卵黃抗體在毛皮動物疾病防治中的應用

（山東省濱州畜牧獸醫研究院山東濱州256600）

卵黃抗體在毛皮動物疾病防治中的應用

莊金秋，梅建國，王玉茂

（山東省濱州畜牧獸醫研究院山東濱州256600）

本文綜述了卵黃抗體IgY在毛皮動物（包括兔、水貂、狐貍、貉）疾病防治中的研究和應用，以期為廣大毛皮動物養殖業主及獸醫臨床科技工作者更好地防治動物疾病提供參考。

卵黃抗體；毛皮動物；疾病防治

1 卵黃抗體

卵黃抗體（Immunoglobulinof yolk，IgY）是家禽卵黃中存在的主要免疫球蛋白，一般從被抗原免疫的母雞卵黃中提取。當母雞機體受到抗原刺激后，誘導體內漿細胞分泌抗體，IgG隨血液循環到達卵巢并選擇性地轉移到成熟卵泡中形成IgY。與IgG相比，IgY具有抗原用量少、制備周期短、對動物損傷小、產量大、特異性強、靈敏度高，可進行定量檢測等優點，已被廣泛用于人及動物多種疾病的診斷與防治，并顯示出了良好的應用前景。

2 在疾病防治中的應用

2.1 兔瘟

兔瘟又叫兔病毒性出血癥，是由兔瘟病毒引起的一種急性、熱性、敗血性和毀滅性的傳染病。該病常呈暴發性流行，發病率及死亡率極高，給養兔業帶來了巨大的經濟損失。目前該病尚無有效治療藥物，疫苗接種7～10 d后才能產生足夠抗體，不能及時有效保護。因此，研究在疫苗免疫建立之前對兔瘟易感兔群有保護作用的方法，對控制該病具有非常重要的意義。王孝友等（2004）用兔瘟抗原免疫產蛋雞精制的IgY，采用血凝抑制試驗（HI）測定的最高滴度為15 log2。臨床應用效果表明，IgY（HI為13log2）對發病兔進行緊急防治，治愈率為84.38%～92.86%，能迅速控制疫情。張宏偉（2007）制備的兔瘟IgY的HI效價達14 log2，并能維持7周以上。使用試驗結果測出的有效治療劑量對3個兔群在兔瘟高發季節前，間隔15 d進行2次預防接種，與歷年相比，有效降低了發病率。隨后王治方等（2007）、湯少偉（2010）制備的兔瘟IgY也顯示出了較好的治療效果，對兔瘟早期治愈率為80%，對兔瘟緊急預防有效率為100%，并認為其研制的IgY安全性良好，作用迅速，非常值得推廣。核衣殼蛋白VP60是兔瘟的主要免疫原性蛋白，Li等（2014）重組表達VP60蛋白N端的250個氨基酸并制備IgY，結果表明，特異性IgY可顯著保護兔感染病毒，持續治療5 d后可顯著提高其存活率。

2.2 兔大腸桿菌病

又稱黏液性腸炎，是由致病性大腸桿菌及其產生的毒素所引起的一種暴發性腸道性疾病，以斷奶后不久的幼兔多發，且病程長，反復發作，死亡率高。范作良等（2006）制備了雞抗兔大腸桿菌高免IgY，并通過微量凝集試驗方法，研究了高免IgY的消長規律及臨床應用。結果表明，超強化免疫5周后，抗體效價達到高峰，9周后抗體效價逐漸下降。同一劑量IgY效價達26時，肌注2 mL/（kg·bw）體重，連用3 d對兔大腸桿菌感染的治愈率達90%。與頭孢噻肟進行的對比田間治療試驗，IgY的治愈率顯著高于頭孢噻肟。

2.3 特種毛皮動物疾病

（水貂、狐貍、貉）主要傳染病包括犬瘟熱、水貂細小病毒性腸炎、水貂阿留申病、狐貍腦炎、水貂出血性肺炎、狐加德納氏菌病等。我國閆新華等（2000）率先應用水貂腸炎病毒免疫蛋雞制備IgY，結果表明，經5次免疫制備的IgY，于最后一次免疫后第10 d其瓊脂擴散試驗（AGP）效價達1∶25；第30天效價為1∶23。該抗體較穩定，4℃保存120 d、-20℃保存180 d效價不變。用該抗體治療細小病毒性腸炎病犬，治愈率高達93.9%，證實其制備的IgY是成功的，可用于犬細小病毒性腸炎的治療。譚婷婷（2010）采用分離株水貂細小病毒MEV-ZYL-1免疫蛋雞，并利用氯仿和飽和硫酸銨結合的方法提純IgY，HI效價可維持在9 log2以上，這為水貂MEV防治奠定了基礎。莊金秋（2013）試驗應用水貂犬瘟熱CDV分離毒作為抗原免疫蛋雞制備IgY，并用AGP法和間接ELISA法測定其抗體水平。結果顯示IgY的最高抗體滴度與IgG接近，蛋雞3免后3～5 d可開始持續收集雞蛋制備IgY。臨床上應用其制備水貂CDV精制IgY和高免血清治療制劑對水貂犬瘟熱的綜合治療進行了探索。結果表明，精制IgY起到較好的治療效果，可進行批量生產用于臨床治療。王玉燕（2002）分別用犬瘟熱疫苗和犬腺病毒（CAV）疫苗免疫蛋雞，制備了活性較高的抗狐CDV和CAV的IgY。該IgY具有較高的活性，可作為特異性的工具蛋白用于相應抗原抗體的檢測。隨著人們對IgY研究的不斷深入，緩釋技術逐漸應用于IgY研究中以增強其作用效果。Li等（2009）用海藻酸鈉和殼聚糖為原料制備的微膠囊來包被IgY，既改變了IgY的抗胃酸能力，又減緩了IgY釋放速度，增強了IgY的添加效果。張婧蘭（2009）將制備的CDV和犬細小病毒（CPV）高免IgY，分別加入酸化0.25%殼聚糖溶液中，以硫酸鈉為交聯劑，在超聲作用下利用形成的殼聚糖微球對IgY進行包封，包封效果優良。在pH值為1的模擬胃液內37℃搖床2 h，制備的載藥殼聚糖微球能夠很好的保護IgY。

3 IgY在國際的應用研究

德國、韓國、日本等也有大量關于IgY應用研究的報道。應用IgY防治特種毛皮動物疾病，不會出現應用動物高免血清治療引起的副作用，又可避免同源或近源材料帶毒而導致本動物發病的潛在危險，對于有效降低動物疾病爆發、減少經濟損失將具有重要的意義。

自KIemperer（1983）首次報道雞蛋中存在IgY抗體以來，學者對IgY的研究不斷深入。歐洲替代方法驗證中心（ECVAM）建議以IgY代替哺乳動物IgG作為試驗和生產的抗體，不僅因為IgY的結構與IgG相似，而且IgY在許多功能方面優于IgG。在國內，雞也是率先實現SPF化和產業化的試驗動物，有利于IgY的規模化生產。因此，IgY在重大動物疫病防治與診斷方面擁有非常廣闊的應用前景。但是，目前來說在利用IgY進行動物疾病治療的過程中，仍需要注意一些問題，如通常IgY在動物發病的初期其治療的效果顯著，IgY與動物疫苗接種二者之間應間隔一定的時間，應用IgY注射效果比較好，而用作飲水效果不是十分顯著。相信隨著人們對于IgY研究的不斷拓展，其生產制備技術的不斷完善，IgY將在動物疾病防治中發揮出更大的作用。■（編輯：趙曉松）

《內治八法》講解牛病例練習題

牛，精神倦怠，體瘦毛焦，食欲不振，久瀉不止，脫肛，口色淡白，脈虛。治療宜選用的方劑是（ ）（執業獸醫師考試真題）

A、四物湯 B、曲蘗散 C、桂心散 D、六味地黃湯 E、補中益氣湯

病例解析：本病例屬于脾虛泄瀉,其主要癥狀是患畜精神沉郁，倦怠無力，體瘦毛焦，食欲減退，鼻唇冰涼。大便溏泄或稀薄，常混有沒有消化的飼料，大便一般無惡臭味。嚴重病例久瀉不止，甚至出現脫肛，口色淡白，舌苔白膩，脈虛無力等癥狀。

治療方法：患畜需補脾益氣，燥濕利水，可以采用補法中的補氣法進行治療。治療可選用補氣法的代表方劑補中益氣湯。

本病例中選項解析：四物湯是補血法的代表方劑，主要用于治療血虛證。曲蘗散是消食導滯法的代表方劑，主要用于清除胃中積食或腸中結滯。桂心散是以桂心為主用藥材的一種方劑，主要用于心脾虛損、氣血不足所致的失眠、驚悸、眩暈等癥。六味地黃湯是滋陰法的代表方劑，主要作用是滋陰補腎。補中益氣湯是補氣法的代表方劑，主要作用是補脾益氣，燥濕利水。所以本病例中，治療宜選用的方劑是補中益氣湯。（作者：向金梅）■（編輯：狄慧）

山東省現代農業產業技術體系毛皮動物創新團隊項目（SDAIT-18-011-15）

莊金秋（1978-），女，山東濰坊人，獸醫碩士，副研究員，主要從事細胞培養和動物用病毒疫苗研制。