腹瀉患者便檢出擬態弧菌分析

侯小娜

（遼寧省大連市金州新區疾病預防控制中心，遼寧大連116000）

腹瀉患者便檢出擬態弧菌分析

侯小娜

（遼寧省大連市金州新區疾病預防控制中心，遼寧大連116000）

目的：對腹瀉患者糞便中的擬態弧菌進行檢測分析。方法：2014年9月，我們按WS289-2008霍亂弧菌診斷標準和中華人民共和國衛生部衛生防疫司第五版霍亂防治手冊及大連市疾控中心《腸道致病菌檢測方法》和相關資料進行霍亂弧菌、副溶血弧菌、擬態弧菌、河湖菌、氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌分離鑒定。結果：從1例腹瀉患者糞便中分離出一株擬態弧菌。結論：國外關于本菌引起人類腹瀉及其他感染的報道在逐漸增多，但國內報道極少，本次檢出將有助于國內感染性腹瀉的研究。

腹瀉；梗檢；擬態弧菌

2014年9月，我們從1例腹瀉患者的便中分離出一株擬態弧菌，現對實驗室檢測進行分析。

1 材料與方法

1.1 標本：2014年9月腹瀉患者致瀉性弧菌檢測。

1.2 試劑：培養基均由青島高科園海博生物技術有限公司生產，所有試劑均在其有效期內使用。

1.3 診斷學清：均由寧波天潤生物藥業有限公司生產，均在其有效期內使用。

1.4 方法：WS271-2007感染性腹瀉診斷標準［1］及大連市疾控中心《腸道致病菌檢測方法》［2］和相關資料［3］進行檢驗。

1.4.1 鏡檢：取患者新鮮糞便鏡檢，取3%三糖鐵培養基培養物進行涂片染色鏡檢。

1.4.2 增菌分離培養：用無菌棉簽蘸取患者新鮮糞便直接涂抹于SS平板、麥康凱瓊脂平板和慶大霉素平板進行直接分離培養；同時將2～5g新鮮糞便接種到10ml堿胨水管中。堿胨水管放37℃增菌8～12h；從菌液生長最茂盛的的菌膜下表層取一接種環，劃線接種于TCBS、SS、慶大霉素及麥康凱瓊脂平板，37℃培養24h。

1.4.3 生化反應：從平板上挑取可疑菌落轉種三糖鐵瓊脂培養基并作氧化酶、耐鹽生長試驗，并接種半固體、硝酸還原試驗、檸檬酸鹽、靛基質、V-P、尿素酶、L-賴氨酸、L-鳥氨酸、L-精氨酸、葡萄糖、乳糖、麥芽糖、D-甘露醇、蔗糖、L-阿拉伯糖、纖維二糖、水楊素、明膠酶、苯丙氨酸脫羧酶、ONPG、神奈川試驗。

1.4.4 血清學試驗：取可疑菌落用霍亂弧菌O1群多價及O139群診斷學清診斷。

2 結果

從1例腹瀉患者糞便中分離出一株擬態弧菌。

2.1 鏡檢：取新鮮糞便鏡檢可見白細胞并伴有紅細胞懸滴標本可見穿梭樣運動，涂片染色鏡檢該菌株為革蘭陰性弧菌。氧化酶陽性，符合弧菌科細菌，繼續進行鑒定。

2.2 培養特性：在3%氯化鈉堿性蛋白胨水中渾濁生長，表面形成菌膜，在半固體瓊脂沿穿刺線擴散生長。菌株在SS和麥康凱瓊脂平板上形成中等大小，光滑濕潤、無色，半透明的菌落，在慶大霉素平板上形成光滑濕潤，邊緣整齊、中心呈灰黑色扁平菌落，酷似霍亂菌落，在血平板上菌落周圍形成透明β溶血環。3%氯化鈉三糖鐵培養基上底層產酸不產氣，斜面不變，乳糖、蔗糖不分解，有動力，不產硫化氫。

2.3 血清學試驗：取可疑菌落用霍亂弧菌O1群多價及O139群診斷學清不凝集，試驗為陰性。

2.4 生化反應：氧化酶陽性，賴氨酸脫羧酶陽性，精氨酸雙水解酶陰性，鳥氨酸脫羧酶陽性，液化明膠，尿素陰性，V-P陰性，硝酸鹽還原試驗陽性，靛基質陽性，檸檬酸鹽陰性，硫化氫陰性，苯丙氨酸脫羧酶陰性，發酵葡萄糖產酸不產氣，乳糖陰性，蔗糖陰性，麥芽糖陽性，纖維二糖陰性。L-阿拉伯糖陰性，D-甘露醇陽性，水楊素陰性，ONPG陽性，無鹽胰胨水和3.0%胰胨水生長，6.0%、8.0%、10.0%胰胨水均不生長，神奈川試驗陽性。

結合以上形態學、血清學、生化試驗、嗜鹽試驗結果與擬態弧菌典型特性相符，由此確定該菌株為擬態弧菌。

3 討論

1981年從腹瀉患者糞便中檢出該菌，故由國外學者命名為“擬態弧菌”。擬態弧菌是今年新認識的腹瀉病原菌，除美國發現外還曾從加拿大、墨西哥、新西蘭及一些亞洲國家發現。該菌廣泛存在于自然界河水、海水和海產品中，多呈散發或暴發，一年四季均有發病，以夏季為多。發病者多有吃生牡蠣、蝦蟹史。本例患者在發病14h前，曾進食牡蠣，感染可能與此有關。

擬態弧菌系革蘭陰性弧菌在形態、特性與霍亂弧菌相似，實驗室檢查應引起注意，通過蔗糖、V-P試驗、血清學加以鑒別。流行性腹瀉弧菌的檢測多集中在霍亂弧菌，然而非霍亂弧菌也可引起散發的病例。所以在日常工作中對于尤其對于疑似霍亂患者的診斷，當和霍亂診斷學清不發生凝集時，就應該考慮進一步做其他致病性弧菌的檢測，這樣會大大提高致病菌的檢測率。

［1］中華人民共和國衛生行業標準.北京：人民衛生出版社，2007：11-12.

［2］腸道致病菌檢測方法.大連：大連市疾控中心，2013：1-4.

［3］俞樹榮.微生物學和微生物學檢驗［M］.2版.北京：人民衛生出版社，1997：190-191.

R442.2

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1002－2376（2015）11－0094－02

2015－08－24