度，制備混標，低溫避光備用。

2.4 方法學考察

根據(jù)藥典方法進行精密度、穩(wěn)定性、重復性、回收率考察，所得RSD分別是1.1%、0.9%、1.2%、1.3%，均符合標準，用移液管分別量取混標溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8 ml，保存于對應的容量瓶內(nèi)，通過甲醇均將其稀釋為10 ml，混勻，即得到各濃度梯度的溶液。采用“2.1項”色譜條件，分別取10 μl各溶液完成進樣，然后制作標準曲線，其中橫坐標為各濃度梯度，縱坐標為峰面積，曲線方程式為：二氫丹參酮Ⅰ：y=53 422x-12 358，r=0.999 3（1.12-9.23 μg/ml），丹參酮Ⅰ：y=52 424x-23 358，r=0.999 5（3.13-10.23 μg/ml），丹參酮ⅡA：y=4 356x-7 576，r=0.999 2（1.12-9.53 μg/ml）。

2.5 樣品脂溶性成分測定

參照以上樣品制作方法和相關檢測條件，對各批次樣品中3種脂溶性成分的含量進行測定。

3 結果

結果顯示，批號：141209、141218、150112脂溶性成分含量，分別是二氫丹參酮Ⅰ（0.732 mg/g、0.621 mg/g、0.583 0 mg/g）、丹參酮Ⅰ（1.234 mg/g、1.352 mg/g、1.631 mg/g）、丹參酮ⅡA（1.492 mg/g、1.576 mg/g、1.832 mg/g）。

4 討論

本組實驗采用梯度洗脫方式，成功建立了丹參中3種脂溶性成分的含量測定方法，所測樣品含量與文獻[8]結果基本一致，本法準確性高、精密程度好、有良好的線性關系，可考慮作為丹參脂溶性成分含量測定方法。

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京：化學工業(yè)出版社，2010：70.

[2]馬丙祥，董寵凱. 丹參的藥理作用研究新進展[J]. 中國藥房，2014，25（7）：663-665.

[3]李衛(wèi)祥. 丹參的藥理作用與臨床應用[J]. 北方藥學，2013，（3）：34-35.

[4]曹金儀. 丹參的化學成分及臨床用途[J]. 中國醫(yī)藥指南，2012，10（29）：53-55.

[5]王煒辰，吳學輝，鄭芳. 丹參藥理學研究進展[J]. 海峽藥學，2013，25（10）：24-25.

[6]劉靜，戴忠，王鋼力，等. 丹參活性成分及相關分離分析方法研究進展[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18（11）：288-295.

[7]王洋，陳濤，潘霖，等. 液質聯(lián)用技術在丹參成分分析中的應用[J]. 中草藥，2014，45（23）：3494-3502.

[8]程沛，韓東岐，胡偉慧，等. 高效液相色譜法同時測定丹參中10種水溶性和4種脂溶性成分的含量[J]. 藥物分析雜志，2015，35（6）：991-996.

Determination of Several Fat-soluble Components of Salvia

LENG Yingmei, Market Supervision Administration of Haiyang city, Haiyang 265100, China

ObjectiveTo establish salvia HPLC determination of three kinds of fat-soluble component content.MethodsColumn: ODS-C18 (4.6 mm ×250 mm, 5μm), mobile phase: acetonitrile (A) -0 03% aqueous solution of (B) phosphoric acid, 0～60 min, 10% A → 68% A, 60～70 min, 68% A → 80% A, 70～80 min, 80% A→100% A, fow rate: 1.0 ml/ min and the detection wavelength 280 nm, column temperature: 25℃, injection 10 μl.ResultsTanshinone I, dihydrotanshinone I, tanshinone IIA respectively range with good linearity, precision, stability and recovery etc. in line with pharmacopoeia requirements.ConclusionThe HPLC method for the determination of three kinds of fat-soluble components of salvia with high accuracy, good degree of precision, a good linear relationship can be considered as a method for the determination of fat-soluble components of Salvia.

Salvia, Fat-soluble ingredients, Dihydrotanshinone I, Tanshinone I, Tanshinone IIA

S567.53

A

1674-9308（2015）32-0180-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.32.133

265100 海陽市市場監(jiān)督管理局